長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對膀胱癌生長的影響

陳　明偉，黎　健發(fā)，莊　成樂，劉　宇辰，陳　志聰，何　安　邦，張　巧　霞，黃衛(wèi)　人，蔡　志　明

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長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對膀胱癌生長的影響

陳明偉1，2，3，黎健發(fā)2，3，莊成樂2，3，劉宇辰2，3，陳志聰2，3，何安邦1，3，張巧霞2，黃衛(wèi)人1，2，3，蔡志明1，2，3

目的 研究長鏈非編碼RNA（LncRNA）SPRY4內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄本1（SPRY4-IT1）對膀胱癌生長的影響。方法 使用qRT-PCR法檢測SPRY4-IT1標(biāo)本和細(xì)胞表達水平并分析其臨床病理特征之間的關(guān)聯(lián)；使用特異性小干擾RNA（si-SPRY4-IT1）轉(zhuǎn)染兩種膀胱癌細(xì)胞，使用qRT-PCR法檢測si-SPRY4-IT1效果，再分別以CCK-8實驗、MTT實驗、劃痕實驗、ELISA實驗和流式細(xì)胞術(shù)檢測SPRY4-IT1對膀胱癌細(xì)胞在增殖、遷移和凋亡等方面的影響。結(jié)果 SPRY4-IT1在膀胱癌組織中高表達（68.33%，P=0.026 3）。SPRY4-IT1表達水平與病理分級（P＜0.05）和TMN分期（P＜0.001）有關(guān)。SPRY4-IT1在5637（P=0.002 29）和T24（P=0.000 12）細(xì)胞中明顯高表達。si-SPRY4-IT1可顯著降低SPRY4-IT1表達（P＜0.001）；si-SPRY4-IT1可顯著抑制兩種細(xì)胞的增殖、遷移和增加凋亡（P＜0.01）。結(jié)論 SPRY4-IT1在膀胱癌標(biāo)本組織和細(xì)胞水平中高表達，有促進膀胱癌細(xì)胞生長的作用，在膀胱癌中起著癌基因的作用。

膀胱癌；長鏈非編碼RNA；SPRY4-IT1；細(xì)胞增殖；細(xì)胞遷移；細(xì)胞凋亡

網(wǎng)絡(luò)出版時間：2016-6-6 13：52：32 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160606.1352.026.html

膀胱癌是最常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率在人類腫瘤發(fā)病率中位居前列，并呈明顯的上升趨勢，嚴(yán)重危及人類健康［1］。盡管目前膀胱癌的診療已經(jīng)取得了長足進步，但仍有許多問題亟待解決。早中期膀胱癌主要以手術(shù)治療，晚期膀胱癌患者手術(shù)效果較差，并且對放、化療多不敏感，復(fù)發(fā)率、死亡率高［2-4］。所以進一步研究膀胱癌機制對膀胱癌診療有重要臨床意義，尤其對放化療不敏感的晚期患者有重要意義。長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，LncRNA）是一類轉(zhuǎn)錄本長度大于200個核苷酸的不翻譯和編碼蛋白的長鏈RNA，目前人類基因組中LncRNA大約有23 000個，LncRNA進行大量的研究［5-7］，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用，但進一步的在疾病中發(fā)生的機制卻缺少突破性研究成果。SPRY4-IT1（SPRY4 intronic transcript 1）（基因ID：100642175）是一種目前研究較成熟的LncRNA，其異常表達與乳腺癌、胃癌、肺癌、腎癌和腦腫瘤等多種腫瘤疾病相關(guān)聯(lián)，提示其可能是一類必要的癌癥發(fā)生相關(guān)聯(lián)的疾病因子［8-15］。文獻［14］報道SPRY4-IT1與膀胱癌的預(yù)后等相關(guān)，該研究進一步觀察非編碼RNA SPRY4-IT1對膀胱惡性細(xì)胞生過程長的影響及與臨床病理特征聯(lián)系，為膀胱癌的診療提供新的精準(zhǔn)醫(yī)療靶標(biāo)，開辟新的途徑。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1膀胱癌患者標(biāo)本及對應(yīng)的資料 隨機選用60例深圳市第二人民醫(yī)院生物資源標(biāo)本庫保存的膀胱癌及其配對的癌旁正常組織標(biāo)本（2013年6月～2015年6月收集于安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科、南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院泌尿外科、中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院泌尿外科以及深圳市第二人民醫(yī)院泌尿外科等醫(yī)院行全膀胱手術(shù)切除的膀胱癌患者標(biāo)本，所取標(biāo)本均取得患者或家屬知情同意書簽字，并且得到各就診醫(yī)院和深圳市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會的正式批準(zhǔn)）?；颊呒{入標(biāo)準(zhǔn)：病理診斷為膀胱惡性腫瘤并接受全膀胱切除手術(shù)，并取得患者或家屬知情同意書簽字。排除標(biāo)準(zhǔn)：手術(shù)前接受化療等其他治療；病理診斷為膀胱良性腫瘤，病理診斷為其它的癌癥；拒絕簽署同意書。每對標(biāo)本包括手術(shù)切除后經(jīng)病理證實的膀胱癌組織及其配對癌旁正常組織（距離癌組織 ＞5 cm）各1份。膀胱腫瘤大小測量采用1999年WHO的RECIST標(biāo)準(zhǔn)即單徑測量法，以腫瘤的最大徑（cm）的變化代替體積的變化。本研究組織學(xué)類型分類采用WHO膀胱癌病理分級分類標(biāo)準(zhǔn)（2004年），臨床分期采用國際抗癌組織（UICC）及美國癌癥聯(lián)合會（AJCC）臨床分期的標(biāo)準(zhǔn)（2009年）。

