呼吸道感染兒童九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體結(jié)果分析

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呼吸道感染兒童九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體結(jié)果分析

目的 探討九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體在呼吸道感染兒童中的流行現(xiàn)狀，為臨床有效防治提供依據(jù)。方法 選取呼吸道感染住院患兒1 454例，間接免疫熒光法檢測(cè)嗜肺軍團(tuán)菌血清1型（LP1）、肺炎支原體（MP）、Q熱立克次體（COX）、肺炎衣原體（CPn）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（INFA）、乙型流感病毒（INFB）和副流感病毒1、2、3型（PIVs）IgM抗體，分析其陽性率及季節(jié)性變化。結(jié)果 在1 454例患兒中，共檢出呼吸道病原體IgM抗體陽性729例，陽性率50.14%；MP陽性率最高，其次為INFB、ADV、RSV、PIVs；MP和INFB在女性患兒陽性率顯著高于男性患兒（P＜0.01）；不同年齡段患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率不同，3～7歲患兒陽性率最高，其中MP和INFB陽性率分別為55.70%和33.76%，顯著高于其他年齡段患兒（P＜0.01）；MP、PIVs、RSV、INFB、LP1和ADV在5月份的陽性率最高，分別是59.49%、14.56%、13.29%、43.67%、5.06%和30.38%。結(jié)論 兒童呼吸道病原體主要是MP和INFB，女孩陽性率顯著高于男孩，3～7歲年齡段兒童為呼吸道病原體感染的高發(fā)人群。

呼吸道感染；呼吸道病原體；兒童

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-6-6 13：52：32 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160606.1352.040.html

2015-04-14接收

呼吸道感染是兒童最常見的感染性疾病，嚴(yán)重威脅著兒童健康。呼吸道病原體分布因地區(qū)、季節(jié)、年齡的不同存在差異，掌握本地區(qū)兒童呼吸道病原體的流行趨勢(shì)，對(duì)疾病的預(yù)防、臨床診斷和治療有重要意義。該研究分析了1 454例呼吸道感染住院患兒常見九項(xiàng)病原體IgM抗體種類以及年齡、性別和季節(jié)性等流行病學(xué)分布特征。

1　材料與方法

1.1病例資料 選取安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2014年12月～2015年11月呼吸道感染住院患兒1 454例，年齡0～14歲，其中男896例，年齡0～14 （2.88±2.85）歲；女558例，年齡0～14（3.49± 3.29）歲。根據(jù)人民衛(wèi)生出版社《兒科學(xué)》第8版的定義，本研究按患兒年齡分為4組：0～1歲（嬰兒組）、1～3歲（幼兒組）、3～7歲（學(xué)齡前組）、7～14歲（學(xué)齡組）。呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)按照人民衛(wèi)生出版社《內(nèi)科學(xué)》第8版，所選病例排除自身免疫性疾病等基礎(chǔ)疾病。

1.2主要儀器 九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒購于西班牙VIRCELL SL公司；BX51型熒光顯微鏡購于中國OLYMPUS公司。

1.3方法 采集患兒外周靜脈血3 ml，3 000 r/min離心10 min分離血清。間接免疫熒光法嚴(yán)格按操作說明檢測(cè)九項(xiàng)常見呼吸道病原體IgM抗體。陽性結(jié)果判斷：可以觀察到腺病毒（adenovirus，ADV）、流感病毒、呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）或副流感病毒（parainfluenza virus，PIVs）對(duì)陽性血清的1%～15%細(xì)胞的細(xì)胞核、胞漿或胞膜呈蘋果綠色熒光（在PIVs和RSV中能同時(shí)觀察到著色的合胞）；嗜肺軍團(tuán)菌血清1型（legionella pneumophila，LP1）、肺炎衣原體（chlamydia pneumoniae，CPn）或Q熱立克次體（Q fever Coxiella burnetii，COX）中所有的細(xì)菌呈蘋果綠色熒光；肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）對(duì)陽性血清在細(xì)胞外圍呈蘋果綠色熒光。陰性結(jié)果判斷：LP1、CPn和COX無熒光，MP、ADV、甲型流感病毒（influenza A virus，INFA）和乙型流感病毒（influenza B virus，INFB）、RSV和PIVs的細(xì)胞呈紅色。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)（%）表示，率的比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1呼吸道病原體IgM抗體陽性率 在1 454例患兒中，共檢出呼吸道病原體IgM抗體陽性729例，陽性率50.14%，不同病原體陽性率見圖1。

圖1　1454例患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率（%）

2.2不同性別患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率

在1 454例患兒中，女性患兒呼吸道病原體IgM抗體總體陽性率56.09%，顯著高于男性患兒陽性率46.43%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.8，P＜0.01）；其中MP、INFB在女性患兒中的陽性率高于男性患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=19.348、9.614，P＜0.01）。見圖2。

