前列腺干細(xì)胞抗原在前列腺癌中的表達(dá)及其與雄激素受體、雌激素受體聯(lián)合檢測(cè)的意義

丘佳明,葉　凱

(江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院病理科，江蘇常熟　215500)

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·臨床研究·

前列腺干細(xì)胞抗原在前列腺癌中的表達(dá)及其與雄激素受體、雌激素受體聯(lián)合檢測(cè)的意義

丘佳明,葉凱

(江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院病理科，江蘇常熟215500)

摘要：目的探討前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)在前列腺癌(PCa)和良性前列腺增生(BPH)中的表達(dá)，及其與雄激素受體(AR)、雌激素受體(ER)聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義。方法應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)PSCA、AR和ER在50例PCa和30例BPH標(biāo)本中的表達(dá)。結(jié)果PSCA在PCa中高表達(dá)，在BPH中少量表達(dá)或不表達(dá)，PSCA表達(dá)的變化與PCa的Gleason評(píng)分具有明顯相關(guān)性。AR在PCa中的表達(dá)與其分化程度無(wú)明顯相關(guān)性，與PSCA無(wú)明顯相關(guān)性。ER在BPH中表達(dá)陽(yáng)性率為100%，且普遍強(qiáng)陽(yáng)性，在PCa中表達(dá)的陽(yáng)性率為12%，均與PSCA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論P(yáng)SCA在前列腺細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測(cè)PSCA和ER有助于PCa和BPH的診斷和治療。

關(guān)鍵詞:前列腺干細(xì)胞抗原；雄激素受體；雌激素受體；前列腺癌

前列腺癌作為男性生殖系統(tǒng)的常見(jiàn)惡性腫瘤，發(fā)病率逐年增加，居男性惡性腫瘤發(fā)病率第二位[1]。目前臨床醫(yī)生對(duì)前列腺癌(prostate cancer，PCa)主要依靠前列腺特異抗原、Gleason評(píng)分和腫瘤分期進(jìn)行綜合判斷，但臨床實(shí)際工作中，該綜合測(cè)評(píng)的準(zhǔn)確率僅為70%[2]。人們對(duì)于前列腺癌的早期診斷、預(yù)后判斷和理想治療靶點(diǎn)的探尋從未停止。還沒(méi)有一個(gè)完全理想的標(biāo)記物可以應(yīng)用于此[3]，而目前人們正在探索和研究新的標(biāo)記物，以及多個(gè)標(biāo)記物的聯(lián)合檢測(cè)。1998年，REITER等[4]發(fā)現(xiàn)前列腺干細(xì)胞抗原(prostate stem cell antigen，PSCA)，具有較高的前列腺組織特異性，其在前列腺癌診斷、靶向治療和預(yù)后判斷方面作用的研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)，有望成為PCa新的常規(guī)檢查。

雄激素受體(androgen receptor，AR)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)在前列腺正常生理功能、前列腺增生及腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，而在激素依賴和非激素依賴的PCa病例中，以PSCA為靶點(diǎn)的治療效果不同[5]。因此，本文應(yīng)用免疫組化方法分別檢測(cè)前列腺組織中PSCA、ER、AR的表達(dá)，探討PSCA在PCa中的作用和三者相互之間的關(guān)系。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象50例PCa和30例良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)病例均來(lái)自江蘇省常熟市第二人民醫(yī)院2013～2014年的泌尿外科住院患者，59～88歲，平均年齡72.6歲，均未進(jìn)行激素、手術(shù)或放化治療，所選樣本為穿刺或經(jīng)尿道電切組織，經(jīng)常規(guī)組織病理學(xué)制片。根據(jù)國(guó)際泌尿病理學(xué)會(huì)(the International Society of Urological Pathology，ISUP)2005 Gleason分級(jí)修訂系統(tǒng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：Gleason評(píng)分4分2例、5分3例、6分6例、7分14例、8分13例、9分8例、10分4例。