1.1.2膀胱癌細(xì)胞系及正常細(xì)胞5637和T24兩種膀胱癌細(xì)胞系以及正常膀胱上皮細(xì)胞SV-HUC-1均購自中科院上海生科院。

1.1.3主要試劑 Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑、TRIzol RNA提取試劑（美國Invitrogen公司）；1640、DMEM和F12培養(yǎng)基、谷氨酰氨、進口胎牛血清（FBS）（混合1%青霉素-鏈霉素）（美國Gibco公司）；細(xì)胞毒性檢測試劑盒（cell counting kit-8，CCK8）、MTT、DMSO（美國Sigma aldrich公司）；人胱天蛋白酶3（human Caspase 3）和ELISA檢測試劑盒（中國武漢華美生物公司）；特異性si-SPRY4-IT1（5-CCCAGAATGTTGACAGCTGCCTCT-3′）［12］、對照組si-NC（5′-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3′）（蘇州吉瑪基因股份有限公司）。

1.1.4主要儀器 高速冷凍離心機、微量核酸蛋白檢測儀（美國Thermo公司）；Thermal Cycler C1000 PCR儀（美國BIO-RAD公司）；實時熒光Light Cycler 480Ⅱ定量 PCR儀（瑞士Roche公司）；迷你離心機（江蘇其林貝爾公司）；酶標(biāo)檢測儀（芬蘭Thermo公司）；恒溫水箱（上海比朗公司）；流式細(xì)胞儀（美國Beckman公司）。

1.2培養(yǎng)細(xì)胞膀胱癌（人）細(xì)胞5637、T24分別培養(yǎng)于1640和DMEM培養(yǎng)基（含10%FBS、1%谷氨酰胺、1%青霉素-鏈霉素混合液），放置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱培養(yǎng)，規(guī)范換液傳代。

1.3轉(zhuǎn)染 在6、12、24、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板取適量細(xì)胞鋪板培養(yǎng)，貼壁細(xì)胞融合度需達到40%～60%時（部分實驗融合度需要達到90%～100%），遵循生產(chǎn)廠家說明書通過Lipofectamine 2000將siRNA（si-SPRY4-IT1和si-NC）轉(zhuǎn)染入細(xì)胞，并放置于37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)孵育4～6 h后，分別重新?lián)Q1640和DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）繼續(xù)培養(yǎng)。

