結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)、PPD、CRP在兒童結(jié)核診治的臨床意義

阮琰，嚴(yán)紅梅，林偉，唐偉偉，熊麗君，林劍東，陳曉紅福建省醫(yī)科大學(xué)臨床教學(xué)醫(yī)院福建省福州肺科醫(yī)院，福建福州　350008

論著

結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)、PPD、CRP在兒童結(jié)核診治的臨床意義

阮琰，嚴(yán)紅梅，林偉，唐偉偉，熊麗君，林劍東，陳曉紅
福建省醫(yī)科大學(xué)臨床教學(xué)醫(yī)院福建省福州肺科醫(yī)院，福建福州350008

目的 分析兒童結(jié)核病診斷中結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT-TB）的應(yīng)用價(jià)值。方法 隨機(jī)選取2014年1月—2015年7月在福建省福州肺科醫(yī)院住院的兒童結(jié)核及非結(jié)核性肺部疾病患兒90例，包括結(jié)核病47例（A組）和非結(jié)核性肺部疾病患兒43例（B組），采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，采用χ2檢驗(yàn)比較T-SPOT-TB與痰抗酸桿菌涂片、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、結(jié)核抗體、PPD試驗(yàn)，比較其檢測(cè)結(jié)果，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)對(duì)兩組患兒進(jìn)行C反應(yīng)蛋白（CRP）測(cè)定，分析CRP在結(jié)核病鑒別診斷中的意義。結(jié)果T-SPOT-TB檢測(cè)診斷結(jié)核病的敏感度為87.2%（41/47），特異度為97.7%（42/43），PPD試驗(yàn)診斷結(jié)核病的敏感度為48.9%（23/47），特異度為67.4%（29/43），與PPD試驗(yàn)相比，T-SPOT-TB檢測(cè)診斷結(jié)核病的敏感度及特異度均比PPD試驗(yàn)高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2= 11.15，11.07，P＜0.05）。結(jié)核病患兒T-SPOT-TB檢測(cè)的陽(yáng)性率為87.2%，顯著高于結(jié)核抗體檢測(cè)、抗酸桿菌涂片、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=25.03、31.03、16.41，P＜0.05）。CRP測(cè)定結(jié)核病組的平均值為（33.09±19.96），非結(jié)核病組的平均值為（26.79±18.13），兩組統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論T-SPOT-TB檢測(cè)具有較高的敏感度和特異度，是診斷兒童結(jié)核的快速敏感方法，在兒童結(jié)核早期臨床診斷中有重要的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)核病中C反應(yīng)蛋白可升高，但是單純的C反應(yīng)蛋白測(cè)定在鑒別結(jié)核病與非結(jié)核性疾病中意義不大。

結(jié)核，肺/診斷；結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)；兒童

［Abstract］Objective To analyze the application value of T cell spot test（T-SPOT-TB）in the diagnosis of tuberculosis infection in children.Methods Random selection from January 2014 to July 2015，90 children with tuberculosis and non tuberculosis pulmonary disease in children in Fuzhou，F(xiàn)ujian Province，province，including 47 cases（A Group）of tuberculosis and 43 cases（B Group）of non tuberculous lung diseases.Using SPSS18.0 software was used for statistical analysis，using the C2 test comparison T-SPOT-TB and acid fast bacilli in sputum smear，Mycobacterium tuberculosis culture，tuberculosis antibody and PPD test，comparison of the test results，P＜0.05，the difference was statistically significant.At the same time of two groups of children of C-reactive protein（CRP）determination.Analysis the significance of CRP in differential diagnosis of tuberculosis.Results T-SPOT-TB in diagnosis of tuberculosis sensitivity was 87.2%（47），the specificity was 97.7%（42/43），the PPD test in the diagnosis of tuberculosis sensitivity for 48.9%（23/47）and specificity for 67.4%，compared with the positive rate of PPD test.The sensitivity and specificity of T-SPOT-TB in diagnosis of tuberculosis were higher than that of PPD test，the differences were statistically significant（χ2=11.15，11.07，P ＜0.05）.Positive rate was 87.2%in the tuberculosis in children with T-SPOT-TB detection，significantly higher than that of tuberculosis antibody detection，acid fast bacilli smear，Mycobacterium tuberculosis culture，the differences were statistically significant（χ2=25.03，31.03，16.41，P＜0.05）.The mean value of CRP in the tuberculosis group was（33.09±19.96），and the average value of the non tuberculosis group was（26.79±18.13）.There was no significant difference between the two groups （P＞0.05）.ConclusionT-SPOT-TB test has high sensitivity and specificity.It is a rapid and sensitive method for diagnosis of children with tuberculosis.It has important application value in early diagnosis of children with tuberculosis.C reactive protein in tuberculosis can be increased，but the simple C reactive protein determination is not significant in the differential diagnosis of tuberculosis and non tuberculous disease.

