瓜蔞對心梗后心衰大鼠心功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響

張　騰，張艷軍，莊朋偉，張密霞，王子璇，秦袖平

(天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津市中藥藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津　300193)

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瓜蔞對心梗后心衰大鼠心功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響

張騰，張艷軍，莊朋偉，張密霞，王子璇，秦袖平

(天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津市中藥藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300193)

Effects of Gualou on cardiac function and cardiomyocyte apoptosis in heart failure following myocardial infarction in rats

ZHANG Teng,ZHANG Yan-jun, ZHUANG Peng-wei,ZHANG Mi-xia,WANG Zi-xuan,QIN Xiu-ping

(TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，TianjinKeyLabforPharmacologyofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China)

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2016.08.031

瓜蔞；心梗后心衰；心功能；心肌細(xì)胞凋亡；Bcl-2；Bax

瓜蔞是一味止咳化痰平喘中藥，目前對其研究主要集中于瓜蔞皮藥理作用的研究[1-3]，因此,本文采用全瓜蔞考察其對心梗后心衰大鼠心功能及心肌細(xì)胞凋亡的影響，以期為全瓜蔞的深入研究與臨床應(yīng)用提供借鑒。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物100只♂ SD大鼠，體質(zhì)量(230±20) g，購于北京華阜康生物科技有限公司，許可證號：SCXK(京)2014-0004。飼養(yǎng)于中國科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.1.2藥物與儀器全瓜蔞(產(chǎn)地：江蘇，批號：110201，北京華邈中藥工程科技開發(fā)中心)。超高分辨率小動(dòng)物超聲實(shí)時(shí)影像系統(tǒng)(加拿大VEVO2100)，PCR儀：伯樂。

1.2方法全瓜蔞用水煎煮后，旋成浸膏。模型復(fù)制方法參照以往報(bào)道[1]，手術(shù)1周后，進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查，選用LVEF≤45%[4]的模型大鼠進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。分成模型組(Model組)、瓜蔞組(GL組)、假手術(shù)組(Sham)，每組15只大鼠。假手術(shù)組和模型組給予蒸餾水，瓜蔞組按5.4 g·kg-1·d-1(相當(dāng)于臨床等效劑量的4倍)給藥，各組給藥量均按10 mL·kg-1灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥3周。

1.2.1檢測指標(biāo)給藥3周后，對大鼠進(jìn)行心功能檢查，每組分別取5只大鼠心臟，制作病理切片，按TUNEL試劑盒步驟進(jìn)行染色，并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI)/%=凋亡心肌細(xì)胞數(shù)/心肌細(xì)胞總數(shù)×100%。每組分別取3只大鼠心臟，稱取100 mg缺血邊緣區(qū)心臟組織，提取總RNA，RT-PCR法檢測缺血邊緣區(qū)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax mRNA的表達(dá)。

2　結(jié)果

模型組大鼠心室擴(kuò)張，心功能下降，促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡，抗凋亡基因表達(dá)下降，凋亡基因表達(dá)升高，其比值下降。給藥3周后，瓜蔞治療后可以抑制心梗后心衰大鼠心室擴(kuò)張，改善心功能，抑制心肌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)抗凋亡基因表達(dá)，抑制凋亡基因表達(dá)，提高兩者的比值。見Tab 1～3。

Tab 1　Comparison of cardiac function in each group of rats

**P<0.01vssham;#P<0.05vsmodel

Tab 2　Influence of Gualou on myocardial cell apoptosis rate

**P<0.01vssham;##P<0.01vsmodel

Tab 3　Bcl-2,Bax mRNA expression levels of rat myocardial cells

**P<0.01vssham;##P<0.01vsmodel

3　討論

心肌梗死后,心臟遭受重構(gòu)的過程,包括左心室擴(kuò)張和收縮功能障礙,這些常常導(dǎo)致心臟衰竭。急性心肌梗死后的缺血性損傷誘發(fā)細(xì)胞凋亡，而心衰時(shí)的細(xì)胞凋亡又能引起心肌細(xì)胞死亡。心肌細(xì)胞的缺失(死亡和凋亡)和心室重構(gòu)是心功能下降的最主要的原因。Bcl-2和Bax基因是Bcl-2家族成員，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的內(nèi)在途徑，它們決定了凋亡刺激后細(xì)胞的生存或死亡[4-5]。有報(bào)道表明，改變Bcl-2家族中促凋亡和抗凋亡成員的比值能夠確定凋亡的程度，而不是任何單一的Bcl-2成員基因的絕對表達(dá)水平[6]。

本實(shí)驗(yàn)復(fù)制了大鼠心梗后心衰模型，治療前通過超聲心動(dòng)圖檢查篩選出LVEF≤45%心衰成模大鼠進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，以便更加準(zhǔn)確地考察藥物的療效；治療后再次進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查評價(jià)大鼠心功能的變化，明確了瓜蔞對心梗后心衰大鼠心功能的影響，并從心肌凋亡角度對其作用機(jī)制進(jìn)行了探討。結(jié)果表明，瓜蔞能抑制心梗后心衰大鼠心室擴(kuò)張，改善心功能，抑制心肌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)心肌抗凋亡基因的表達(dá)、抑制凋亡基因的表達(dá)，提高兩者的比值，即瓜蔞改善心梗后心衰大鼠心功能，其機(jī)制可能是抑制心肌細(xì)胞凋亡。

[1]孫娟, 趙啟韜, 黃臻輝, 等.瓜蔞皮對急性心肌缺血大鼠的保護(hù)作用[J].中藥藥理與臨床, 2013,29(3):114-6.

[1]Sun J, Zhao Q T, Huang Z H, et al.Protection and anti-peroxidation of Trichosanthes pericarpium extract on rats acute myocardial infarction[J].PharmacolClinChinMed,2013,29(3):114-6.

[2]譚斌,劉韻,谷彬, 等.瓜蔞皮提取物對大鼠血管內(nèi)皮損傷的保護(hù)作用[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志, 2010,9(12):9-11.

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[3]劉思妤,谷彬, 盧新華,等.瓜蔞皮提取物對高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究[J].中國藥理學(xué)通報(bào), 2015,31(7):988-93.

[3]Liu S Y，Gu B，Lu X H，et al.Effects of extractive pericarpium trichosanthes on apoptosis of HUVECs induced by high glucose[J].ChinPharmacolBull，2015,31(7):988-93.

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[5]Lee Y S, Kang Y J, Kim H J, et al. Higenamine reduces apoptotic cell death by induction of heme oxygenase-1 in rat myocardial ischemia-reperfusion injury[J].Apoptosis, 2006, 11(7): 1091-100.

[6]Harris M H, Thompson C B. The role of the Bcl-2 family in the regulation of outer mitochondrial membrane permeability[J].CellDeathDiffer, 2000, 7(12):1182-91.

Gualou; heart failure after myocardial infarction;cardiac function; cardiac myocyte apoptosis;Bcl-2;Bax

2016-03-11,

2016-04-18

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)資助項(xiàng)目(No2011CB505300,2011CB505302)

張騰(1986-)，女，博士，研究方向：中藥藥理學(xué)，E-mail：zhangtengfeier@163.com;

張艷軍(1967-)，男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥藥理學(xué)，通訊作者，E-mail：zyjsunye@163.com

A

1001-1978(2016)08-1183-02

R-332；R282.71；R322.11；R329.25；R331.31；R541.61；R542.22

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-7-19 10:43網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160719.1043.062.html