1.4實時熒光定量qRT-PCR 嚴(yán)格依照TRIzol試劑說明書提取標(biāo)本及細(xì)胞RNA，cDNA逆轉(zhuǎn)錄嚴(yán)格遵循PrimeScript RT Reagent Kit說明書的規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的逆轉(zhuǎn)錄和實時熒光定量 qRT-PCR試劑說明書設(shè)置相應(yīng)的反應(yīng)條件和參數(shù)，內(nèi)參為GAPDH，進行cDNA逆轉(zhuǎn)錄合成和相應(yīng)的qT-PCR擴增。上下游引物序列均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，SPRY4-IT1 F：5′-TAAGCTTGTA GAGATGGGGGTTTCATCCTGTTGG-3′，R：5′-ACTCG AGAAAGACTCCCTTTCCTTAAGCAGATTCAC-3′［12］；GAPDH F：5′-CGCTCTCTGCTCCTCCTGTTC-3′，R：5′-ATCCGTTGACTCCGACCTTCAC-3′。采用2-ΔΔCt法數(shù)據(jù)分析，其計算公式為：ΔCt=CtSPRY4-IT1-CtGAPDH，ΔΔCt=實 驗 組（CtSPRY4-IT1-CtGAPDH）-陰性 對照組（CtSPRY4-IT1-CtGAPDH）。

1.5CCK-8實驗 取適量的細(xì)胞于96孔板接種培養(yǎng)，隔天分別轉(zhuǎn)染si-SPRY4-IT1和si-NC，實驗組和對照組兩組各設(shè)置6個復(fù)孔，轉(zhuǎn)染后0、24、48和72 h各時間點進行CCK-8檢測。每次加入CCK-8溶液相當(dāng)于各孔總體積的1/10，即每孔10 μl，1 h以后以450 nm波長檢測細(xì)胞光密度（optical density，OD）值，觀察兩組差異。

1.6MTT實驗 取適量的對數(shù)生長期細(xì)胞于96孔板接種培養(yǎng)，隔天分別轉(zhuǎn)染si-SPRY4-IT1和si-NC，實驗組和對照組各設(shè)置6個復(fù)孔，轉(zhuǎn)染后0、24、48和72 h各時間點進行MTT檢測。實驗終止前4 h每孔加入10 μl MTT溶液，4 h后，每孔加入150 μl的DMSO，10 min震蕩，以波長490 nm在酶標(biāo)儀檢測各孔細(xì)胞OD值，觀測兩不同處理組差異。

1.7細(xì)胞遷移試驗 取適量的細(xì)胞接種于6孔板中培養(yǎng)，按照上述實驗分組轉(zhuǎn)染4～6 h后，每組實驗設(shè)3個復(fù)孔，細(xì)胞的融合度需達到90%以上，用200 μl無菌移液槍頭劃線立即在光學(xué)顯微鏡下拍照，放置于37℃5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，24 h后再次在顯微鏡下拍照，取5個視野，測量劃痕兩側(cè)細(xì)胞間距取平均值，實驗重復(fù)3次。

1.8ELISA實驗 在24孔板中接種適量的細(xì)胞培養(yǎng)，24 h后轉(zhuǎn)染si-RNA，實驗組和陰性對照組分別各設(shè)6個復(fù)孔，48 h后收集細(xì)胞，用PBS重懸后反復(fù)凍融裂解細(xì)胞。在已經(jīng)包被Caspase-3抗體的聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加入細(xì)胞裂解液，37℃中孵育30 min，棄液后3次洗板；再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記工作液，37℃孵育30 min；棄液再5次洗板后加入底物溶液，20 min避光顯色，最后加入終止液。反應(yīng)終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測量每孔OD值，OD值大小可以間接反映Caspase-3的酶活性，進而說明細(xì)胞凋亡程度。

1.9流式細(xì)胞儀檢測實驗 細(xì)胞轉(zhuǎn)染后48 h，消化收集細(xì)胞并洗滌，然后重懸于200 μl的結(jié)合緩沖液，加入10 μl Annexin V-FTC和5 μl的PI后輕輕地混勻，避光室溫反應(yīng)15 min，再加入300 μl結(jié)合緩沖液，使用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡率以百分?jǐn)?shù)表示。