［Key words］Tuberculosis，Pulmonary/diagnosis；T cell spot test for tuberculosis infection；Children

世界衛(wèi)生組織 （WHO）2015年報(bào)告指出：全球有960萬(wàn)人罹患結(jié)核病，2014年150萬(wàn)人因結(jié)核病死亡，其中有48萬(wàn)名婦女；100萬(wàn)名兒童患結(jié)核病和14萬(wàn)名兒童死于結(jié)核病［1］。在兒童結(jié)核早期，缺乏典型的癥狀，全身多個(gè)系統(tǒng)都可被結(jié)核分枝桿菌（MTB）侵犯，提升了臨床表現(xiàn)的復(fù)雜性，尤其是肺外結(jié)核，病情經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)隱匿，或者缺乏典型的癥狀表現(xiàn)，增加了診斷中漏診的發(fā)生率［2-3］。臨床治療兒童結(jié)核病時(shí)，關(guān)鍵在于早期診斷、早期治療，改善患兒的預(yù)后情況，傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室診斷方法中，診斷準(zhǔn)確率比較差，且存在一定局限性，因此，需要尋找出一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，快速、準(zhǔn)確的診斷兒童結(jié)核病。

結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)中，診斷結(jié)核感染存在與否的方法是對(duì)結(jié)核感染后的T淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IFN-y的特異性進(jìn)行檢測(cè)。為MTB免疫學(xué)診斷提供了更加敏感與特異的手段，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。該研究通過(guò)隨機(jī)選取2014年1月—2015年7月期間于該院兒科住院的結(jié)核病患兒47例、非結(jié)核病患兒43例共90例患兒進(jìn)行檢測(cè)T-SPOT-TB及其他常見臨床診斷方法，探討其在兒童結(jié)核病的診斷意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

1.1.1納入標(biāo)準(zhǔn) 隨機(jī)選擇在福建省福州肺科醫(yī)院兒科2014年1月—2015年7月住院的0～15歲兒童結(jié)核病47例（A組）和非結(jié)核性肺部疾病患兒43例（B組）為研究對(duì)象。47例結(jié)核病兒童，男30例，女17例，年齡0.17～14歲，平均（7.14±5.06）歲；43例非結(jié)核性肺部疾病兒童，均診斷為肺炎，男24例，女19例，年齡1.25～14歲，平均（6.92±3.72）歲，兩組患者的年齡、性別構(gòu)成等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.1.2排除標(biāo)準(zhǔn)排除合并白血病等重大疾病的患兒，長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑治療的患兒。

1.1.3檢測(cè)項(xiàng)目 該院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后進(jìn)行此項(xiàng)研究，臨床研究中，需要檢查的項(xiàng)目為T-SPOT-TB、PPD、CRP，此檢查并不會(huì)導(dǎo)致研究對(duì)象產(chǎn)生額外不良影響，不增加研究對(duì)象額外的負(fù)擔(dān)。

1.1.4診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)兒童肺結(jié)核臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核，并按照治療方案治療［4-5］：非結(jié)核病

組以臨床表現(xiàn)，相關(guān)結(jié)核感染依據(jù)缺乏，活動(dòng)性結(jié)核臨床癥狀不明顯或沒有，未經(jīng)抗結(jié)核治療好轉(zhuǎn)恢復(fù)。

1.2方法

1.2.1PPD試驗(yàn)給予患者0.1 mL（內(nèi)含PPD 5 U），經(jīng)前臂皮內(nèi)注射，48～72 h后，對(duì)硬結(jié)直徑進(jìn)行測(cè)量，記錄測(cè)量結(jié)果，計(jì)算平均直徑，硬結(jié)平均直徑（mm）=（橫向直徑+縱向直徑）/2。硬結(jié)平均直徑≥10 mm時(shí)判定為PPD試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性。

