普侖司特對鏈佐星誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠記憶損害和神經(jīng)損傷的影響

談永進，董榮榮，洪 浩（.安慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，安徽 安慶 4605；.中國藥科大學(xué)藥理學(xué)教研室，江蘇 南京 0009）

普侖司特對鏈佐星誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠記憶損害和神經(jīng)損傷的影響

談永進1，董榮榮2，洪 浩2
（1.安慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，安徽 安慶 246052；2.中國藥科大學(xué)藥理學(xué)教研室，江蘇 南京 210009）

目的 研究半胱氨酰白三烯受體1（CysLT1R）拮抗劑普侖司特對鏈佐星（STZ）誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠記憶損害及神經(jīng)炎癥和凋亡的影響。方法 選用雄性ICR小鼠，尾靜脈注射STZ 150 mg·kg-1制備1型糖尿病小鼠模型。糖尿病小鼠每天ig給予普侖司特，連續(xù)給藥4周。Morris水迷宮檢測小鼠隱藏平臺潛伏期、穿臺次數(shù)及目標(biāo)象限停留時間；Western蛋白印跡法檢測小鼠腦海馬和前額葉皮質(zhì)CysLT1R，NF-κB p65，白細(xì)胞介素1β（IL-1β），腫瘤壞死因子α（TNF-α），剪切胱天蛋白酶3，Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)水平；測定小鼠的空腹血糖、血清胰島素含量以及甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平。結(jié)果 Morris水迷宮結(jié)果顯示，與正常對照組比，模型組小鼠逃避潛伏期顯著延長，穿臺次數(shù)和目標(biāo)象限探索時間均顯著降低（P＜0.05）；給予普侖司特0.6和1.2 mg·kg-1組小鼠逃避潛伏期均顯著縮短（P＜0.05），穿臺次數(shù)和目標(biāo)象限探索時間均顯著增加（P＜0.05）。Western蛋白印跡結(jié)果顯示，模型組小鼠海馬和前額葉皮質(zhì)CysLT1R，NF-κB p65，IL-1β，TNF-α和剪切胱天蛋白酶3蛋白表達(dá)以及Bax/Bcl-2比值顯著升高（P＜0.05）；給予普侖司特0.6和1.2 mg·kg-1能顯著抑制糖尿病小鼠腦內(nèi)上述蛋白表達(dá)的變化（P＜0.05）。但普侖司特對糖尿病小鼠高血糖、低血清胰島素和脂質(zhì)代謝紊亂無明顯影響。結(jié)論 普侖司特能夠改善STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶損害和神經(jīng)損傷。

普侖司特；1型糖尿病；學(xué)習(xí)記憶；半胱氨酰白三烯受體1；神經(jīng)炎癥；細(xì)胞凋亡

DOl：10.3867/j.issn.1000-3002.2016.04.004

糖尿病患者認(rèn)知障礙十分常見。臨床研究顯示，1型和2型糖尿病患者均伴隨不同程度學(xué)習(xí)記憶損害［1］，其發(fā)生率與病程長短、降血糖藥的選用等因素有關(guān)。輕者表現(xiàn)為輕度認(rèn)知損害，重者發(fā)展為癡呆。因此，尋找有效的防治糖尿病學(xué)習(xí)記憶損害藥物是當(dāng)前該領(lǐng)域研究的熱點。普侖司特（pranlu?kast，Pran）為選擇性半胱氨酰白三烯受體1（cyste?inyl-leukotrienes receptor 1，CysLT1R）的拮抗劑，可抑制免疫和炎癥反應(yīng)，改善肺功能及纖維化，抑制氣管高反應(yīng)性及重塑［2］。臨床上主要用于治療哮喘和過敏性鼻炎。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，Pran對東莨菪堿和β淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的小鼠記憶損害有顯著改善作用［3-4］。本研究觀察Pran對鏈佐星（streptozocin，STZ）誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶損害及神經(jīng)損傷的影響，以進一步揭示糖尿病記憶損害的病理生理機制，發(fā)掘更有效的防治藥物。