1.10統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 16.0軟件進行分析，上述所有實驗均重復(fù)3次，實驗數(shù)據(jù)以±s表示，組間差異采用t檢驗比較，多組間采用單因素方差分析比較（CCK-8和MTT實驗數(shù)據(jù)）。圖表用GraphPad Prism 6.0生成。

2　結(jié)果

2.1SPRY4-IT1在膀胱癌標(biāo)本和膀胱癌細(xì)胞系中高表達以及其表達量與臨床病理特征之間的聯(lián)系

膀胱癌組織中SPRY4-IT1表達明顯高于癌旁正常組織，其中高表達41例（68.33%）（t=6.835，P= 0.026 3），見圖1A。進一步研究結(jié)果提示：膀胱癌SPRY4-IT1表達水平與患者TMN分期（P＜0.001）和病理分級（P=0.024）有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤大小和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無明顯相關(guān)，見表1。相對于正常膀胱上皮細(xì)胞（SV-HUC-1），膀胱癌細(xì)胞在5637（t=6.919，P=0.002 29）和 T24（t=14.622，P =0.000 12）中明顯高表達（圖1B）。

表1　SPRY4-IT1表達水平與膀胱癌臨床病理特征之間的關(guān)系［n（%）］

2.2si-SPRY4-IT1可顯著下調(diào)膀胱癌細(xì)胞SPRY4-IT1表達 與si-NC組比較，在si-SPRY4-IT1組細(xì)胞 SPRY4-IT1表達均顯著降低，在5637（t =5.391，P=0.0057）和T24（t=17.868，P＜0.001）細(xì)胞系中差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，見圖2。表明si-SPRY4-IT1可明顯下調(diào)5637及T24細(xì)胞內(nèi)SPRY4-IT1的表達。

圖1　SPRY4-IT1在膀胱癌組織和細(xì)胞系中的表達

圖2　si-SPRY4-IT1對　SPRY4-IT1相對表達量的影響

2.3si-SPRY4-IT1抑制5637和T24細(xì)胞增殖CCK-8實驗結(jié)果顯示，si-SPRY4-IT1轉(zhuǎn)染細(xì)胞后24、48、72 h較對應(yīng)時間si-NC組OD值明顯降低，在5637（F=33.948，P＜0.001）和 T24（F=71.910，P ＜0.001）細(xì)胞系差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。見圖3。MTT實驗結(jié)果顯示，與si-NC組比較，si-SPRY4-IT1轉(zhuǎn)染細(xì)胞后對應(yīng)的各時間段OD值明顯降低，在5637（F=45.730，P＜0.001）和 T24（F=21.894，P ＜0.001）差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見圖4。

圖3　CCK-8檢測si-SPRY4-IT1對膀胱癌細(xì)胞增殖的影響

圖4　MTT檢測si-SPRY4-IT1對膀胱癌細(xì)胞增殖的影響

2.4si-SPRY4-IT1可抑制5637和T24的細(xì)胞遷移 與si-NC組比較，si-SPRY4-IT1組膀胱癌細(xì)胞系遷移明顯被抑制，在5637（t=5.749，P=0.004 54）和T24（t=5.664，P=0.004 79）細(xì)胞系中差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，見圖5。

圖5　si-SPRY4-IT1對膀胱癌細(xì)胞遷移的影響

2.5si-SPRY4-IT1可增加5637和T24的細(xì)胞凋亡 與si-NC組比較，ELISA實驗顯示si-SPRY4-IT1組的Caspase-3相對活性分別顯著增加，在5637（t =8.947，P=0.000 86）和 T24（t=7.372，P=0.001 80）細(xì)胞系中差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。流式細(xì)胞術(shù)實驗顯示si-SPRY4-IT1組的凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯增加。見圖6。