1.2.2T-SP0T-TB測(cè)定于入院2～3 d內(nèi)采集外周靜脈血（10歲以上8 mL，2～9歲4 mL，2歲以下兒童2 mL），肝素抗凝，分離WBC，將細(xì)胞培養(yǎng)液加入其中，細(xì)胞重懸后，進(jìn)行洗滌操作。將細(xì)胞培養(yǎng)液加入到4個(gè)孔（位于已包被抗IFN-y抗體微量板）中，作為陰性對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照則選擇為植物血凝素 （PHA），實(shí)驗(yàn)孔選擇為MTB特異混合多肽ESAT-6與CFP-10（上海復(fù)星）。將上述懸液（含細(xì)胞25萬(wàn)）加入到每個(gè)孔中。在37℃條件下，培養(yǎng)微量板，時(shí)間 16～20 h，洗滌時(shí)利用PBS，共進(jìn)行4次，將抗人IFN-y單克隆抗體（堿性磷酸酶標(biāo)記）加入其中，2～8℃溫度下進(jìn)行培育，時(shí)間為1 h，再次進(jìn)行洗滌，共進(jìn)行4次。隨后，將顯色底物液加入到每個(gè)孔中，室溫條件下靜置，7 min后對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察，同時(shí)，利用計(jì)算機(jī)輔助成像分析系統(tǒng)，閱讀斑點(diǎn)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

T-SP0T-TB陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)滿足以下任一項(xiàng)：①空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)0～5個(gè)，同時(shí)，空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)與抗原A孔或B孔的斑點(diǎn)數(shù)差值大于6抗原 （包含6抗原）；②空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)6～10個(gè)，同時(shí)，空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)的2倍小于或等于抗原A孔或B孔的斑點(diǎn)數(shù)。

陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽(yáng)性對(duì)照孔具備良好的結(jié)果，但抗原A孔或B孔與陽(yáng)性標(biāo)本判定標(biāo)準(zhǔn)并不符合時(shí)，判定其為陰性。

抗原A孔和抗原B孔與空白對(duì)照孔之間的差值利用T-SPOT-TB的T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)計(jì)算，取最大值；抗原A孔T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)為抗原A孔斑點(diǎn)數(shù)減去空白對(duì)照孔的斑點(diǎn)數(shù)，抗原B孔T細(xì)胞斑點(diǎn)數(shù)計(jì)算方法與抗原A孔相同。

1.3C反應(yīng)蛋白測(cè)定

用免疫熒光法檢測(cè)，患者于入院第2～3日內(nèi)采集外周靜脈血1 mL，用EDTAK抗凝，用I-CHROMA儀器及配套試劑檢測(cè)C反應(yīng)蛋白。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

利用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入及分析，計(jì)量資料采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05時(shí)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1結(jié)核病組患者基本情況和結(jié)核病累及部位

47例結(jié)核病兒童，病原學(xué)確診21例，病理確診8例，臨床診斷病例18例。結(jié)核病累及部位：肺結(jié)核45例（原發(fā)型肺結(jié)核11例，血型播散型肺結(jié)核4例，繼發(fā)性肺結(jié)核30例），骨關(guān)節(jié)2例，支氣管結(jié)核11例，淋巴結(jié)結(jié)核2例，漿膜腔結(jié)核（結(jié)核性腦膜炎5例+胸膜炎19例+腹膜炎4例）28例，消化系統(tǒng)結(jié)核1例，喉結(jié)核1例，其中累及2個(gè)及以上部位患者36例。

2.2T-SPOT-TB檢測(cè)與其他結(jié)核診斷試驗(yàn)的比較

該研究90例患者均做T-SPOT-TB檢測(cè)、PPD試驗(yàn)、結(jié)核抗體檢查、抗酸桿菌涂片、結(jié)核菌培養(yǎng)，檢查陽(yáng)性率詳見表1、表2。其中T-SPOT-TB診斷結(jié)核病的敏感度為87.2%，特異度為97.7%；PPD試驗(yàn)的敏度性為48.9%，特異度為67.4%；結(jié)核抗體的敏感度為29.8%，特異度為97.7%；抗酸桿菌涂片敏感度為17.0%，結(jié)核菌培養(yǎng)的敏感度為44.7%。5種方法診斷結(jié)核病的敏感度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=53.29，P＜0.05），且T-SPOTTB檢測(cè)的敏感度均高于PPD試驗(yàn)、結(jié)核抗體、抗酸桿菌涂片及結(jié)核菌培養(yǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.15、25.03、31.03、16.41，P＜0.05），T-SPOT-TB檢測(cè)的特異度高于PPD試驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.07，P＜0.05）。TSPOT-TB檢測(cè)在敏感度、特異度上均優(yōu)于臨床常用的PPD。