圖2　不同性別患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率的比較（%）

2.3不同年齡段患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率 不同年齡層次呼吸道病原體感染率不同，3～7歲患兒組檢出病原體感染陽性率較其他年齡組增高，其中MP和INFB檢出陽性率最高，分別為55.70%和33.76%，與其他年齡組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=162.1、54.197，P＜0.01）。不同年齡段患兒呼吸道病原體IgM抗體陽性率比較見表1。

2.4不同月份呼吸道病原體IgM抗體陽性率MP、PIVs、RSV、INFB、LP1和ADV在5月份的檢出陽性率最高，分別是59.49%、14.56%、13.29%、43.67%、5.06%和30.38%。從季節(jié)上看，MP檢出陽性率在5～8月份（春夏季）較高，與其他月份比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=111.6、101.7、106.8、72.46，P＜0.01）；INFB在3～5月份（春季）的檢出陽性率最高，與其他季節(jié)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.847，P＜0.05）；RSV在1、4、5月份陽性率較高，與其他月份比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 43.849、42.957、61.639，P＜0.01）；ADV在4～5月份（春季）的陽性檢出率高于其他月份，與其他月份比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=53.058、143.8，P＜0.01）；其他病原體季節(jié)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，呈全年散發(fā)狀態(tài)。見表2。

表1　不同年齡段患兒九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體陽性率的比較

3　討論

在發(fā)展中國家，呼吸道感染病死率占兒童病死率的30%，近年來隨著抗生素的合理應(yīng)用，細(xì)菌引起的兒童呼吸道感染在逐年下降，而病毒及非典型病原體（肺炎支原體、肺炎衣原體和軍團(tuán)菌）引起兒童呼吸道感染日趨嚴(yán)重［1］。目前，呼吸道病原體檢測(cè)方法主要包括培養(yǎng)分離法、血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè)，培養(yǎng)分離法和核酸檢測(cè)靈敏度高，但培養(yǎng)陽性率受標(biāo)本采集、運(yùn)送、接種是否及時(shí)等因素的影響；核酸檢測(cè)技術(shù)條件要求嚴(yán)格、成本高，其檢測(cè)通量無法滿足日益增多的臨床標(biāo)本數(shù)量。本研究采用間接免疫熒光法檢測(cè)九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體，靈敏度高、操作簡便、成本低廉，可快速準(zhǔn)確檢測(cè)多種呼吸道病毒和非典型病原體，及時(shí)準(zhǔn)確為臨床提供病原學(xué)參考依據(jù)［2］。

表2　不同月份九項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體陽性率的比較［n（%）］

各地區(qū)兒童呼吸道病原體IgM抗體陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本研究九項(xiàng)呼吸道病原體在患兒中檢出總陽性率為50.14%，高于廖兵等［3］報(bào)道的重慶北部地區(qū)患兒檢測(cè)陽性率38.42%和鄭輝等［1］報(bào)道的杭州患兒檢測(cè)陽性率33.9%，但低于何成祿等［4］報(bào)道的昆明患兒檢測(cè)陽性率55.2%。本研究MP檢出率最高為38.58%，其次為INFB（23.25%）、ADV（8.46%）、RSV（4.75%）和PIVs （4.68%），說明本地區(qū)兒童呼吸道病原體主要為MP和INFB，這與重慶北部地區(qū)相同［3］，而蘇州地區(qū)兒童呼吸道病原體主要為MP和RSV［5］，無錫地區(qū)呼吸道病原體則以MP和LP1為主［6］，北京地區(qū)主要以流感病毒（包括INFA和 INFB）感染為主［7］，可能與當(dāng)?shù)貧夂颦h(huán)境、診斷標(biāo)準(zhǔn)以及研究對(duì)象不同等因素有關(guān)。

不同性別和年齡組對(duì)呼吸道病原體的易感性存在差異，本研究結(jié)果顯示，MP和INFB在女性患兒中的陽性率高于男性患兒，導(dǎo)致女性總體感染陽性率也顯著高于男性患兒，與文獻(xiàn)［6］報(bào)道一致。本研究中3～7歲學(xué)齡前患兒組呼吸道病原體IgM抗體陽性率最高，主要以MP和INFB感染為主，陽性率分別是55.70%和33.76%，與文獻(xiàn)［3，8］報(bào)道一致?？赡艿脑蚴窃撃挲g段兒童免疫力低下，大多集中在人口密集的幼兒園和學(xué)校，提供了交叉感染和局部暴發(fā)流行的機(jī)會(huì)，造成該年齡段兒童感染率增加。文獻(xiàn)［9］報(bào)道，RSV是嬰幼兒肺炎和支氣管炎的主要感染病原體，大多數(shù)3歲以下嬰幼兒有感染史。本研究顯示RSV在0～3歲嬰幼兒組陽性檢出率為5.92%，高于其他年齡組患兒的陽性率。但是數(shù)據(jù)顯示0～3歲嬰幼兒組呼吸道病原體以MP和INFB為主，這與嬰幼兒呼吸道病原體均以RSV為主的報(bào)道不同［3］，可能與本地區(qū)日照條件、地理環(huán)境和氣候特點(diǎn)等因素有關(guān)。

