槲寄生后處理對(duì)離體大鼠缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用

欒海蓉 李 麗 吳 紅（牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011）

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論 著

槲寄生后處理對(duì)離體大鼠缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用

欒海蓉 李 麗 吳 紅
（牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011）

目的 觀察槲寄生提取物（Viscum coloratum extract，VCE）后處理對(duì)離體大鼠心肌缺血/再灌注（ischemia reperfusion，I/R）損傷的保護(hù)作用。方法 建立離體大鼠心肌I/R損傷模型，觀察經(jīng)槲寄生后處理對(duì)I/R損傷大鼠心功能影響，測(cè)定心肌梗死面積。結(jié)果 與I/R組比較，槲寄生后處理組心功能各項(xiàng)指標(biāo)改善明顯（P＜0.01），心肌梗死面積明顯縮?。≒＜0.01）。結(jié)論 槲寄生后處理能減輕I/R大鼠心肌損傷，增強(qiáng)心功能，有明顯的保護(hù)作用。

槲寄生后處理；缺血再灌注損傷；保護(hù)

［Abstract］Objective To observe the Mistletoe post-processing to rats in vitro of myocardial ischemia/reperfusion （ischemia reperfusion, I/R） injury of protection. Method Myocardial I/R injury in rats in vitro model were established, and we observed the mistletoe post-processing effects on I/R injury in the rat cardiac function and measured myocardial infarction area. Result Compared with I/R group, the mistletoe post-processing each index set of cardiac function were improved significantly （P＜0.01）, and myocardial infarction area were significantly reduced （P＜0.01）. Conclusion Mistletoe post-processing can reduce rat myocardial I/R injury, enhance heart function, and has obvious protective effect.

［Key words］Mistletoe post-processing； Ischemia reperfusion injury； Protection

急性心肌梗死是心血管相關(guān)疾病中最為嚴(yán)重的病癥，如何保護(hù)缺血心肌免于再灌注損傷一直是目前的研究熱點(diǎn)［1］。藥物后處理，即在再灌注發(fā)生時(shí)或再灌注前不久及時(shí)用藥，是目前操作簡(jiǎn)單且更為安全的方法。槲寄生為桑寄生科槲寄生屬，其中多種活性產(chǎn)物對(duì)心血管疾病如心肌缺血、抗心律失常等具有顯著的藥理作用。本研究采用Langendroff離體心臟灌流系統(tǒng)建立心臟I/R損傷模型，探討槲寄生后處理對(duì)離體大鼠心肌I/R損傷的保護(hù)作用。

1　材料與方法

1.1材料：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組健康成年SD大鼠40只，體質(zhì)量250～300 g，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)數(shù)字表分為4組（n=10），即control組、I/R組、低濃度槲寄生后處理組（VCE-L）、高濃度槲寄生后處理組（VCE-H）。

1.2方法：①control組：K-H液持續(xù)灌流120 min；②I/R組：K-H液灌注30 min，停灌30 min，再灌注60 min；③低濃度槲寄生后處理組（VCE-L）：K-H液灌流30 min，停灌30 min，加入槲寄生（10 mg/kg）的K-H液再灌60 min；④高濃度槲寄生后處理組（VCE-H）：停灌后加入槲寄生（20 mg/kg）的K-H液再灌60 min。槲寄生中藥飲片，購自黑龍江省康達(dá)中藥飲片有限公司。2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC），sigma公司。M6240B生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，成都儀器廠。離體心臟缺血再灌注灌流模型建立按照文獻(xiàn)方法制備大鼠離體心臟［2］，大鼠麻醉后迅速開胸取出心臟，主動(dòng)脈插管懸掛于Langendorff 離體灌注裝置，Krebs-Hanselet（K-H）液恒壓灌注。

1.3觀察指標(biāo)：心功能指標(biāo)的測(cè)定：心臟穩(wěn)定搏動(dòng)10 min，剪開左心耳，在左心室內(nèi)置入帶水囊的導(dǎo)管，導(dǎo)管另一端與RM6240B生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)連接采集血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)。分別于缺血前、復(fù)灌60 min后，記錄左室舒張末壓（LVDEP）及左心室壓力變化率（±dp/dtmax）。

TTC法心梗面積測(cè)定［3］復(fù)灌末取下大鼠心臟置于-20 ℃冷凍15 min，將左側(cè)心臟橫切成2 mm的薄片，TTC染色后，可見梗死的灰白色心肌以及正常的深紅色心肌。計(jì)算心肌梗死面積百分比/% =左室心肌梗死面積/左室全面積×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：運(yùn)用SPSS 16.0進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01，差異更顯著。

2　結(jié) 果

2.1各組大鼠心功能比較：心功能指標(biāo)各組缺血前心功能指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），復(fù)灌后與I/R組比較，VCE-L組和VCE-H組的LVEDP均降低（P＜0.05），±dp/dtmax均明顯升高（P＜0.01），見表1。

2.2槲寄生后處理對(duì)I/R離體大鼠心肌梗死面積的影響：槲寄生后處理對(duì)I/R離體大鼠心肌梗死面積的影響復(fù)灌末I/R組的心肌梗死面積為（47.7±6.3）%，與control組梗死面積百分比（13.3±3.9）%相比明顯增加（P＜0.05）；與I/R組比較，VCE-L組梗死面積百分比減小，為（38.1±6.1）% （P＜0.05）；VCE-H組梗死面積為（27.5±5.7）%（P＜0.01），見圖1。

圖1　槲寄生后處理對(duì)I/R離體大鼠心肌梗死面積的影響（*為與control組P＜0.05，#為I/R組相比，P＜0.05；##為I/R組相比，P＜0.01）

3　討 論

Langendorff離體心臟灌流模型排除了神經(jīng)體液因素對(duì)心功能的影響，常用于研究外源性因素對(duì)心功能的直接影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與I/R組比較，槲寄生后處理組均使得大鼠左室LVEDP降低，±dp/dtmax增加，還能降低心肌梗死面積。

心肌I/R損傷在心血管疾病及手術(shù)中較為常見，如何減輕I/R損傷，改善再灌注后心肌功能至關(guān)重要。藥物后處理能在心肌缺血后、再灌注前施行，可操作性大，具有重要的實(shí)用價(jià)值。研究結(jié)果表明，槲寄生后處理能明顯改善心臟功能，減輕心肌損傷，發(fā)揮心肌保護(hù)作用。

表 1 各組大鼠心功能比較（n=10）

［1］ 徐盟.心肌缺血再灌注損傷的主要機(jī)制與相關(guān)藥物治療的研究進(jìn)展［J］.實(shí)用藥物與臨床,2014,17（8）：1052-1056.

［2］ 胡明珠,周波,盛瓊,等.PI3K/Akt /Sirt1信號(hào)通路介導(dǎo)硫化氫后處理對(duì)大鼠缺血心肌的保護(hù)作用［J］.中國藥理學(xué)通報(bào),2016,32（2）：268-273.

［3］ 吳娜,宋達(dá)琳,蔡尚郎.硝酸酯后處理對(duì)心臟缺血再灌注損傷心肌保護(hù)的研究［J］.心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜,2015,24（5）：540-543.

Mistletoe Post-processing on Ischemia Reperfusion Injury of Rats in Vitro Myocardial Protection

LUAN Hai-rong，LI li，WU Hong
（Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157011，China）

R-33；R544

B

1671-8194（2016）20-0001-02

牡丹江醫(yī)學(xué)院科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（基金號(hào)：ZS201321）