表1　T-SPOT-TB與其他結(jié)核診斷試驗(yàn)的比較［n（%）］

表2　T-SPOT-TB與其他結(jié)核診斷試驗(yàn)敏感度的比較

2.3C反應(yīng)蛋白測(cè)定

A組47例CRP值為（33.09±19.96），高于B組43 例CRP值為（26.79±18.13），兩組統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3　結(jié)核病組與非結(jié)核病組CRP測(cè)定值比較［（±s），mg/L］

表3　結(jié)核病組與非結(jié)核病組CRP測(cè)定值比較［（±s），mg/L］

3　討論

兒童結(jié)核病的診斷，較成年人結(jié)核病的診斷更為困難。它包含有詳細(xì)詢問(wèn)的病史和進(jìn)行的體格檢查、PPD皮膚試驗(yàn)、胸部X線攝片和病原學(xué)檢查［6］。然而，由于兒童痰標(biāo)本難以取得，且痰涂片抗酸染色鏡檢分枝桿菌敏感度特異度均低，且不能將結(jié)核桿菌與其他分枝桿菌區(qū)分開來(lái)［7］。羅氏培養(yǎng)法一般要4～8周，快速培養(yǎng)也要至少2周，診斷時(shí)間比較長(zhǎng)，不利于患兒盡早的接受治療。由此，增加了兒童結(jié)核病的診斷難度。

目前針對(duì)結(jié)核感染的免疫學(xué)監(jiān)測(cè)方法主要是檢測(cè)結(jié)核細(xì)胞免疫功能的PPD試驗(yàn)和檢測(cè)體液免疫功能的結(jié)核抗體及PCR檢測(cè)、T-SPOT-TB試驗(yàn)等。PPD是皮膚試驗(yàn)，可作為兒童結(jié)核病篩查、入學(xué)體檢篩查和結(jié)核病臨床診斷的參考依據(jù)，但在純蛋白衍化物中，包含的抗原的種類比較多，屬于混合物，致病性分枝桿菌、環(huán)境分枝桿菌、卡介苗菌株共有其所包含的抗原，因此，非結(jié)核分枝桿菌感染鑒別診斷中，PPD試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)并不能很好的證明，因而實(shí)用價(jià)值受限。結(jié)核抗體檢測(cè)特異性較高，但缺乏敏感性。1989年，法國(guó)學(xué)者Brissonneol等診斷結(jié)核病時(shí)，首先使用了體外核酸擴(kuò)增技術(shù)即聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），但診斷結(jié)果中具備比較高的假陽(yáng)性率，降低了診斷的可靠性，限制PCR的臨床應(yīng)用。

T-SPOT-TB檢測(cè)以結(jié)核分枝桿菌特異性抗原早期分泌靶蛋白（EAST-6）和培養(yǎng)濾液蛋白（CFP-10），刺激活化T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ為原理建立。EAST-6與CFP-10的特異性非常高，在抗原方面，并不會(huì)與非結(jié)核分枝桿菌、卡介苗出現(xiàn)交叉，敏感性良好，美國(guó)、加拿大等相關(guān)機(jī)構(gòu)認(rèn)可其診斷結(jié)果，并在臨床中迅速的應(yīng)用。該院檢驗(yàn)科應(yīng)用T-SPOT-TB方法檢測(cè)外周血中結(jié)核感染特異的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞的頻率，同時(shí)將其檢測(cè)結(jié)果與實(shí)時(shí)定量PCR法等方法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示T-SPOT.TB敏感度和特異度均非常高，可用于結(jié)核病的快速診斷，尤其是對(duì)于結(jié)核病和非結(jié)核分枝桿菌病的早期鑒別［8］。近年，國(guó)內(nèi)報(bào)告表明T-SPOT.TB試驗(yàn)在骨關(guān)節(jié)結(jié)核輔助診斷、結(jié)核性胸膜炎、老年結(jié)核病以及其他肺外結(jié)核病的診斷均具有重要應(yīng)用價(jià)值［9-14］。

