側(cè)柏葉中揮發(fā)性成分研究

周靜宜+史夢(mèng)珺+王金梅

摘 要：目的：分析側(cè)柏葉中揮發(fā)性成分。方法：（HS-SPME-GC/MS），結(jié)合保留指數(shù)法并用峰面積歸一化法測(cè)定相對(duì)百分含量。結(jié)果：側(cè)柏葉中鑒定出11個(gè)揮發(fā)性成分，占總峰面積的77.23%。結(jié)論：葉中主要成分為3-蒈烯（23.97%）、石竹烯 （11.06%）、α-蒎烯（9.12%）及α-石竹烯（8.26%）等。

關(guān)鍵詞：側(cè)柏；揮發(fā)性成分；固相微萃?。粴赓|(zhì)聯(lián)用

中圖分類號(hào)：O657 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-2064（2018）01-0183-02

側(cè)柏（PlatycladusorientalisLinn.），為柏科側(cè)柏屬植物，產(chǎn)于遼寧、吉林、河南、湖北等地，常栽培用做庭院觀賞樹(shù)[1-2]。其種仁及葉均可入藥，種仁具有養(yǎng)心安神、止汗、潤(rùn)腸功效；葉具有涼血止血、生發(fā)烏發(fā)等功效[3]。

目前，文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏中已分離得到的化合物種類有黃酮[4]、萜類、鞣質(zhì)及揮發(fā)油等，且具有抗腫瘤[5]、抗炎[6-7]、抑菌[8]、抗氧化[9]及α-葡萄糖苷酶抑制[10]等活性。本文首次采用頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法對(duì)側(cè)柏葉中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，樣品用量少，集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體，具有快速分析、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，為進(jìn)一步研究側(cè)柏葉揮發(fā)性成分及其藥理活性提供理論基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器

GC 6890 N GC/5975 MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)安捷倫公司）；手動(dòng)固相微萃?。⊿PME）裝置（美國(guó)Supelco公司）；萃取頭為100μm聚二甲基硅氧烷（PDMS-DVB，美國(guó)Supelco公司）。

1.2 試劑

C6-C26正構(gòu)烷烴（美國(guó)Alfa Aesar公司）。

1.3 藥材

側(cè)柏葉于2017年7月采集于河南省鄭州市，經(jīng)河南大學(xué)中藥研究所李昌勤教授鑒定為側(cè)柏（P.orientalis）的葉，標(biāo)本存于河南大學(xué)中藥研究所。

2 方法與結(jié)果

2.1 頂空固相微萃取

取側(cè)柏葉0.7g，置于5mL進(jìn)樣瓶中，使其不接觸PDMS-DVB纖維頭（100μm），于50 ℃下頂空萃取30min，隨后取出纖維頭，立即插入GC-MS進(jìn)樣口（溫度250℃），脫附1min。使用前，將萃取纖維頭于GC-MS進(jìn)樣口（250℃）老化10min；載氣體積流量為1.0mL/min。

2.2 GC/MS分析條件

色譜條件色譜柱：HP-5 MS石英彈性毛細(xì)管柱（0.10μm×30.0m×250μm），載氣為高純氦氣（99.999%），流速1.0mL/min，進(jìn)樣口溫度250℃；升溫程序：色譜柱初始溫度50℃（保持2.0min），以4℃/min升溫至120℃（保持2min），最后以6℃/min升溫至230℃（保持10min）。分流進(jìn)樣，分離比為10：1。

質(zhì)譜條件：電子轟擊（EI）離子源；電子能量80eV；電子倍增器電壓1588V；離子源溫度為230℃；四極桿溫度150℃；傳輸線溫度為280℃。掃描范圍m/z 30-400amu。

2.3 保留指數(shù)（KI）測(cè)定

按照文獻(xiàn)[11-12]，將色譜正構(gòu)烷烴和樣品（C6-C26）等量混合后，按上述GC-MS條件進(jìn)行色譜分析，測(cè)定各正構(gòu)烷烴和在完全相同的條件下樣品的保留時(shí)間，通過(guò)測(cè)定各組分的保留時(shí)間從而計(jì)算出樣品中各組分的Kovats保留指數(shù)。其計(jì)算公式為：

2.4 結(jié)果

用HS-SPME-GC/MS技術(shù)，從側(cè)柏葉中分離鑒定出10個(gè)揮發(fā)性成分，占總峰面積的77.23%。具體結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討論

從表1可以看出，側(cè)柏葉中主要揮發(fā)性成分是萜烯類化合物，包括3-蒈烯（23.97%）、石竹烯（11.06%）、α-蒎烯（9.12%）及α-石竹烯（8.26%）等。據(jù)報(bào)道，α-蒎烯具有比較濃郁的香氣，含量為9.12%，且α-蒎烯具有較強(qiáng)的祛痰、抗炎和抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用[13-14]。此外，β-水芹烯含量為4.14%。文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，β-水芹烯對(duì)麥蛾、玉米象成蟲(chóng)、赤擬谷盜成蟲(chóng)等儲(chǔ)糧害蟲(chóng)具有一定的毒殺作用[15]，其可能為側(cè)柏葉抑菌作用的主要活性成分。本文用HS-SPME-GC/MS法分析側(cè)柏葉中揮發(fā)性成分，與雷華平等[16]等氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）分析結(jié)果有差異。據(jù)分析，這可能是因?yàn)槲覀兯脗?cè)柏葉藥材的產(chǎn)地[17-18]以及采收時(shí)間[19]等因素影響所致，具體原因仍需要進(jìn)一步研究。側(cè)柏資源豐富，本文通過(guò)對(duì)其揮發(fā)性成分的研究，可為側(cè)柏葉的開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)，但其揮發(fā)性成分與藥效的相關(guān)性有待進(jìn)一步的研究。

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