血小板假性減少的原因分析及處理

李文利,皮　蕾,張白杜,鮑麗娟

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心　510623)

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血小板假性減少的原因分析及處理

李文利,皮蕾,張白杜,鮑麗娟

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心510623)

目的探討血小板假性減少的原因及糾正措施。方法對(duì)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)的30例血小板假性減少標(biāo)本進(jìn)行血凃片復(fù)檢、手工計(jì)數(shù)血小板。結(jié)果12例EDTA依賴(lài)患者、8例存在大血小板的患者、10例采血不順患者儀器阻抗法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與手工計(jì)數(shù)血小板結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論EDTA依賴(lài)引起血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少，電阻抗法計(jì)數(shù)大血小板有一定的誤差也會(huì)導(dǎo)致血小板假性減少，采用手工計(jì)數(shù)血小板復(fù)檢假性血小板減少標(biāo)本可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

血小板減少；血球分析儀；影響因素

隨著全自動(dòng)血球分析儀的普及，提高了血細(xì)胞分析的速度，血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度也得到了提高。最為廣泛的抗凝劑是被國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)認(rèn)定的乙二胺四乙酸(EDTA)鹽。然而，由于血小板易聚集、黏附、破壞等特點(diǎn)及血球儀自身原理的限制，測(cè)定血小板常會(huì)出現(xiàn)假性減少現(xiàn)象，即EDTA依賴(lài)性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP),近幾年的報(bào)道也日趨增多[1-3]。血小板檢測(cè)是臨床最為常用的檢測(cè)項(xiàng)目之一，EDTA依賴(lài)引起的假性血小板減少若不及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正對(duì)醫(yī)生的診斷和患者治療都帶來(lái)重要影響?，F(xiàn)對(duì)30例血小板假性減少結(jié)果及影響因素報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇本院2014年10月至2015年10月發(fā)現(xiàn)的假性血小板減少患者30例。

1.2儀器與試劑日本Sysmex XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，Olympus顯微鏡。Sysmex XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀原裝配套試劑和質(zhì)控，草酸銨血小板稀釋液，配方參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第3版)》[4]，吉姆薩-瑞氏染液(Baso公司)，陽(yáng)普公司EDTA-K2真空采血管。

1.3方法對(duì)假性血小板減少患者采靜脈血標(biāo)本2 mL，用EDTA-K2真空抗凝管采集。上機(jī)前，首先觀察標(biāo)本性狀，檢查標(biāo)本有無(wú)凝固、抗凝劑比例是否合適，以排除不合格標(biāo)本造成的影響，然后上機(jī)檢測(cè)，對(duì)血小板低于100×109/L且直方圖異?；騼x器報(bào)警提示有血小板聚集的標(biāo)本，推片染色鏡檢，顯微鏡下觀察血小板分布情況、有無(wú)大量血小板聚集、有無(wú)大血小板等，并采患者末梢血進(jìn)行人工血小板計(jì)數(shù)，操作規(guī)程按草酸銨稀釋液法進(jìn)行。將儀器法和人工計(jì)數(shù)法兩種方法測(cè)定的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理。

2　結(jié)　果

儀器檢測(cè)結(jié)果、人工計(jì)數(shù)結(jié)果比較見(jiàn)表1 。從表1可以看出，儀器阻抗法假性血小板減少血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與人工計(jì)數(shù)血小板結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1　儀器法和人工法檢測(cè)結(jié)果比較

3　討　論

血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板減少大致分兩種情況：(1)是血小板真性減少，即患者由于自身疾病導(dǎo)致的血小板減少，如特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、白血病、肝腎疾病、藥物反應(yīng)等。(2)是患者血小板正常而結(jié)果顯示減少的假性減少，如血小板聚集(EDTA抗凝劑依賴(lài))、大血小板的存在、采血不順等，這種情況儀器會(huì)發(fā)出報(bào)警，如：血小板聚集，或直方圖、散點(diǎn)圖顯示異常，這時(shí)就需要人工辨別減少的真?zhèn)巍?/p>