用于判斷結(jié)核感染的風(fēng)險(xiǎn)性高低并不是年齡和是否接種卡介苗，而是T-SPOT結(jié)果［15］。在既往的臨床試驗(yàn)里，PPD試驗(yàn)在診斷結(jié)核病以及判斷潛伏結(jié)核菌是否活動(dòng)具有很重要的意義，但是它的缺陷是假陰性率高［16］，尤其是肺外結(jié)核。韓國(guó)學(xué)者T.-M Lee等［17］納入首爾324例患者，最終PCR確診結(jié)核病128例，均同時(shí)行PPD試驗(yàn)和T-SPOT檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，T-SPOT的假陰性明顯低于PPD（17%22/128 vs.54%69/128，P＜0.001），T-SPOT在診斷肺外結(jié)核方面比PPD有更高的敏感性，尤其是對(duì)于粟粒性肺結(jié)核和免疫功能低下的患者。TSPOT與PPD比較擁有較高的特異性（76.37%vs51.15%：P＜0.001），并可以替代PPD，同時(shí)還可以用于評(píng)價(jià)結(jié)核病治療的效果［18］。

該研究中，結(jié)核病患兒及對(duì)照組同時(shí)接受了TSPOT-TB檢測(cè)及其他結(jié)核診斷試驗(yàn)，研究結(jié)果表明，與傳統(tǒng)結(jié)核診斷試驗(yàn)結(jié)果相比，T-SPOT-TB檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)更為明顯，在兒童結(jié)核病早期診斷中，應(yīng)用價(jià)值比較高。

臨床上，結(jié)核病缺乏特異性的癥狀表現(xiàn)，且大多數(shù)肺外結(jié)核患者缺乏典型的影像學(xué)改變，臨床表現(xiàn)復(fù)雜、隱匿，兒童結(jié)核往往先就診兒童醫(yī)院、婦幼保健院等，普通兒科醫(yī)生對(duì)結(jié)核病不常接觸，容易造成漏診、誤診，加之兒童患者痰液標(biāo)本不易獲取以及各項(xiàng)侵入性操作的限制性，兒童結(jié)核的診斷尤其困難。該研究中，傳統(tǒng)的結(jié)核診斷方法如PPD試驗(yàn)、結(jié)核抗體、抗酸桿菌涂片、結(jié)核菌培養(yǎng)等敏感性均不高，漏診、誤診的發(fā)生率比較高，不利于盡早治療，尤其是結(jié)核性腦膜炎患兒，最佳治療時(shí)機(jī)錯(cuò)過(guò)后，會(huì)嚴(yán)重影響患兒的預(yù)后。TSPOT-TB檢測(cè)方法中，敏感性及特異性都比較高，且為無(wú)創(chuàng)性檢查，患兒家屬依從性一般較好，獲取結(jié)果較快，同時(shí)，此種檢測(cè)方法能夠良好的檢測(cè)缺乏典型癥狀、病情危重的患者，早期診斷中，可采用T-SPOT-TB檢測(cè)，依據(jù)檢測(cè)結(jié)果，盡早的制定治療方案，提升治療效果。而且，T-SPOT同樣適用于體液標(biāo)本檢測(cè)，如腦脊液、支氣管肺泡灌洗液或胸腔積液等，這將對(duì)于肺外結(jié)核的診斷提供了一個(gè)新的檢測(cè)方法［19］。