1　材料與方法

1.1藥品和試劑

Pran，純度＞98%，購于江蘇恒瑞醫(yī)藥；STZ購于美國Sigma Aldrich公司；CysLT1R抗體、白細(xì)胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）抗體和腫瘤壞死因子α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）抗體購于德國Santa Cruz Biotechnology公司；Cleaved胱天蛋白酶3，Bax和Bcl-2和NF-κB p65抗體購于美國Cell Signaling Technology公司；β肌動蛋白抗體、組蛋白H3（histone H3）抗體、山羊抗兔IgG、兔抗山羊IgG抗體均購于美國Bioward Technology公司；葡萄糖試劑盒（葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法）購于上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；胰島素檢測試劑盒購于武漢華美生物工程有限公司；甘油三脂（triglyc?erides，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（high density lipo?protein cholesterol，HDL-C）測試盒均購自南京建成生物工程研究所；其他在實驗中用到的試劑為分析純。Morris水迷宮（上海吉量軟件科技有限公司）；UV/V-16/18型紫外/可見分光光度計（上海美譜達(dá)儀器有限公司）；RT-6000型酶標(biāo)分析儀，深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）；TGL-16型臺式高速冷凍離心機（湖南湘儀實驗室開發(fā)有限公司）；TP-114型Sartorius分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）；Tanon-4200凝膠成像系統(tǒng)（上海天能科技有限公司）。

1.2動物和1型糖尿病小鼠模型的制備

100只體質(zhì)量24～26 g的雄性清潔級ICR小鼠，由揚州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，小鼠許可證號：SCXK（蘇）2012-0004，合格證編號：No.201508363。將小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，禁食12 h后按體質(zhì)量（22～25 g）隨機挑出10只作為正常對照，其余的90只小鼠通過單次尾靜脈注射STZ 150 mg·kg-1，制備1型糖尿病小鼠模型。正常對照組尾靜脈注射等體積枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液。3 d后從眼眶后靜脈叢采血，測定空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG），挑選FBG≥11.1 mmol·L-1小鼠為糖尿病模型小鼠。

1.3動物分組和給藥

糖尿病小鼠根據(jù)所測的FBG值隨機分為正常對照組、模型組及Pran 0.3，0.6和1.2 mg·kg-1組。Pran 用0.5%羧甲纖維素鈉（CMC-Na）制備成混懸液，給藥體積為20 mL·kg-1，正常對照組和模型組均ig給予等體積0.5%CMC-Na。給藥時間為4周。

1.4Morris水迷宮實驗測定小鼠穿越原平臺區(qū)次數(shù)及在目標(biāo)象限探索時間

第4周給藥結(jié)束后，對各組小鼠進行持續(xù)6 d的Morris水迷宮實驗。第1～2天進行可見平臺訓(xùn)練，在水迷宮第Ⅳ象限（目標(biāo)象限）放置帶有旗子的平臺（低于水面5 mm），旗子和平臺高度差為5 cm，水溫控制為（23～27）℃。每天將動物分別從第Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ象限相應(yīng)的標(biāo)記位置背向水池輕輕放入水中，使其在迷宮中自由游動。如果小鼠90 s內(nèi)爬上并停在平臺10 s，結(jié)束該次測試并記下逃避潛伏期。如果小鼠90 s內(nèi)未找到平臺，逃避潛伏期記為90 s，并用手將動物置于平臺上，放置30 s。第3～5天進行隱藏平臺訓(xùn)練，將平臺上的旗子取出，其他實驗條件及方法均同可見平臺訓(xùn)練。最后1天進行無平臺空間探索實驗。各組小鼠均只從第Ⅰ象限背向迷宮放入，使其自由游動90 s，Viewer 2 Tracking Software系統(tǒng)記錄動物穿越原平臺區(qū)次數(shù)及在目標(biāo)象限探索時間。測試期間仍繼續(xù)給藥，且行為學(xué)測試于給藥30 min后進行。在整個行為學(xué)實驗過程中，實驗環(huán)境和參照物位置等保持不變。

