宮頸癌患者組織中c-Met表達(dá)與宮頸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)系

張 莉，黃彥紅，柳愛華，李 靜，馬 倩，張 杰

沈陽市婦女兒童保健中心，遼寧 沈陽 110032

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宮頸癌患者組織中c-Met表達(dá)與宮頸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)系

張 莉，黃彥紅，柳愛華，李 靜，馬 倩，張 杰

沈陽市婦女兒童保健中心，遼寧 沈陽 110032

〔目的〕 探討宮頸癌患者組織中c-Met表達(dá)與宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)系?！卜椒ā?選取沈陽市婦女兒童保健中心2007年6月至2012年6月間經(jīng)病理確診的患者120例。采用SP法檢測c-Met蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá)，采用Pearson和Spearman相關(guān)性探討c-Met表達(dá)與宮頸癌患者臨床特征的關(guān)系，采用Cox回歸模型探討c-Met表達(dá)與子宮頸癌轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的關(guān)系?！步Y(jié)果〕 120例子宮頸癌患者中轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)或死亡者35例，相關(guān)性分析提示c-Met蛋白水平與宮頸癌患者CA-125值、腫瘤的N分期、腫瘤侵犯深度成正相關(guān)；多因素分析提示，腫瘤分化程度(P=0.013)、c-Met水平(P=0.02)、腫瘤侵犯深度(P=0.04)是宮頸癌患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的獨立危險因素?！步Y(jié)論〕 宮頸癌組織中c-Met表達(dá)陽性是宮頸癌患者轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的獨立危險因素。

宮頸癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；復(fù)發(fā)；預(yù)后

宮頸癌是導(dǎo)致婦女死亡的首位惡性腫瘤，全球每年約有27.5萬患者死于宮頸癌。我國婦女宮頸癌的發(fā)病率已經(jīng)高達(dá)15/10萬[1]。肝細(xì)胞生長因子及其受體c-Met具有酪氨酸基酶的活性，可刺激上皮細(xì)胞增生，遷移習(xí)慣和方式的改變，與腫瘤的發(fā)生、浸潤轉(zhuǎn)移均有關(guān)系[2]，c-Met在惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào)已經(jīng)被大量研究證實[3]。采取疾病風(fēng)險分級管理，早期發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的危險因素可以積極預(yù)防。c-Met基因在宮頸癌中異常表達(dá)可能參與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展。對我院120例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，旨在探討c-Met基因表達(dá)與對宮頸癌轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的預(yù)測價值，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1　資料和方法

1.1一般資料

選取本院2007年6月至2012年6月在院并經(jīng)病理證實為宮頸癌的患者120例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重的慢性疾病(高血壓病、心臟病、慢性腎臟病、肝病等)；②既往或同時患有其他惡性腫瘤；③病例資料不完整；④不能完成隨訪的患者。本研究中所有患者均參照2010年中華人民共和國衛(wèi)生部制定的宮頸癌診療規(guī)范治療，記錄可能影響患者轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的影響因素，包括患者的年齡、體質(zhì)量、腫瘤侵犯深度、腫瘤N分期、術(shù)前CA-125水平等情況，所有患者均隨訪到2015年6月30日，以復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或死亡為終點事件。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。

1.2c-Met免疫組織化學(xué)染色及檢測

采用SP法檢測宮頸癌組織中c-Met表達(dá)。兔抗人c-Met蛋白(美國 Santa Crus)二步法試劑盒購于北京中杉生物技術(shù)公司。將宮頸癌組織切片進(jìn)行免疫組化染色、切片脫蠟、體積分?jǐn)?shù)3%的過氧化氫孵育、蒸餾水沖洗、PBS浸潤進(jìn)行抗原修復(fù)。按照二步法試劑盒進(jìn)行封閉、一抗孵育、沖洗后加二抗、辣根過氧化物酶標(biāo)記、DAB顯色、蘇木素復(fù)染、脫水、中性樹脂封片。400倍鏡下隨機(jī)采集標(biāo)本切片上、下、左、右、中各2個視野圖像，所有采集的圖像均使用Image-Pro Plus 6.0 圖像分析軟件分析，采用半定量積分法，結(jié)合染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比來評定陽性表達(dá)病例。先在低倍鏡下觀察切片整個視野，分別在腫瘤細(xì)胞及腫瘤間質(zhì)隨機(jī)選擇5 個高倍視野，結(jié)果取平均值。染色強(qiáng)度分級如下：無著色為0 分，淡黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3 分；陽性細(xì)胞密度分級為：陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分，10%～50%為2分，>50%為3分。兩項得分相乘結(jié)果≥3分為陽性表達(dá)，反之為陰性。