C反應(yīng)蛋白（CRP）正常血清中，CRP的含量法非常少，但組織受到損傷或發(fā)生感染4～6 h后，會(huì)急劇升高CRP的含量，CRP檢測(cè)結(jié)果敏感性良好，具備客觀性，反應(yīng)速度非?？欤R床早期診斷疾病時(shí)，或者評(píng)估疾病活動(dòng)性時(shí)，常用的重要指標(biāo)中即包含CRP［20］。合成過(guò)程中，重要的調(diào)節(jié)因子為白細(xì)胞介素-1b、6和腫瘤壞死因子，其中，重要的刺激因子為白介素-6［21-22］。?？∶返龋?3］人通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，白介素-6在結(jié)核性腦膜炎患者中增高非常明顯，而在其他肺外結(jié)核患者中，白介素-6水平同樣會(huì)升高。該研究中，結(jié)核病組CRP檢測(cè)水平較非結(jié)核病組高，但兩組統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05），可能與患者感染結(jié)核桿菌后，T淋巴細(xì)胞被激活，增加各種淋巴因子的分泌與合成，提升肝細(xì)胞合成CRP相關(guān)。相關(guān)研究顯示［24］，肺結(jié)核患者中，組織損傷程度越嚴(yán)重時(shí)，血清CRP的濃度就越高，臨床治療活動(dòng)性肺結(jié)核患者時(shí)，CRP的價(jià)值非常高。

綜上所述，T-SPOT-TB檢測(cè)對(duì)兒童結(jié)核的診斷具有較高的敏感度和特異度，是診斷兒童結(jié)核的快速敏感方法。但是，單憑T-SPOT陽(yáng)性診斷結(jié)核病也會(huì)容易造成誤診，因?yàn)樗灿屑訇?yáng)性，部分肺炎患兒可能出現(xiàn)T-SPOT陽(yáng)性，而且T-SPOT陽(yáng)性是不穩(wěn)定的。Gyaviira Nkurunungi等［25］對(duì)烏干達(dá)907例兒童納入研究，其中56例有家庭結(jié)核病接觸史，在5歲時(shí)行T-SPOT試驗(yàn)，隨后3周復(fù)查 T-SPOT和 PPD試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，88 （9.7%）的兒童檢測(cè)T-SPOT陽(yáng)性，而3周后有一半以上轉(zhuǎn)為陰性，現(xiàn)有的用于診斷兒童結(jié)核感染的可靠試驗(yàn)還需要更進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)。臨床中，患兒被高度懷疑為結(jié)核病時(shí)，如果患兒PPD試驗(yàn)結(jié)果顯示陰性，以及臨床表現(xiàn)不典型、診斷不明確、病情危重的患兒可選擇該試驗(yàn)。結(jié)核病患者中CRP亦可升高，對(duì)于結(jié)核病及非結(jié)核性疾病單純依靠CRP測(cè)定來(lái)鑒別意義不大，應(yīng)結(jié)合其他多項(xiàng)檢查來(lái)鑒別。

該研究的不足之處和局限在：①因倫理原因，該研究未設(shè)健康兒童對(duì)照組；②因筆者所在醫(yī)院為呼吸?？漆t(yī)院，故對(duì)照組（非結(jié)核病組）均為肺炎患兒，由于未根據(jù)病原學(xué)將肺炎進(jìn)一步分類，進(jìn)而分析結(jié)核組與對(duì)照組CRP測(cè)定值的差異性，故研究結(jié)果顯示結(jié)核病組CRP值高于肺炎組。今后將繼續(xù)研究。

［1］WHO.Global tuberculosis control：WHO report 2015［R/ OL］.http：//www.who.int/tb/publications/global-report/en/.

［2］江載芳.加強(qiáng)和完善兒童肺結(jié)核的診治［J］.中華兒科雜志，2006，44（4）：241-242.

［3］余剛，張海鄰，林忠東，等.綜合性醫(yī)院兒童肺外結(jié)核298例臨床分析［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2011，34（5）：388-389.

［4］中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組，中華兒科雜志編輯部.兒童肺結(jié)核的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)和治療方案（試行）［J］.中華兒科雜志，2006，44（4）：249-251.

［5］江載芳，易著文.實(shí)用小兒結(jié)核病學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：75-79.

［6］成詩(shī)明.兒童結(jié)核病防治策略的發(fā)展與展望［J］.中國(guó)防癆雜志，2014，36（12）：1003-1007.

［7］張翊，盧建平，葉淼.四種結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)防癆雜志，2006，28（1）：14-17.

［8］鄒盛華，張麗水，黃明翔，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)臨床檢測(cè)研究［J］.中國(guó)防癆雜志，2009，31（9）：539-542.

［9］范俊，秦世炳，賈紅彥，等.結(jié)核感染T細(xì)胞酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)與結(jié)核抗體檢測(cè)在骨關(guān)節(jié)結(jié)核輔助診斷中的價(jià)值［J］.中國(guó)防癆雜志，2014，36（10）：885-887.