1.5血糖、血清胰島素和血脂的測定

Morris水迷宮實驗結(jié)束后，全部小鼠禁食12 h，按壓頭頸部進行眼眶取血，所得血樣靜置10 min后，4℃3000×g離心15 min，即可得所需血清。FBG通過葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定，即10 μL血清樣本與1 mL工作液37℃孵育10 min，酶標(biāo)儀測定吸光度值（λmax=505 nm）并計算濃度。血樣本稀釋200倍后采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清胰島素。血清TG和TC通過甘油磷酸氧化酶/膽固醇氧化酶-過氧化物氧化酶法測定，即96孔板每孔加入2.5 μL樣本與250 μL工作液37℃孵育10 min，用酶標(biāo)儀測定吸光度值（λmax=510 nm），并據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值計算TG和TC含量。LDL-C和HDL-C通過直接法測定，即96孔板每孔加入2.5 μL樣本與相應(yīng)測定試劑盒中R1工作液180 μL，37℃孵育5 min，用酶標(biāo)儀測定吸光度值（λmax=546 nm）；再加入60 μL R2工作液后，相同條件下孵育并測定吸光度值；并據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值計算LDL-C 和HDL-C含量。

1.6Western蛋白印跡法檢測海馬和前額葉皮質(zhì)CysLT1R，NF-κ B p65，TNF-α ，lL-1β ，剪切胱天蛋白酶3，Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)水平

①總蛋白提取：處死小鼠取腦，分離腦海馬和前額葉皮質(zhì)，稱重。按質(zhì)量（g）：體積（mL）為1∶9的比例加入RIPA緩沖液（單去污裂解液：PMSF= 9∶1），制備組織勻漿，低溫離心（4℃，12 000×g，5 min），收集蛋白樣液，并運用BCA法測定蛋白濃度。②核蛋白提?。簩⒑ｑR和前額葉皮質(zhì)分別用低滲裂解液進行勻漿裂解（1 mL低滲裂解液中含有5 μL磷酸酶抑制劑、10 μL PMSF和1 μL DL-二硫蘇糖醇），3000×g離心5 min。沉淀再用低滲裂解液進行溶解，5000×g離心5 min獲得沉降物溶于200 μL裂解液，低溫處置20 min后，4℃15 000×g離心10 min吸取上清蛋白樣液，行BCA法定量。配制上樣液（1μL溶液含4 μg蛋白），100℃加熱10 min變性后，-80℃保存?zhèn)溆?。制備分離的電泳凝膠，每孔分別加入10 μL的蛋白樣液；按電壓強度為80 V進行濃縮，120 V進行分離。將所需的目的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，并用脫脂奶粉（TBST溶解）封閉膜上未吸附蛋白區(qū)來減少非特異性結(jié)合的影響；而后用脫脂奶粉稀釋的抗體孵育，即用CysLT1R抗體、TNF-α抗體、IL-1β抗體（1∶200稀釋）、NF-κB p65抗體（1∶1000稀釋）、剪切胱天蛋白酶3（1∶500稀釋）、Bax（1∶1000稀釋）、Bcl-2（1∶1000稀釋）、β肌動蛋白抗體（1∶5000稀釋）和組蛋白H3抗體（1∶500稀釋）4℃孵育過夜，然后用TBST洗凈，PDVF膜用山羊抗兔IgG或兔抗羊IgG二抗（1∶5000稀釋）室溫下孵育2 h后洗凈，Tanon-4200凝膠成像系統(tǒng)顯色成像。采用Gel-Pro Analyzer 4軟件進行分析處理，目標(biāo)蛋白與內(nèi)標(biāo)β肌動蛋白或組蛋白H3積分吸光度值比值表示蛋白相對表達(dá)水平。

1.7統(tǒng)計學(xué)分析

Fig.1 Effect of pranlukast（Pran）on number of platform crossings and percentage of time spent in target quad?rant in streptozocin（STZ）-induced type1 diabetic mice in Morris water maze（MWM）test.Type 1 diabetes mouse model was induced by injection through the tail vein with STZ 150 mg·kg-1.Diabetic mice were administered orally with Pran for 4 consecutive weeks.Day 0 represented performance on the first trial，and subsequent points represented average of all daily trials.The escape latency of mice in the 2-d visible plat?form（A）and 3-d hidden platform trials（B），the percentage of time spent in the target quadrant（C），the average number of times of crossing the platform（D）during the spatial probe test were recorded.x±s，n=10.*P＜0.05，**P＜0.01，compared with normal control group；#P＜0.05，compared with STZ model group.