3　討論

目前惡性膀胱癌是主要危及人類健康的腫瘤疾病之一，其主要的治療方法早期主要是手術(shù)治療，包括部分電切同時加以輔助化療，但易復(fù)發(fā)；對于高級別浸潤性以及多發(fā)腫瘤等則主張早期全切，但其術(shù)后生活質(zhì)量卻明顯下降；對于晚期癌癥，生存率低，主要放化療治療，但易發(fā)生耐藥等［1-4］。因此，探索新的膀胱癌診斷技術(shù)、分子標(biāo)志物以及新的治療方法極有重要的意義。

圖6　si-SPRY4-IT1對膀胱細(xì)胞的凋亡的影響

非編碼RNA的研究起步較晚，很長時間里一直被認(rèn)為是無功能因而被人們忽視轉(zhuǎn)錄“噪音”。在過去十年中，研究［6-9］顯示許多LncRNA在各種疾病尤其是腫瘤中異常表達，預(yù)示著其在腫瘤的發(fā)生發(fā)揮重要的調(diào)控作用，而進一步的深入研究也證實這種調(diào)控作用；相對于在腫瘤中研究較成熟的microRNA，LncRNA的研究起步較晚，對于這種在癌癥中異常表達的不編碼蛋白長鏈RNA的功能和機制有待進一步研究探索，異常表達的LncRNA將有助于對腫瘤的診斷治療以及預(yù)后指導(dǎo)。因而，研究膀胱癌中異常表達的LncRNA及其功能機制對于提高膀胱癌的診療水平有重要的指導(dǎo)意義。

人的SPRY4-IT1堿基序列全長703 bp，基因位于染色體5q31.3。雖為抑癌基因SPRY4的內(nèi)含子區(qū)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，但SPRY4-IT1表現(xiàn)出癌基因的特征。如上所述，SPRY4-IT1在眾多腫瘤起著有重要的調(diào)控作用。非編碼RNA SPRY4-IT1可預(yù)測胃癌的預(yù)后和促進腫瘤的發(fā)生［9］，其通過上調(diào) ZNF703表達量促進乳腺癌細(xì)胞增殖［10］，與腎透明細(xì)胞癌和食管癌密切預(yù)后相關(guān)，可以調(diào)節(jié)黑色素瘤的凋亡和侵襲［11-13］；同時可以調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、遷移和凋亡等。由此假設(shè)SPRY4-IT1可能對膀胱癌細(xì)胞生長有重要影響。

本研究顯示，相對于癌旁組織和正常上皮細(xì)胞，膀胱癌組織和細(xì)胞水平中SPRY4-IT1明顯高表達。進一步研究結(jié)果表明si-SPRY4-IT1可下調(diào)SPRY4-IT1表達并且顯著抑制細(xì)胞增殖、遷移和促進凋亡，SPRY4-IT1是一種起著癌基因作用，并且正調(diào)控膀胱癌細(xì)胞生長因子，與文獻［8-15］報道一致。因此，深入研究SPRY4-IT1促進膀胱癌細(xì)胞生長機制對理解膀胱癌發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移有非常重要的意義。同時通過研究臨床病理資料分析顯示SPRY4-IT1的表達與病理分級、臨床分期等相關(guān)，而與年齡、性別以及腫瘤大小等無明顯關(guān)聯(lián)，進一步說明SPRY4-IT1有重要的臨床意義，將其真正轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用是下一步研究的重點。

隨著不斷進步的分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，尤其是分子篩選技術(shù)的進步為LncRNA機制研究提供新的方法和途徑。研究［13］表明細(xì)胞質(zhì)的SPRY4-IT1的二級結(jié)構(gòu)含有可能起著特殊作用的數(shù)個莖環(huán)和假結(jié)。在乳腺癌中SPRY4-IT1通過上調(diào)ZNF703 mRNA表達促進人乳腺癌細(xì)胞增殖［10］，在非小細(xì)胞肺癌中SPRY4-IT1通過組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶（EZH2）促進生長和轉(zhuǎn)移等，同時肺癌的侵襲性和轉(zhuǎn)移性能力是通過SPRY4-IT部分調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)型（epithelial-to-mesenchymaltransition，EMT）的作用［15］；在胃癌細(xì)胞中SPRY4-IT1可能通過DNA的甲基化而發(fā)揮作用，胃癌的轉(zhuǎn)移被發(fā)現(xiàn)可能是SPRY4-IT1調(diào)節(jié)EMT實現(xiàn)的［9］，暗示在膀胱癌存在著類似的調(diào)控機制，為進一步研究膀胱癌作用機制提供了思路，推斷SPRY4-IT1可能在膀胱癌中通過調(diào)節(jié)某種mRNA（ZNF703）或 DNA甲基化進而影響蛋白（EZH2）變化發(fā)揮其相應(yīng)的生物學(xué)功能，SPRY4-IT1影響膀胱癌侵襲能力等可能和其他腫瘤類似的調(diào)節(jié)過程即部分調(diào)節(jié)EMT等，但尚需進一步驗證。

