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    2013—2015年貴州省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核結(jié)果分析

    2016-08-22 08:40:53景小金田海蓉曾秀玲李濤劉霞張霞王慧李照偉熊力
    貴州畜牧獸醫(yī) 2016年5期
    關鍵詞:亞型正確率貴州省

    景小金,田海蓉,曾秀玲,李濤,劉霞,張霞,王慧,李照偉,熊力

    (貴州省動物疫病預防控制中心,貴州 貴陽 550008)

    2013—2015年貴州省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核結(jié)果分析

    景小金,田海蓉*,曾秀玲,李濤,劉霞,張霞,王慧,李照偉,熊力

    (貴州省動物疫病預防控制中心,貴州 貴陽 550008)

    對2013—2015年由貴州省動物疫病預防控制中心組織實施市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作結(jié)果進行分析,參加比對考核的市級獸醫(yī)實驗室9個,占全省市級實驗室的100%(9/9),參加比對考核的縣級獸醫(yī)實驗室60個,占全省縣級獸醫(yī)實驗室的68.2%(60/88),全省比對考核的實驗室占市縣實驗室總數(shù)的71.1%(69/97)。比對考核實驗涉及ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、RT-PCR和H5亞型-HI 4個檢測項目,均是當前動物疫病診斷與監(jiān)測的重要檢測方法,3年中ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、RT-PCR、H5亞型-HI的正確率分別是92.8%、86.7%、84%、80.5%。表明本省市級實驗室基本掌握了血清學和病原學檢測,縣級實驗室也基本掌握了血清學檢測,但與全國省級實驗室檢測平均水平比較還有一定差距,需加強專項技能培訓與學習。

    貴州省;市、縣獸醫(yī)實驗室;檢測能力;比對考核

    獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室是指隸屬于各級獸醫(yī)主管部門,并承擔動物疫病診斷、監(jiān)測和檢測等任務的國家級區(qū)域獸醫(yī)實驗室、省級獸醫(yī)實驗室、地(市)級獸醫(yī)實驗室和縣(市)級獸醫(yī)實驗室。貴州省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室主要是指省、市、縣三級動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室。為了評估和提高各實驗室管理水平和檢測能力,2010年起至今,農(nóng)業(yè)部組織開展全國獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對考核工作,我省以實驗室檢測能力比對考核為契機,連年組織開展了市、縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核,了解和掌握全省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力和水平,深入分析查找不足,進一步完善實驗室質(zhì)量管理體系,完善實驗室能力建設長效機制,對于提高獸醫(yī)實驗室管理水平和檢測能力起到積極的推動作用,達到了預期效果。2013—2015年,全省組織開展獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對考核市級實驗室9個、縣級實驗室60個。檢測比對實驗主要是根據(jù)監(jiān)測任務需要的檢測方法為主,主要有CSF-ELISA、H5亞型-HI、PRV-gE-ELISA、FMDV-3ABC-ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、HP-RRSV RT-PCR、H5-AIV熒光RT-PCR 7項實驗。

    1 材料與方法

    1.1 比對試驗名稱、所用試劑廠家、檢測依據(jù)為了避免試劑盒的差異,制備盲樣所用試劑盒和考核下發(fā)的試劑盒的廠家、型號、批號均相同。見表1。

    1.2 比對樣品制備每年檢測4個項目,市、縣級獸醫(yī)實驗室各完成3個項目。每個比對項目設置5個檢測盲樣,其中3個陽性,2個陰性,每管的分裝量是單次試驗的4倍量。定性試驗處理到3個陽性狀態(tài):強陽、中陽、弱陽。盲樣均從試劑廠家直接購買標準陰性和陽性樣品,陽性樣品做適量梯度稀釋后分裝,陰性樣品直接分裝。各盲樣間數(shù)量與顏色眼觀無差異,統(tǒng)一編號,分包,制樣完畢。盲樣密閉低溫保存,及時分發(fā)到各靶實驗室。

    2 結(jié)果

    2.1 參加比對實驗室情況

    2.1.1 市級實驗室:3年中參加比對考核市級實驗室9個,實現(xiàn)全省市級實驗室全覆蓋。

    2.1.2 縣級實驗室:3年中參加比對考核縣級實驗室共有60個,占全省縣級實驗室的68%(60/88)。

    2.2 2013—2015年參加比對的市、縣實驗室正確率比較2013—2015年,參加比對的縣級實驗室正確率分別是76.2%、61.5%、75.6%;參加比對的市級實驗室正確率分別是67%、78%、78%,市級實驗室的正確率略高于縣級實驗室。見表2。

    表2 2013—2015年參加比對的市、縣實驗室正確率比較

    2.3 不 同類型實驗結(jié)果比較ELISA是目前血清學試驗最常用的檢測方法,也是市、縣兩級獸醫(yī)實驗室做得最多的實驗,故正確率最高,為92.80%;RTPCR、布病虎紅平板凝集試驗正確率均小于90%,有待提高檢測能力與水平;H5亞型-HI是定量試驗,影響結(jié)果因素較多,結(jié)果判定主觀性較強,實驗員較難掌握,正確率最小,僅為80.5%。見圖1。