2　結(jié)果

2.1普侖司特改善糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶能力

在水迷宮實驗第1～2天的可見平臺訓(xùn)練期間，正常組小鼠和糖尿病小鼠的上臺潛伏期無顯著差異，說明各組小鼠的基礎(chǔ)活動以及對目標(biāo)的識別能力均無差異（圖1A）。在第3～5天隱藏平臺訓(xùn)練中，模型組小鼠顯示出更長的逃避潛伏期（P＜0.05）；Pran 0.6和1.2 mg·kg-1組動物逃避潛伏期均顯著縮短（P＜0.05），0.3 mg·kg-1組小鼠逃避潛伏期無顯著差異（圖1B）?？臻g探索實驗結(jié)果顯示，模型組小鼠在目標(biāo)象限游動時間和穿過平臺所在區(qū)域次數(shù)均較正常小鼠顯著減少（P＜0.05）；給予Pran 0.6和1.2 mg·kg-1能顯著增加糖尿病小鼠在目標(biāo)象限游動時間及穿過平臺所在區(qū)域次數(shù)（P＜0.05）（圖1C 和D）。以上結(jié)果表明，Pran 0.6和1.2 mg·kg-1能改善糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

2.2普侖司特對糖尿病小鼠腦內(nèi)CysLT1R表達(dá)的影響

Western蛋白印跡檢測結(jié)果表明（圖2），STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠海馬和前額葉皮質(zhì)CysLT1R表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.01），給予Pran 0.6和1.2 mg·kg-1CysLT1R表達(dá)均顯著下降（P＜0.05）。上述結(jié)果提示，Pran可能通過降低糖尿病小鼠腦內(nèi)CysLT1R表達(dá)而改善學(xué)習(xí)記憶損害。

2.3普侖司特對糖尿病小鼠腦內(nèi)NF-κ B p65，lL-1β 和TNF-α 表達(dá)的影響

Western蛋白印跡結(jié)果（圖3）顯示，糖尿病小鼠神經(jīng)細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.01），給予普侖司特 0.6和1.2 mg·kg-1NF-κB p65表達(dá)水平顯著下降（P＜0.05）。Pran 0.6和1.2 mg·kg-1還能顯著抑制腦內(nèi)炎癥因子IL-1β和TNF-α生成（P＜0.05）。說明Pran可抑制糖尿病小鼠腦內(nèi)NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及神經(jīng)炎癥反應(yīng)。

2.4普侖司特對糖尿病小鼠腦內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白剪切胱天蛋白酶3，Bax和Bcl-2表達(dá)的影響

Western蛋白印跡結(jié)果（圖4）顯示，糖尿病小鼠腦內(nèi)剪切胱天蛋白酶3水平顯著上調(diào)，Bax/Bcl-2比值顯著升高（P＜0.01）；給予Pran 0.6和1.2 mg·kg-1剪切胱天蛋白酶3和Bax/Bcl-2比值均顯著下降（P＜0.05）。說明Pran可減輕糖尿病小鼠腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。

2.5普侖司特對糖尿病小鼠體質(zhì)量、血糖、血清胰島素和血脂的影響

由表1可見，糖尿病小鼠體質(zhì)量明顯減輕，血糖升高，血清胰島素水平降低，血脂代謝紊亂（TG，TC 和LDL-C升高，HDL-C降低）（P＜0.01）；Pran對糖尿病小鼠上述典型的代謝紊亂均無顯著的改善作用。

Fig.2 Effect of pranlukast on cysteinyl-leuykotrienes receptor 1（CysLT1R）expression in hippocampus（A）and prefrontal cortex（B）of diabetic mice by Western blotting.See Fig.1 for the treatment.C was the semiquantitative result of A and B.±s，n=4.**P＜0.01，compared with corre?sponding normal control group；#P＜0.05，compared with corre?sponding STZ model group.