［10］陳希，李曉轅，李玲，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在結(jié)核性胸膜炎診斷中的價(jià)值［J］.中國(guó)防癆雜志，2015，37（1）：40-46.

［11］萬(wàn)榮，李明武，賴明紅，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在老年肺結(jié)核中的診斷價(jià)值 ［J］.中國(guó)防癆雜志，2015，37 （4）：348-352.

［12］張娟，孫嬌，李瑩，等.1873例結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性患者的臨床分析 ［J］.中國(guó)防癆雜志，2015，37 （7）：778-783.

［13］孫雯雯，肖和平，吳福蓉，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)在臨床診斷為肺外結(jié)核患者中的診斷價(jià)值［J］.中國(guó)防癆雜志，2015，37（7）：784-789.

［14］楊新婷，郭超，梁清濤，等.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測(cè)對(duì)老年活動(dòng)性肺結(jié)核的診斷價(jià)值 ［J］.中國(guó)防癆雜志，2015，37（7）：790-794.

［15］Cruz AT，Geltemeyer AM，Starke，JR，et al.Comparing the Tuberculin Skin Test and T-SPOT.TB Blood Test in Children.AMER ACAD PEDIATRICS，2011，127：E31-E38.

［16］Simsek H，Alpar SM，Aksu K，et al.The comprehensive evaluation of latent tuberculosis infection in health care workers and of patients with active tuberculosis using TST，ELISA，and ELISPOT methods［J］.Turkish Journal of Medical Sciences，2010，40：585-591.

［17］T.-M Lee，K.-H.Park，S.-M Kim，et al.Risk factors for falsenegative results of T-SPOT.TB and tuberculin skin test in extrapulmonary tuberculosis［J］.Clinical and Epidemiological Study.Infection，2013，41：1089-1095.

［18］Yan LP，Xiao HP，Han M，et al.Diagnostic value of T-SPOT. TB interferon-γ release assays for active tuberculosis［J］. Experimental and Therapeutic medicine，2015，10：345-351.

［19］Fevzi akmak Mahallesi，Mimar Sinan Caddesi，et al.TSPOT.TB assay usage in adults and children［J］.Expert Review of Molecular Diagnostics，2011，11：643-660.

［20］蘭信國(guó).C反應(yīng)蛋白的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)［J］.健康大視野：醫(yī)學(xué)分冊(cè)，2006，14（4）.

［21］陳世鳳.ADA、LDH和CRP在鑒別診斷惡性胸腔積液中的價(jià)值［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（25）：20-21.

［22］廖明鳳，張明霞，鄧群溢，等.結(jié)核病患者血漿和胸水中白介素6水平及其臨床意義［J］.臨床肺科雜志，2010，15（12）：1117-1118.

［23］?？∶?，張東杰．結(jié)核性腦膜炎腦脊液中白細(xì)胞介素-6水平及臨床意義［J］．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（16）：3329-3330.

［24］李欣，袁淑萍，呂翠環(huán)，等.C反應(yīng)蛋白測(cè)定在活動(dòng)性肺結(jié)核療效評(píng)估中的臨床意義［J］.河北醫(yī)藥，2008，30（10）：1567.

［25］Gyaviira Nkurunungi，Jimreeves E Lutangira，Swaib A.Lule，et al.Determining Mycobacterium tuberculosis Infection among BCG-immunised Uganda Children by T-SPOT［J］.TB and Tuberculin Skin Testing，PLOS ONE，2012，7：1-9.

The Clinical Significance of Spot test，PPD and CRP in the Diagnosis and Treatment of Tuberculosis Infection in Children with Tuberculosis T

RUAN Yan，YAN Hong-mei，LIN Wei，TANG Wei-wei，XIONG Li-Jun，LIN Jian-dong，CHEN Xiao-hong
Department of clinical teaching hospital of Fujian Medical University，F(xiàn)ujian Province，350008 China

R5

A

1674-0742（2016）07（b）－0001-05

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.20.001

結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)、結(jié)核抗體、CRP在兒童結(jié)核診治的臨床意義。

阮琰（1973.2-），女，福建福安人，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：呼吸內(nèi)科。

林劍東（1973.9-），男，福建仙游人，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：呼吸內(nèi)科，E-mail：jiandong0928@sina.com。

（2016-04-15）