1.3隨訪

所有患者3 mon隨訪一次，終點事件為轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)或死亡，最后一次隨訪時間為2015年6月30日。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析

2　結(jié)果

2.1患者一般情況

120例宮頸癌患者中，年齡<45歲65例，≥45歲55例； CA-125正常者28例，升高者92例；腫瘤直徑≥4 cm 39例，<4cm 81例；c-Met蛋白陰性19例，陽性101例；腫瘤高分化82例，低分化32例；腺癌38例，鱗癌82例；Hpv高危型：陽性89例，陰性21例；脈管浸潤：無82例，有38例。隨訪到2015年6月30日，出現(xiàn)終點事件(轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)或死亡)者35例，未出現(xiàn)終點事件患者85例。

2.2宮頸癌組織中c-Met表達(dá)與臨床指標(biāo)的關(guān)系

采用Pearson和Spearman相關(guān)性分析探討各指標(biāo)間的相關(guān)性。結(jié)果顯示,宮頸癌組織中c-Met蛋白水平與宮頸癌患者CA-125值、腫瘤的N分期、腫瘤侵犯深度成正相關(guān)(r=0.335,P<0.05;r=0.182,P<0.05;r=0.276,P<0.05；r=0.282,P<0.05)。

2.3生存分析

將年齡、術(shù)前CA-125值、腫瘤侵犯深度、N分期、分化程度、c-Met水平等作為變量引入Cox回歸模型，單因素分析提示，術(shù)前CA-125值(P=0.03)、N分期(P=0.025)、脈管癌栓(P=0.027)、c-Met水平(P=0.002)與宮頸癌患者轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)密切相關(guān)，見表1。多因素分析提示，腫瘤分化程度(P=0.013)、c-Met水平(P=0.02)、腫瘤侵犯深度(P=0.04)是宮頸癌患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的獨立危險因素，見表2。

表1　影響宮頸癌患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的單因素分析

表2　影響宮頸癌患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的多因素分析

3　討論

宮頸癌是導(dǎo)致我國婦女死亡的主要惡性腫瘤之一，宮頸癌的發(fā)生與HPV感染、吸煙、性生活、妊娠等密切相關(guān)。宮頸癌好發(fā)于子宮頸下段，與病毒感染的相關(guān)性最強(qiáng)，特別是高危HPV病毒(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35)[4]。近年宮頸癌的發(fā)病率逐年增高，且有年輕化趨勢，是威脅女性健康的主要腫瘤。宮頸癌預(yù)后不一，影響預(yù)后的因素比較多，因此，早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌預(yù)后的危險因素，可以早期采取積極干預(yù)措施，進(jìn)行癌癥的風(fēng)險分級管理。腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)均可對患者造成較大的經(jīng)濟(jì)損失及生理負(fù)擔(dān)，因此，風(fēng)險分級管理意義重大[5]。研究[6]提示，腫瘤分化程度、腫瘤浸潤深度、腫瘤N分期均是判斷腫瘤預(yù)后的重要指標(biāo)，與腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)密切相關(guān)。