Fig.3 Effect of pranlukast on NF-κ B p65（A），interleukin-1β （lL-1β ）（B）and tumor necrosis factor-α （TNF-α ）（B）in hippocampus（A1，B1）and prefrontal cortex（A2，B2）of STZ-induced diabetic mice by Western blotting. See Fig.1 for the treatment.A3 was the semiquantitative result of A1 and A2；B3 and B4 were the semiquantitative results of B1 and B2.±s，n=4.**P＜0.01，compared with corresponding normal control group；#P＜0.05，compared with corresponding STZ model group.

Fig.4 Effect of pranlukast on cleaved caspase 3，Bax and Bcl-2 in hippocampus（A）and prefrontal cortex（B）of STZ-induced diabetic mice by Western blotting.See Fig.1 for the treatment.C and D were the semiquantitative results of A and B.±s，n=4.**P＜0.01，compared with corresponding normal control group；#P＜0.05，##P＜0.01，compared with corresponding STZ model group.

Tab.1 Effect of pranlukast on body mass，fasting blood glucose（FBG），serum insulin，triglycerides（TG），total cholesterol（TC），low density lipoprotein cholesterol（LDL-C）and high density lipoprotein cholesterol（HDL-C）in STZ-induced diabetic mice

3　討論

本研究結(jié)果顯示，學(xué)習(xí)記憶損害的糖尿病小鼠一方面外周出現(xiàn)糖脂代謝紊亂，另一方面腦內(nèi)出現(xiàn)神經(jīng)炎癥和凋亡反應(yīng)，這些變化與文獻(xiàn)報道一致［5-6］。本研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病小鼠腦內(nèi)CysLT1R異常升高，給予Pran既能抑制腦內(nèi)CysLT1R異常升高又能抑制神經(jīng)炎癥和凋亡反應(yīng)，并顯著改善糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶損害，但對外周糖脂代謝紊亂無明顯影響。據(jù)此推測，腦內(nèi)CysLT1R參與糖尿病記憶損害的病理過程，Pran對糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用與其阻止腦內(nèi)CysLT1R上調(diào)有關(guān)；改善糖代謝紊亂并非是干預(yù)糖尿病學(xué)習(xí)記憶損害的唯一手段，采用多環(huán)節(jié)干預(yù)可能更為有效。

關(guān)于糖尿病認(rèn)知障礙發(fā)生機制有諸多學(xué)說，如神經(jīng)遞質(zhì)與營養(yǎng)因子缺失、胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙和氧化應(yīng)激等，而針對這些學(xué)說的藥物研究未獲得實質(zhì)性進展，更無確立防治糖尿病認(rèn)知障礙的分子靶標(biāo)［1，7］。CysLT1R是由3個膜內(nèi)和3個膜外親水環(huán)連接著7個跨膜疏水區(qū)組成的G蛋白偶聯(lián)受體。CysLT1R內(nèi)源性配體主要有半胱氨酰白三烯C4、半胱氨酰白三烯D4和半胱氨酰白三烯E4，它們是由5-脂氧酶催化花生四烯酸裂解產(chǎn)生的。過去認(rèn)為，CysLT1R主要存在于外周氣道平滑肌細(xì)胞和上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及嗜酸性粒細(xì)胞。近年發(fā)現(xiàn)，中樞的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞也能檢測到其表達(dá)［2］。外周呼吸系統(tǒng)CysLT1R介導(dǎo)哮喘和過敏性鼻炎的病理反應(yīng)，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)CysLT1R誘導(dǎo)NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)參與神經(jīng)炎癥和神經(jīng)凋亡反應(yīng)［8-9］。糖尿病小鼠腦內(nèi)CysLT1R表達(dá)增加可能與腦內(nèi)炎癥介質(zhì)如白三烯類物質(zhì)生成增多有關(guān)，因為作為其配體可誘導(dǎo)激活CysLT1R表達(dá)、活化。CysLT1R活化后啟動NF-κB信號通路，NF-κB p65轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核，一方面促進炎癥因子IL-1β和TNF-α表達(dá)，另一方面促進凋亡相關(guān)蛋白剪切胱天蛋白酶3和Bax生成、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2生成。本研究選用可跨越血腦屏障的CysLT1R拮抗劑Pran，可有效地阻斷腦內(nèi)CysLT1R，產(chǎn)生抗神經(jīng)炎癥和抗神經(jīng)凋亡作用，繼而改善糖尿病小鼠學(xué)習(xí)記憶損害。Pran所用劑量僅為抗哮喘病劑量的0.52%～1%，且在中樞系統(tǒng)中分布濃度較高［4］。

