類風(fēng)濕因子對兩種梅毒檢測方法的影響

沙琨　齊瑩瑩

(鄭州人民醫(yī)院 檢驗科　河南 鄭州　450000)

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類風(fēng)濕因子對兩種梅毒檢測方法的影響

沙琨齊瑩瑩

(鄭州人民醫(yī)院 檢驗科河南 鄭州450000)

目的探討類風(fēng)濕因子(RF)對快速血漿反應(yīng)素試驗(RPR)和梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)診斷結(jié)果的影響。方法對1 890例梅毒螺旋體感染患者的血清標(biāo)本分別進行RPR、TPPA和RF檢測，比較RF對兩種方法診斷梅毒的影響。結(jié)果1 890例標(biāo)本中RPR陽性184例，TPPA陽性52例，RF陽性30例，RPR和RF同時陽性25例，TPPA和RF同時陽性2例。RF對RPR的影響明顯大于TPPA；RF濃度為8 IU/L時對RPR的影響最大，假陽性率為81.36%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；早期潛伏期梅毒、一期梅毒時期和臨床治愈期RPR和TPPA符合率較低；二期和三期梅毒RPR與TPPA檢測符合率較高，分別為96.77%和100%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論RF對RPR檢測的影響明顯高于對TPPA的影響，且其影響主要為低濃度的RF；在梅毒不同時期RPR和TPPA的檢出符合率有明顯不同。同時進行RPR和TPPA的檢測可以排除類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他自身免疫性疾病對梅毒檢測的影響，對梅毒診斷和分期有著重要的意義。

類風(fēng)濕因子；梅毒；快速血漿反應(yīng)素試驗；梅毒螺旋體顆粒凝集試驗

梅毒是由蒼白梅毒螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性的傳染性疾病。其病程長，病變可侵蝕皮膚黏膜及全身各組織器官，婦女感染后如不治療可垂直傳播給下一代[1]。梅毒血清學(xué)檢查的深入研究對梅毒的診斷與防治有著重要意義。到目前為止，梅毒螺旋體血清學(xué)檢測主要有快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)。TPPA和ELISA具有較好的特異性，常用來定性確診，但不能確定感染期和觀察療效[2]。目前RPR屬于非螺旋體梅毒血清學(xué)檢測，盡管有一定的假陽性率，但對臨床治療效果的觀察具有一定的參考價值。TPPA屬于螺旋體血清學(xué)實驗，類風(fēng)濕因子(RF)對兩種方法診斷梅毒有著明顯的差異。

1　資料與方法

1.1研究對象選取2013年8月至2014年8月在某醫(yī)院就診的1 890例梅毒螺旋體感染患者，分別抽取血清標(biāo)本3 ml，3 500 r/min離心10 min后提取血清，-20 ℃保存。批量對1 890例血清標(biāo)本進行RPR和TPPA檢測。

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器PHOMO安圖酶標(biāo)儀，PW-960全自動酶標(biāo)洗板機，NY/MMJ酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀。

1.2.2試劑RPR試劑由上海科華公司提供，TPPA由珠海麗珠試劑有限公司提供，RF試劑由西班牙SPINREACT公司提供。

1.3方法

1.3.1 RF檢測取血清標(biāo)本50 μl，加入乳膠試劑充分混勻后以100 r/min在反應(yīng)板上搖動2 min，同時用同樣的方法加陽性對照和陰性對照，待陽性對照出現(xiàn)凝集后判斷結(jié)果。RF≥8 IU/L時判斷為陽性。

1.3.2RPR檢測利用活性炭吸附抗原與被檢測血清發(fā)生凝集反應(yīng)后出現(xiàn)凝集物判斷結(jié)果為陽性。

1.3.3TPPA檢測梅毒螺旋體致敏抗原與梅毒螺旋體抗體發(fā)生凝集反應(yīng)的倍比稀釋倍數(shù)≥1∶80時為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理。定性資料組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1RF對RPR和TPPA的影響1 890例梅毒患者中，RPR檢測陽性184例，TPPA檢測陽性52例，PRP在梅毒診斷中假陽性率高于TPPA，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。RF檢測陽性30例，RPR和RF同時陽性25例，TPPA與RF同時陽性2例。RF對RPR的影響率大于TPPA，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　RPR、TPPA與RF檢測結(jié)果比較

2.2不同濃度RF對RPR的影響對30例RF陽性標(biāo)本進行倍比稀釋檢測，濃度為8 IU/L的RF中RPR假陽性率為81.36%，濃度為16 IU/L的RF中RPR假陽性率為13.25%，濃度為32 IU/L的RF中RPR假陽性率為5.37%，濃度>64 IU/L的RF中RPR假陽性率為0.02%。各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。RF在8 IU/L時對RPR的影響最明顯。

2.3梅毒不同感染時期RPR和TPPA符合率早期潛伏期和一期梅毒RPR與TPPA符合率分別為18.18%和14.28%；二期和三期梅毒RPR與TPPA符合率分別為96.77%和100.00%；臨床治愈期RPR與TPPA符合率僅11.54%。二期和三期梅毒RPR與TPPA符合率明顯高于其他各期，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2　梅毒不同時期RPR與TPPA符合率比較(n，%)

