卵黃囊瘤的FASN免疫組化與臨床病理特征的相關性分析

李艷菊， 馬 超， 高 翔

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卵黃囊瘤的FASN免疫組化與臨床病理特征的相關性分析

李艷菊1， 馬 超2， 高 翔2

（1.延安大學附屬醫(yī)院病理科， 陜西 延安 716000 2.陜西省延安市人民醫(yī)院病理科， 陜西 延安 716000）

【摘 要】目的：探討卵黃囊瘤的脂肪酸合成酶（FASN）免疫組化與臨床病理特征的相關性。方法：選擇2011年5月至2015年2月我院診治的卵黃囊瘤患者60例（觀察組）與正常健康人60例（對照組），選擇兩組的卵巢新鮮標本進行FASN表達的免疫組化分析，同時調查觀察組的臨床病理特征，進行相關性分析。結果：FASN在觀察組中的陽性表達率分別為83.3%，在對照組中的陽性表達率為5.0%，FASN在觀察組的陽性表達率都高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在60例卵黃囊瘤組織中，FASN的表達在不同FIGO分期、分化程度與淋巴結轉移組織中的陽性表達率對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：FASN在卵黃囊瘤中呈現高表達狀況，能有效反應卵黃囊瘤組織的FIGO分期、分化程度與淋巴結轉移等病理狀況，與卵黃囊瘤病情存在明顯的相關性。

【關鍵詞】卵黃囊瘤； 脂肪酸合成酶； 臨床病理特征； 相關性； 免疫組化

本文具體探討了卵黃囊瘤的FASN免疫組化與臨床病理特征的相關性，現報道如下。

1　資料與方法

1.1 研究對象：選擇2011年5月至2015年2月我院診治的卵黃囊瘤患者60例（觀察組）與正常健康人60例（對照組），納入標準；臨床資料完整；觀察組的卵黃囊瘤病程在3年以內；均未接受放、化療；年齡≥18周歲；得到醫(yī)院倫理委員會的批準。觀察組中年齡最小19歲，最大78歲，平均年齡53.66±6.25歲；平均體重指數為22.13±2.12kg/m2；分化類型：高分化腺癌40例，中分化腺癌10例，低分化癌10例；FIGO分期：Ⅱ期20例，Ⅲ期20例，Ⅳ期20例；平均腫瘤直徑14.33± 2.44cm；淋巴結轉移情況：轉移40例，無轉移20例。而對照組中年齡最小19歲，最大79歲，平均年齡53. 13±6.44歲；平均體重指數為22.34±2.00kg/m2。兩組的性別、年齡、體重指數等基線數據對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 免疫組化方法：兔抗人FASH單克隆抗體來自美國ABCMA公司，工作液濃度1∶200；山羊抗鼠（兔）IgG二抗來自博士德生物工程有限公司，免疫組化法行免疫組化染色，嚴格按照說明書進行操作，陽性對照片由美國ABCMA公司提供，由PBS代替一抗做陰性對照。選擇兩組的卵巢新鮮標本，新鮮標本都經常規(guī)福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)3μm厚度切片。消除內源性過氧化物酶活性，應用高壓鍋抗原修復，然后加入FASH一抗，4℃放置于室溫約30min，PBS液連續(xù)洗滌3次。滴加二抗，37℃放置10min，PBS液再次洗滌3次；DAB顯色約3～5min，蘇木素復染細胞核，封片觀察。

1.3 判斷標準：FASH在細胞內陽性表達于細胞質。每張切片于高倍鏡（400倍）下隨機計數5個視野，陽性細胞數＞20%為陽性表達。病理診斷結果全部由科室具有豐富診斷經驗的病理醫(yī)師診斷，最后運用單盲法由一名高級職稱醫(yī)師進行復診。

1.4 調查內容：我們調查了兩組的一般資料，主要對觀察組患者的臨床病理特征與預后狀況進行了分析，包括年齡、性別、FIGO分期、腫瘤直徑、淋巴結轉移、體重指數、分化類型等。

1.5 統(tǒng)計方法：選擇SPSS14.00軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用兩獨立樣本的t檢驗；計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2　結 果

2.1 FASN陽性表達率對比：經過判定，FASN在觀察組中的陽性表達率為83.3%（50/60），在對照組中的陽性表達率為5.0%（3/60），FASN在觀察組的陽性表達率都高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（χ2=14.092，P ＜0.05）。見圖1、圖2。

圖1　FASN在觀察組中的陽性表達（×400）

圖2　FASN在對照組中的陽性表達（×400）

2.2 FASN在卵黃囊瘤的表達與臨床病理特征的相關性：在60例卵黃囊瘤組織中，FASN的表達在不同FIGO分期、分化程度與淋巴結轉移組織中的陽性表達率對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1　FASN在卵黃囊瘤的表達與臨床病理特征的相關性（n）

2.3 病例分析：患者，女，32歲，2015年1月就診于我院婦產科，剖宮產手術時，發(fā)現盆腔腫塊，考慮畸胎瘤，手術切除送病理科，肉眼所見：（右側卵巢）灰紅腫物一個，大小15x14x9cm，表面粗糙，切面灰白，質地略脆，未見輸卵管，（左側卵巢）灰白色腫物6x4x3cm，切面灰白，質地中等。冰凍結果：（右側）卵巢考慮惡性病變，（左側）卵巢考慮成熟性囊性畸胎瘤，遂行全子宮另一側輸卵管、部分網膜組織切除及囊尾切除。病理診斷：（右側）卵巢惡性卵黃囊瘤；（左側）卵巢成熟性囊性畸胎瘤；慢性宮頸炎；增生期子宮內膜；雙側輸卵管慢性炎；網膜未見瘤組織，慢性囊尾炎。免疫組化結果：FASN（+）。術后復查 AFP＞1210ng/mL，HCG11880.00ng/mL。給予戊酸雌二醇和多西他塞化療，目前患者生病體征平穩(wěn)，未出現明顯副作用。