兒童呼吸道病原體的流行有明顯的季節(jié)性，不同地區(qū)報(bào)道不一致。本研究顯示MP主要集中在5 ～8月份（春夏季），而韓國報(bào)道 MP流行高峰發(fā)生在秋冬季節(jié)［10］。INFB、ADV、LP1在3～5月份（春季）的檢出陽性率最高，RSV在1、4、5月份陽性率較高，與文獻(xiàn)［3-6，11］報(bào)道有一定差距，可能與不同地區(qū)在不同季節(jié)的溫度、濕度和降水量等氣候因素影響病原體的增殖相關(guān)。本地區(qū)5月份檢出兒童呼吸道病原體陽性率最高，MP、PIVs、RSV、INFB、LP1和ADV陽性率分別是59.49%、14.56%、13.29%、43.67%、5.06%和30.38%，提示5月份是呼吸道病原體感染的高發(fā)季節(jié)，應(yīng)給予高度重視。

近年來，呼吸道病原體多重感染常見，以MP合并INFB的二重三重感染為主，可能是MP感染兒童呼吸道后導(dǎo)致正常的免疫功能紊亂，其他病原體趁機(jī)入侵，所以當(dāng)患者單一用藥療效不理想時(shí)，臨床上應(yīng)考慮多重感染，避免抗生素濫用［5，11］。由于機(jī)體感染病原體后產(chǎn)生特異性IgM抗體有一定的時(shí)效性，故臨床上要密切結(jié)合患兒的年齡、病史、免疫狀態(tài)等因素，正確分析判斷檢測(cè)結(jié)果可能出現(xiàn)的假陽性和假陰性，條件允許的情況下，盡可能采集患兒恢復(fù)期或是感染后期的血清做對(duì)照分析，這樣病原學(xué)診斷意義會(huì)更大。

綜上所述，本地區(qū)兒童呼吸道病原體主要為MP和INFB，3～7歲學(xué)齡前感染率明顯高于其他年齡段患兒，春夏季節(jié)發(fā)病率較高，尤其注重預(yù)防感染。通過本院兒童呼吸道感染住院患兒的病原檢測(cè)結(jié)果分析，客觀認(rèn)識(shí)了本地區(qū)兒童呼吸道病原體的流行病學(xué)特征，對(duì)兒童呼吸道感染的預(yù)防、臨床診斷和治療措施有重要意義。

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IgM antibodies against 9 kinds of respiratory pathogens in children with respiratory infectious diseases

Li Tao，Xu Enjun，Chen Qiuli，et al
（Dept of Clinical Laboratory，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022）

Objective To investigate the epidemiological characteristics of IgM antibodies against 9 kinds of respiratory pathogens in children so as to provide evidence for clinically effective prevention and treatment.Methods On 1 454 children with respiratory infectious diseases in hospital，IgM antibodies against legionella pneumophila （LP1），mycoplasma pneumoniae（MP），q fever coxiella burnetii（COX），chlamydia pneumoniae（CPn），adenovirus（ADV），respiratory syncytial virus（RSV），influenza A virus（INFA），influenza B virus（INFB）and parainfluenza virus（PIVs）were measured by indirect immunofluorescence assay.The positive rate of IgM antibodies and its seasonal distribution were observed.Results Among 1 454 cases，there were total 729 positive cases of IgM antibodies against 9 kinds of respiratory pathogens and the positive rate was 50.14%.The positive rate of MP was highest，followed by INFB，ADV，RSV and PIVs.The positive rates of MP and INFB in girls were significantly higher than it in boys（P＜0.01）.In different age groups，the positive rates of IgM antibodies against respiratory tract pathogens were different and the positive rate was highest in 3～7 years old group，in which positive rates of IgM antibodies against MP and INFB were 55.7%and 33.76% ，which were significantly higher than the positive rate of infection in children in other age groups（P＜0.01）.In a year，the positive rates of IgM antibodies against MP，PIVs，RSV，INFB，LP1 and ADV were highest in May，which were 59.49%，14.56%，13.29%，43.67%，5.06%and 30.38%respectively.Conclusion Children with respiratory infectious diseases are mainly infected by MP and INFB and positive rate in girls is significantly higher than that in boys.The children between 3 and 7 years old are the high-risk population with respiratory infectious diseases.

respiratory infectious；respiratory pathogens；child

李 濤1，徐恩君1，陳秋莉1，郝 麗1，肖春紅1，徐元宏1，周 敏2，徐勝前3

R 725.6

A

1000-1492（2016）07-1011-04

國家自然基金（編號(hào)：30801088、81201488、81571572）；衛(wèi)生部應(yīng)用研究項(xiàng)目“高通量ELISA檢測(cè)系統(tǒng)化、標(biāo)準(zhǔn)化系列研究”（編號(hào)：28-1-50）

安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院1檢驗(yàn)科、2ICU、3風(fēng)濕免疫科，合肥 230022

李 濤，男，副教授，副主任技師，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：limedical1974@126.com