3　討論

梅毒是蒼白密螺旋體感染而引起的一種性病，可以通過血液、胎盤和性傳播。梅毒早期臨床癥狀不明顯，容易被忽視，而到了晚期人體各個組織和臟器則會受到嚴(yán)重的侵害。因此，實驗室選擇合適的梅毒檢測方法對梅毒的臨床診斷有著重要的意義。

梅毒檢測是臨床常用項目之一，在輸血、獻(xiàn)血、產(chǎn)前檢查和梅毒臨床診斷中有著重要的意義。根據(jù)梅毒螺旋體進入人體后產(chǎn)生的兩種抗體可將血清學(xué)試驗分為兩種，一種是直接針對梅毒螺旋體的特異性抗體，一種是針對類脂類的非特異性抗體。特異性抗體一般會長期存在，即使在經(jīng)過抗梅毒治療后，依然能在以后檢測出特異性抗體[3]。類脂類抗體對梅毒的檢測一般來說靈敏度高但特異性差，該抗體出現(xiàn)時間比特異性抗體要晚[4]。RPR是應(yīng)用VDRL抗原改良后的非特異性類脂類抗體進行檢測，其抗原是從牛心肌中提取的心磷脂、膽固醇和卵磷脂，是典型的非梅毒螺旋體檢測試驗。TPPA試驗是將梅毒的精致菌體成分包被在人工載體上，致敏顆粒與血漿或血清中的梅毒螺旋體抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，從而檢測出梅毒螺旋體抗體，同時可以進行抗體效價的測定。RPR檢測梅毒操作簡便，價格低廉，常用于大規(guī)模的篩查實驗，但是作為非特異性抗體檢測，人體其他疾病(如RF)可能會存在相應(yīng)反應(yīng)素，對RPR的檢測產(chǎn)生影響，出現(xiàn)RPR假陽性[5]。因此，單獨測定RPR不能作為梅毒的診斷依據(jù)。梅毒螺旋體血清學(xué)試驗靈敏度和特異性均比非梅毒螺旋體檢測高，梅毒特異性抗體出現(xiàn)早、消失晚，梅毒螺旋體抗體一旦出現(xiàn)很難消失，甚至終生存在[6]。TPPA作為梅毒特異性抗體檢測試驗，具有快速、敏感、特異性強的特點，被稱為梅毒的確診試驗。但是TPPA檢測梅毒的方法不能夠?qū)崿F(xiàn)自動化判讀結(jié)果，因此不適合大規(guī)模的篩查。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清中能夠?qū)е骂愔惪贵w的產(chǎn)生，是針對Ig GFc片段上抗原表位的一類自身抗體[7]。因此，RF在梅毒檢測中對RPR檢測的影響是十分明顯的，而對于TPPA檢測的RF的影響幾乎不存在。本實驗結(jié)果表明，RPR和RF同時陽性25例，TPPA與RF同時陽性2例，且低濃度的RF對RPR的檢測影響較為明顯，假陽性率達(dá)到81.36%。對于不同時期的梅毒來講，二期和三期梅毒時期RPR和TPPA檢測的符合率較高，與相關(guān)報道[8]符合。早期和一期梅毒(包括臨床治愈期)的符合率均較低。

綜上所述，作為梅毒血清學(xué)篩查和療效觀察試驗，RPR的測定應(yīng)該充分考慮到自身抗體對試驗結(jié)果的影響，特別要注意排除RF的干擾。實驗室應(yīng)該合理應(yīng)用不同的梅毒檢測方法來確診梅毒并進行梅毒分期，減少漏診、誤診，提高診斷率，為臨床提供全面準(zhǔn)確的參考依據(jù)。臨床醫(yī)師除考慮檢測結(jié)果外，還應(yīng)通過病史、臨床癥狀和體征綜合分析，進而確定診斷和治療效果。從而對梅毒的發(fā)展、治愈、藥物療效的監(jiān)測和防治疾病的傳播起到積極的作用。

[1]胡亮,陳藝,陳長強,等.乳膠顆粒凝集法檢測梅毒特異性抗體的性能評估[J].檢驗醫(yī)學(xué),2015,30(3):250-253.

[2]宋志軍.類風(fēng)濕因子對梅毒抗體檢測的影響分析[J].健康必讀,2013,12(8):160.

[3]吳勁松.RPR與TPPA檢測對梅毒診斷及療效的價值分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(2):416-417.

[4]叢憲玲,姜日花,朱明姬,等.580例梅毒患者實驗室檢測結(jié)果分析[J].中國實驗診斷學(xué),2010,7(3):264-265.

[5]趙有翼.類風(fēng)濕因子與快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗假陽性的關(guān)系[J].北京醫(yī)學(xué),2011,33(3):202,206.

[6]馬連學(xué),李艷菊.梅毒螺旋體抗體三種血清學(xué)方法應(yīng)用評價[J].中國實驗診斷學(xué),2010,14(1):116-117.

[7]譚立明.ELISA法檢測的影響因素及其對策[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(4):300-305.

[8]張艷霞.類風(fēng)濕因子與快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗假陽性的關(guān)系[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2010,16(32):29-30.

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10.3969/j.issn.1004-437X.2016.07.014

2015-12-08)