綜上所述，本實驗確定了LncRNA SPRY4-IT1對膀胱癌細(xì)胞增殖、遷移以及凋亡等生長過程的正調(diào)控作用，在膀胱癌疾病中起著腫瘤癌基因的作用，為深入研究其在膀胱癌的作用機制奠定基礎(chǔ)。同時可作為膀胱癌治療的精準(zhǔn)醫(yī)療生物分子靶標(biāo)，從而改變目前晚期膀胱癌治療瓶頸。

（致謝：此文章獲得深圳市醫(yī)療衛(wèi)生“三名工程”資助）

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Long non-coding RNA SPRY4-IT1 inhibited the progression of bladder cancer

Chen Mingwei1，2，3，Li Jianfa2，3，Zhuang Chengle2，3，et al
（1Dept of Urology，Shenzhen Second People′s Hospital，Clinical Institute of Anhui Medical University，Shenzhen 518035；2Key Laboratory，3Dept of Urology，Shenzhen Second People′s Hospital，Shenzhen 518035）

Objective To investigate the effect of long non-coding RNA（LncRNA）SPRY4 intronic transcript 1 （SPRY4-IT1）on the cell progression of bladder cancer.Methods To detect the SPRY4-IT1 expression by qRTPCR and to analyze the correlation between its expression and clinical pathological features in the specimens and cells of bladder cancer.The specific small interfere RNA（si-SPRY4-IT1）was transfected into two bladder cancer cell lines respectively，and the transfection efficiency was evaluated by qRT-PCR.Then the CCK-8 assay，MTT assay，migration assay，ELISA and flow cytometry assay were used to detect cell proliferation，migration and apoptosis.Results The SPRY4-IT1 expression was obviously up-regulated in 68.33%of cancer samples（P=0.026 3）and related to bladder cancer histological grade（P＜0.05）and TNM stage（P＜0.001）.The SPRY4-IT1 expression was obviously increased in 5637（P=0.002 29）and T24（P=0.000 12）.The expression of SPRY4-IT1 could be down-regulated by si-SPRY4-IT1（P＜0.001）.Si-SPRY4-IT1 could remarkably inhibit the proliferation（P＜0.001），suppress imigration（P＜0.01）and increase apoptosis（P＜0.01）.Conclusion SPRY4-IT1 is up-regulated in bladder cancer tissues and cells.SPRY4-IT1 plays an oncogene role in promoting cell growth of bladder cancer.

bladder cancer；long non-coding RNA；SPRY4-IT1；cell proliferation；cell imigration；cell apoptosis

R 737.14

A

1000-1492（2016）07-0978-07

2016-03-23接收

國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃（973計劃）（編號：2014CB745200）；國家自然科學(xué)青年基金（編號：81402103）；國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃（863計劃）（編號：2014AA020607）；廣東省自然科學(xué)基金（編號：2014A030313717）；深圳 市 科 技計劃 項 目（編 號：JCYJ20150330102720130、GJHZ20150316154912494）

1安徽醫(yī)科大學(xué)深圳市第二人民醫(yī)院臨床學(xué)院泌尿外科，深圳 518035深圳市第二人民醫(yī)院2中心實驗室、3泌尿外科，深圳518035

陳明偉，男，碩士研究生；黃衛(wèi)人，男，研究員，責(zé)任作者，E-mail：pony8980@163. com；蔡志明，男，教授，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：caizhiming2000@163.com