c-Met蛋白是肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor/scatter factor，HGF/SF)的受體，是原癌基因c-Met編碼的產(chǎn)物，主要存在于上皮細(xì)胞表面，具有酪氨酸激酶活性，參與細(xì)胞增殖、分化等生理活動的調(diào)節(jié)[7]。HGF由間質(zhì)細(xì)胞分泌，主要生理作用是刺激血管生成、調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫，促進(jìn)多種上皮、內(nèi)皮和間質(zhì)細(xì)胞增殖。HGF/c-Met正常生理狀態(tài)下主要是促進(jìn)組織器官修復(fù)[8]。c-Met在正常組織表達(dá)低下，但是腫瘤組織中c-Met蛋白表達(dá)水平可顯著上調(diào)。研究提示，高水平的c-Met與其配體HGF相互作用后，可通過旁分泌或自分泌激活多種信號通路，直接或間接刺激腫瘤增生、浸潤或轉(zhuǎn)移。國內(nèi)外均有研究[9]證實，高水平的c-Met是多種腫瘤預(yù)后不良的風(fēng)險因素，包括肝癌、胃癌、肺癌等，有學(xué)者[10]認(rèn)為，c-Met可能是導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移的重要分子。

本研究主要目的是探討宮頸癌組織中c-Met表達(dá)與宮頸癌患者轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的關(guān)系，首先回顧了本組120例患者的基本資料，并采用Pearson和Spearman相關(guān)性分析探討宮頸癌組織中c-Met表達(dá)與腫瘤各種臨床指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，c-Met蛋白與宮頸癌患者CA-125值、腫瘤的N分期、腫瘤分期、腫瘤侵犯深度成正相關(guān)，提示c-Met水平與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。為了進(jìn)一步探討c-Met基因與宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的關(guān)系，本研究采用Cox回歸模型，以宮頸癌轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)為因變量，將孕齡、腫瘤N分期、腫瘤分化程度、CA-125水平納入，探討子宮頸癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的危險因素，結(jié)果提示，腫瘤分化程度(P=0.013)、c-Met水平(P=0.02)、腫瘤侵犯深度(P=0.05)是宮頸癌患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的獨立危險因素。結(jié)果提示，c-Met在宮頸癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)中有重要作用，c-Met可能參與調(diào)節(jié)宮頸癌的生物學(xué)行為。

綜上所述，宮頸癌是威脅女性健康的主要惡性腫瘤，宮頸癌發(fā)病率逐年升高，宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)導(dǎo)致醫(yī)療負(fù)擔(dān)沉重。宮頸癌組織中c-Met表達(dá)水平與腫瘤N分期、腫瘤分化程度及腫瘤浸潤深度是宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的危險因素，但由于我們研究樣本量少，研究設(shè)計等問題，本研究結(jié)論仍需要大樣本的臨床研究來進(jìn)一步證實。

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[責(zé)任編輯時紅]

Relationship of c-Met expression with lymph node metastasis and recurrence of cervical cancer

ZHANG Li, HUANG Yanhong, LIU Aihua, LI Jing, MA Qian, ZHANG Jie

Women and Children Health Care Center in Shenyang, Shenyang 110032，China

〔Objective〕To investigate the relationship between c-Met expression with the node ratio lymph (LNR) and prognostic in gastric cancer. 〔Methods〕Retrospective analysis the clinical date of 120 patients who diagnosied with cervical cancer from june 2005 to june 2010. A linear regression model was used to investigate the relationship between the clinical data and c-Met expression, Mutivaritate analysis was performed using Cox proportional hazard regression model inforward stepwise. 〔Results〕38 cases occurred end point events. c-Met level was associated with preoperative CA-125, N stage, the depth of tumor invasion ； the degree of tumor (P=0.013) and c-Met (P=0.02), depth of tumor invasion (P=0.04) is an independent risk factor for cervical cancer patients with metastasis or recurrence.〔Conclusion〕The expression of c-Met in cervical cancer is positive independent risk factors in patients with cervical cancer metastasis and recurrence.

cervical cancer; lymph metastasis; recurrence; prognosis

1672-7606(2016)02-0122-03

2016-03-19

張莉(1972-)，女，遼寧沈陽人，主治醫(yī)師，從事婦產(chǎn)科疾病的診治工作。

R737.33

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