3　討 論

卵黃囊瘤是臨床上比較罕見的生殖細胞腫瘤，好發(fā)于睪丸、卵巢，偶可發(fā)生在縱隔、松果體等組織。流行病學調查顯示當前卵黃囊瘤的發(fā)病傾向年輕者，是威脅年輕女性健康的惡性腫瘤之一。卵黃囊瘤與其它卵巢惡性腫瘤的臨床表現有相似之處，其主要的臨床表現為腹痛、腹部包塊、腹水、腹脹等［1］。

現代研究表明卵黃囊瘤的發(fā)生和進展與基因的表達差異有關，特別是卵黃囊瘤在增生的過程中需要大量的脂肪酸來合成細胞膜所必須的成分。脂肪酸合成酶（FASN）是合成內源性脂肪酸的關鍵酶，腫瘤細胞增生能力越強，脂肪酸合成酶表達強度越高；抑制脂肪酸合成酶的表達，就可切斷腫瘤細胞所必須的脂肪酸來源，進而抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，為卵黃囊瘤的治療開辟了新的思路［2］。本研究顯示FASN在觀察組中的陽性表達率分別為83.3%，在對照組中的陽性表達率為5.0%，FASN在觀察組的陽性表達率都明顯高于對照組（P＜0.05），表明脂肪酸合成酶與卵黃囊瘤發(fā)生發(fā)展關系密切，活化形式的卵黃囊瘤具有促癌作用。

脂肪酸合成酶是一種多功能酶，包含有7種酶活性和1個?；d體蛋白，在脂肪酸合成中起到重要作用。脂肪酸合成酶可利用體內的碳水化合物來生成內源性脂肪酸，其將乙酰輔酶A作為底物、NADPH作為供氫體、丙二酰輔酶A作為碳源來合成長鏈脂肪酸［3］。脂肪酸合成酶的表達上調就可以使細胞適應缺氧的狀態(tài)和酸性環(huán)境，缺氧明顯反而抑制了脂肪酸合成酶的表達。在多種腫瘤中，脂肪酸合成酶的高表達均與腫瘤的侵襲性有關且提示預后不良［4］。有研究顯示脂肪酸合成酶可促進腫瘤細胞的凋亡、減少腫瘤細胞增殖及轉移，為此根據脂肪酸合成酶的表達就能評估惡性腫瘤的淋巴結或遠處轉移情況。不過也有研究表明脂肪酸合成酶的過表達可導致腫瘤獲得多重耐藥性，其中包括多種化療藥物［5］。本研究顯示在60例卵黃囊瘤組織中，FASN的表達在不同FIGO分期、分化程度與淋巴結轉移組織中的陽性表達率對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。特別是隨腫瘤分期的提高，FASN的表達強度也顯著增加，表明FASN可能參與卵黃囊瘤的發(fā)生發(fā)展過程。

【參考文獻】

［1］ 劉飛飛，王建軍，沈勤，等.睪丸原發(fā)性卵黃囊瘤臨床病理分析（附8例報告）［J］.中華男科學雜志，2014，20（5）：435～438.

［2］ Ventura R，Mordec K，Waszczuk J，et al.Inhibition of de novo palmitate synthesis by fatty acid synthase induces apop-tosis in tumor cells by remodeling cell membranes，inhibiting signaling pathways，and reprogramming gene expression［J］. EBio Medicine，2015，2（8）：806～822.

［3］ 劉鵬，石遠凱，何小慧，等.序貫高劑量化療聯合自體造血干細胞移植治療復發(fā)耐藥的腹腔原發(fā)卵黃囊瘤1例并文獻復習［J］.中國腫瘤臨床，2015，1（8）：32～33.

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［5］ Reifen R，Karlinsky A，Stark AH，et al.α-Linolenic acid （ALA）is an anti-inflammatory agent in inflammatory bowel disease［J］.Nutr Biochem，2015，63（15）：200～204.

【文章編號】1006-6233（2016）07-1111-04

【文獻標識碼】A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.07.021

【基金項目】陜西省科技攻關項目，（編號：2006k09-G2（11）

The Correlation Analysis on FASN Immunohistochemistry Expression and

Clinicopathological Features in Patients with Yolk Sac Tumor

LI Yanju， et al
（The Affiliated Hospital to Yan＇an University，Shanxi Yanan716000，China）

【Abstract】Objective：To investigate the correlation of FASN immunohistochemistry expression and clinicopathological features in the yolk sac tumor patients.Methods：60 patients with yolk sac tumor hospitalized from May 2011 to February 2015 were selected as experimental group and 60 cases of normal healthy people as the control group.The ovarian fresh specimens of the two groups were obtained and were analyzed by using the FASN Immunohistochemical expression，while were investigated the clinical and pathological features of the observation group and were given the correlation analysis.Results：The FASN positive expression rate in observation group and control group was 83.3%，5.0%，The FASN positive expression rate in the observation group were significantly higher than the control group（P＜0.05）.In the observation group，The positive expression rate in different FIGO stage，differentiation and lymph node metastasis tissues were statistically significant（P ＜0.05）.Conclusion：The FASN is highly expressed in yolk sac tumor status patients，it can effective response yolk sac tumor tissue FIGO stage，tumor differentiation and lymph node metastasis and other pathological conditions，there's significant correlation with yolk sac tumor disease.

【Key words】Yolk sac tumor； Fatty acid synthase； Clinicopathological features； Relevance；Immunohistochemistry