綜上所述，Pran除對哮喘和過敏性鼻炎有效外，小劑量還能分布至中樞，對糖尿病性腦病產(chǎn)生保護作用，有望被二次開發(fā)為防治糖尿病記憶損害的藥物，進而為多環(huán)節(jié)干預(yù)糖尿病記憶障礙提供新思路。

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（本文編輯：喬 虹）

Effect of pranlukast on memory impairment and nerve injury in streptozocin-induced type 1 diabetic mice

TAN Yong-jin1，DONG Rong-rong2，HONG Hao2
（1.Anqing Medical and Pharmaceutical College，Anqing 246052，China；2.Department of Pharmacology，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China）

OBJECTlVE To investigate the effect of pranlukast（Pran）on learning and memory impairment and neuroinflammatory and apoptotic response in streptozocin（STZ）-induced type 1 diabetic mice.METHODS Male ICR mice were injected through the tail vein with STZ（150 mg·kg-1）to inducethe type 1 diabetes model.Diabetic mice were administered orally with Pran.After 4 consecutive weeks of administration，the escape latency in hidden platform trials，number of platform crossings and time spent in the target quadrant of mice were assessed by the Morris water maze（MWM）test.Western blot was used to detect the proteins of cysteinyl-leukotrienes receptor-1（CysLT1R）and pro-inflammatory factors，nuclear factor-κB p65 subunit（NF-κB p65），interleukin-1β（IL-1β），tumor necrosis factor-α （TNF-α），and cleaved caspase 3，Bax and Bcl-2 in the hippocampus and prefrontal cortex of diabetic mice.We also determined fasting blood glucose，serum insulin and lipids such as triglyceride，total cholesterol，high density lipoprotein cholesterol，and low density lipoprotein cholesterol.RESULTS The data of the MWM test showed that untreated diabetic mice displayed a higher escape latency in hidden platform trials（P＜0.05），and a smaller number of platform crossings（P＜0.05）as well as shorter per?centage of time spent in the target quadrant（P＜0.05）.The data of Western blotting showed that treat?ment with Pran 0.6 and 1.2 mg·kg-1significantly reduced the levels of CysLT1R，nuclear NF-κB p65，IL-1β and TNF-α，cleaved caspase 3，and the ratio of Bax and Bcl-2 in the hippocampus and prefrontal cortex of diabetic mice（P＜0.05）.However，Pran did not improve the fasting blood glucose，serum insulin or lipid metabolism disorder in diabetic mice.CONCLUSlON Pran improves memory impairment and nerve injury in STZ-induced type 1 diabetic mice.

pranlukast；type 1 diabetes；learning and memory；cysteinyl-leukotrienes receptor 1；neuroinflammation；apoptosis

The project supported by National Natural Science Foundaiton of China（81273497）

HONG Hao，E-mail：honghao@cpu.edu.cn，Tel：（025）86185227

R971

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1000-3002-（2016）04-0323-07

國家自然科學(xué)基金面上項目（81273497）

談永進，男，碩士，副教授，主要從事神經(jīng)藥理學(xué)研究，Tel：15305563002，E-mail：tyj939@163.com

洪 浩，E-mail：honghao@cpu.edu.cn，Tel：（025）86185227

2015-12-08接受日期：2016-04-16）