3.1EDTA抗凝劑的影響早在1969年Gowland等首次報(bào)道了EDTA依賴(lài)性血小板減少癥(EDTA-PTCP)，引起了國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注，但造成血小板聚集的具體機(jī)制仍不是很清楚。目前一般認(rèn)為是血小板抗體與血小板表面抗原反應(yīng)所致[5-7]，可能是EDTA的存在修飾了血小板膜表面某種隱蔽的抗原結(jié)構(gòu)，與血漿中的自身抗體結(jié)構(gòu)結(jié)合，激活卵磷脂酶A、磷脂酶C等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)又能活化血小板纖維蛋白受體，促使血小板與纖維蛋白原聚集而出現(xiàn)凝聚。另外，EDTA能夠增加血小板表面電荷防止血小板凝聚，而血小板抗體可能減少了血小板表面電荷而削弱了EDTA的功效，血小板抗體是因何所致尚不清楚。EDTA依賴(lài)性血小板減少在患者和健康體檢者中都有發(fā)生，其中2例是一對(duì)母子，母親產(chǎn)檢期間發(fā)現(xiàn)是EDTA依賴(lài)性血小板減少，產(chǎn)后新生兒同樣是EDTA依賴(lài)性血小板減少，這與文獻(xiàn)報(bào)道的可能有遺傳性相符。

3.2大血小板的影響全血細(xì)胞分析儀電阻抗法計(jì)數(shù)血小板的閾值通常在2～24 fL，是根據(jù)顆粒體積大小通過(guò)檢測(cè)小孔產(chǎn)生的脈沖來(lái)區(qū)別和計(jì)數(shù)，通常血小板體積在2～20 fL，而許多病理情況下血小板的體積大小有很大差異，甚至達(dá)到30 fL以上，如腫瘤、急性心肌梗死、妊娠等大血小板會(huì)增多，儀器會(huì)錯(cuò)計(jì)為小紅細(xì)胞[5]而導(dǎo)致血小板假性減少。Sysmex XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用阻抗法測(cè)定血小板異常時(shí)，可轉(zhuǎn)至網(wǎng)織紅細(xì)胞/血細(xì)胞計(jì)數(shù)通道用核酸熒光染色法進(jìn)行測(cè)定[8]。由于血小板含有RNA，能被熒光染色，成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有RNA不被染色，因此，根據(jù)熒光強(qiáng)度可以把血小板和小紅細(xì)胞及其他雜質(zhì)分開(kāi)，這樣既可以消除小紅細(xì)胞及碎片的影響，又可以避免遺漏大血小板而造成的假性結(jié)果。但核酸熒光染色法目前還沒(méi)有完全普及，對(duì)于沒(méi)有核酸熒光染色法的儀器，簡(jiǎn)單的方法還是人工計(jì)數(shù)和推片鏡檢。

3.3其他影響靜脈穿刺不順或未及時(shí)混勻會(huì)使血液產(chǎn)生凝塊，若凝塊細(xì)小肉眼不易發(fā)現(xiàn)就會(huì)造成血小板假性減少[9]。常見(jiàn)于新生兒、兒童、肥胖者、長(zhǎng)期輸液的重癥患者等。對(duì)于此類(lèi)標(biāo)本，可與臨床溝通重新抽血或采末梢血均可。另外，標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、血小板冷凝集、低溫均可導(dǎo)致血小板假性減少[10]。

綜上所述，在日常工作中遇到血小板減少的標(biāo)本，一定要提高警惕，結(jié)合臨床診斷、標(biāo)本狀況、儀器警號(hào)提示等綜合分析。對(duì)于血小板假性減少的患者及時(shí)進(jìn)行人工復(fù)檢保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，以免誤診、誤治造成醫(yī)療糾紛甚至醫(yī)療事故的發(fā)生。

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2016-01-22修回日期：2016-05-18)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.062

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1673-4130(2016)15-2194-02