    圖1 2013—2015年比對考核4種檢測項目正確率比較

    2.4 全省9個地區(qū)比對考核實驗室在ELISA、H5亞型-HI和RT-PCR 3個檢測項目上比較從ELISA來比較,黔南州、安順和銅仁的正確率為100%,正確率最低的是畢節(jié),僅有81%,其次是黔東南,正確率是89.3%。從H5亞型-HI比較,銅仁的正確率為100%,黔南州和安順正確率大于90%,畢節(jié)的正確率在83.3%,其它5個地區(qū)的正確率均低于80%。從RT-PCR比較,黔南、安順、畢節(jié)、貴陽、黔西南和六盤水的正確率均為100%,6個地級實驗室具備了RTPCR的檢測水平,完全有能力開展相關核酸檢測工作;黔東南的正確率為67%,銅仁的正確率為33%,3個比對考核失誤了2次;遵義3年比對考核,因儀器原因,只有2015年參加了RT-PCR,結(jié)果錯誤,因此正確率為0。從布病虎紅平板檢測比較,黔南、安順、貴陽、黔西南、六盤水和遵義地區(qū)的正確率均為100%,畢節(jié)和銅仁的正確率為66.7%,黔東南的正確率最低,只有50%。從4個檢測項目綜合成績來看,黔南和安順整體檢測水平較高。見表3。

    表3 2013—2015年貴州省9個地區(qū)實驗室4個檢測項目正確率比較%

    表12013 —2015年檢測項目、試劑生產(chǎn)廠家、檢測依據(jù)

    3 討論

    3.1 高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病均是國家重大動物疫病,也是國家實行強制動物免疫的病種。血清學檢驗是檢測動物免疫抗體水平、檢驗免疫效果和評價疫苗的有效方法,當前最常用的是ELISA、HI和平板凝集試驗。病原學檢測是診斷動物疫病,找出病原的重要手段,RT-PCR是國標規(guī)定的診斷方法,其敏感性和特異性高,用時少,是病原學檢測的首選。

    3.2 2013—2015年3年中共涉及ELISA、H5亞型-HI、RT-PCR、平板凝集4類實驗方法,與2013—2014年農(nóng)業(yè)部組織的全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果比較:本省地、縣實驗室ELISA、H5亞型-HI、RT-PCR實驗室正確率分別為92.8%、80.5%和84%,全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果中ELISA、H5亞型-HI、RT-PCR實驗室正確率分別為100%(32/32)、94%(30/32)和98%(123/126)[1,2],3項結(jié)果明顯高于貴州省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室正確率,說明貴州省市、縣實驗室的檢測水平還有待提高。

    3.3 2013—2015年3年中縣級實驗室比對結(jié)果比較:3個項目比對全部正確的市級實驗室百分率分別為67%、78%、78%,總體正確率略高于縣級實驗室,縣級實驗室正確率分別為76.2%、61.5%、75.6%。

    3.4 ELISA和H5亞型-HI是3年均考核的項目,ELISA檢測項目的正確率是92.8%,是檢測項目中正確率最高的;其次是布病虎紅平板凝集試驗正確率86.7%,RT-PCR正確率84%,H5亞型-HI正確率80.5%。從本組數(shù)據(jù)來看,市級實驗室的RT-PCR的檢測綜合水平不是很理想,需加強核酸檢測技術的培訓。H5亞型-HI是一個定量的試驗,主觀與客觀影響結(jié)果因素多,在全省范圍內(nèi)盡量統(tǒng)一實驗操作用品與實驗條件,有助于提高結(jié)果統(tǒng)一性。布病虎紅平板凝集試驗是2014年本省首次考核項目,正確率為86.7%,略低于2013年全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對中省級實驗室正確率87%[1]。隨著近年來布病疫情呈現(xiàn)上升趨勢,布病虎紅平板凝集試驗是目前檢測布病快速有效的方法,對于基層實驗室很適用,建議進一步加強推廣使用。

    3.5 從2013—2015年貴州省9個地區(qū)實驗室4個檢測項目正確率比較結(jié)果來看,畢節(jié)和黔東南地區(qū)實驗室要加強ELISA的檢測能力;貴陽、黔西南、六盤水、畢節(jié)、黔東南和遵義6個地區(qū)實驗室要加強H5亞型-HI的檢測能力;銅仁、黔東面和遵義地區(qū)實驗室要加強RT-PCR的檢測能力;畢節(jié)、銅仁和黔東南地區(qū)實驗室要加強布病虎紅平板試驗的檢測能力。

    3.6 通過以上對貴州省3年來獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作的綜合分析,獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作很有必要性,達到了預期目標,整體推動了全省獸醫(yī)實驗室檢測工作的開展和能力提高。各實驗室發(fā)現(xiàn)問題及時處理,有的放矢地完善實驗室管理,取長補短,不斷進步。特別是某些經(jīng)濟較落后、地理位置較偏遠的少部分縣級實驗室,從考核前不重視實驗室建設,沒有固定實驗人員狀況,通過考核,加強了獸醫(yī)實驗室的建設,并配備實驗室專業(yè)人員。同時,開展獸醫(yī)實驗室檢測能力比對,是評價獸醫(yī)實驗室檢測技術水平的重要手段,也是加強獸醫(yī)實驗室質(zhì)量控制的有效方法[3]。盡管當前貴州省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力與省級獸醫(yī)實驗室檢測水平還有一定差距,省動物疫病預防控制中心要多開展實驗室檢測專項技能培訓,繼續(xù)開展全省各級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作,使全省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室成為動物疫病預防控制工作戰(zhàn)線上過硬的檢測隊伍。

    [1]劉偉,張劭俁,董昕欣,等.2013年全國省級醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析[J].中國畜牧獸醫(yī),2013,49(10):91-94.

    [2]董昕欣,劉偉,邴國霞,等.2014年全國省級醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析[J].中國畜牧獸醫(yī),2014,50(10):101-103.

    [3]王文,張繼紅,蘭玲,等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對試驗的探討與建議[J].中國動物檢疫,2011,28(9):19-21.

    S851.34

    B

    1007-1474(2016)05-0030-03

    2016-07-12

    景小金(1981—),男,獸醫(yī)師,主要從事動物疫病防控工作。

    *通訊作者

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