1.2試劑一抗選用兔抗人PSCA多克隆抗體、鼠抗人ER單克隆抗體和兔抗人AR單克隆抗體，各一抗試劑及SP系列染色試劑盒、DAB顯色試劑盒等均購(gòu)自北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3方法所有標(biāo)本均為4%甲醛固定，石蠟包埋，3 μm厚連續(xù)切片，免疫組化操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)，根據(jù)每一種抗體要求對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)，并設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。

1.4結(jié)果判斷PSCA表達(dá)于胞質(zhì)或胞膜，ER和AR表達(dá)于細(xì)胞核，均為棕黃色或棕褐色顆粒樣著色。陽(yáng)性結(jié)果判定采用免疫組化(immunohistochemistry score，HIS)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[7]：①陽(yáng)性細(xì)胞染色程度強(qiáng)弱：可疑陽(yáng)性或陰性判定為0分，弱陽(yáng)性為1分，中度陽(yáng)性為2分，強(qiáng)陽(yáng)性為3分；②陽(yáng)性細(xì)胞分布范圍百分比：1%～10%判定為1分，11%～50%為2分，51%～80%為3分，81%～100%為4分；③以上兩項(xiàng)乘積為IHS評(píng)分：0分為-，1～4分為+，5～8分為++，9～12分為+++。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)資料用χ2表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1PSCA在PCa和BPH中的表達(dá)PSCA在PCa中高度表達(dá)(圖1)，表達(dá)定位于前列腺癌細(xì)胞，細(xì)胞間質(zhì)無(wú)表達(dá)，陽(yáng)性率為92%(46/50)；IHS評(píng)分：41例+++、2例++、3例+，普遍高表達(dá)。且與Gleason評(píng)分關(guān)系密切：Gleason評(píng)分為4分的病例PSCA表達(dá)均為-；Gleason評(píng)分5分的病例2例表達(dá)+，1例-；Gleason評(píng)分6分的病例表達(dá)4例+++， 2例++；Gleason評(píng)分7分和8分的病例表達(dá)均為+++；Gleason評(píng)分9分病例表達(dá)7例+++，1例+；10分的病例表達(dá)3例+++，1例-。可見(jiàn)隨Gleason評(píng)分增加PSCA表達(dá)增強(qiáng)。PSCA在BPH組織中少量表達(dá)(圖1A、1B)，表達(dá)定位于前列腺基底細(xì)胞層，陽(yáng)性率為43.3%(13/30)，均為+或++。故PSCA在二者間的表達(dá)差異有顯著性(χ2=51.218，P<0.001)。

2.2AR、ER在PCa和BPH中的表達(dá)AR在PCa和BPH中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為78%(37/50)及53.3%(16/30)(圖1C、1D)，兩者間無(wú)明顯差異(χ2=3.582，P=0.087)，且AR在PCa中的表達(dá)與其分化程度無(wú)明顯相關(guān)性。ER在PCa和BPH中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為12%(6/50)及100%(30/30)(圖1F、1G)，兩者間差異明顯(χ2=58.667，P<0.001)，且在BPH中普遍為+++。

圖1PSCA、AR、ER在PCa和BPH組織的表達(dá)(SP,×200)

A：PSCA、 PCa組織；B：PSCA、BPH組織；C: AR、PCa組織；D:AR、BPH組織； E:ER、PCa組織； F: ER、BPH組織。

3討論

PSCA最早由REITER等[4]在前列腺癌動(dòng)物模型LAPC-4鼠中發(fā)現(xiàn)，為前列腺特異性表達(dá)的糖化磷脂酰肌醇錨定的細(xì)胞膜表面抗原，其基因30%與干細(xì)胞抗原2(stem cell antigen-2, SCA-2)相同，且來(lái)源于前列腺，故命名為前列腺干細(xì)胞抗原。PSCA屬于Thy-1/Ly-6家族成員之一，包含123個(gè)氨基酸，基因定位于8號(hào)染色體的q24.2帶。目前對(duì)PSCA在PCa的各方面研究有很多，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)，我們從以下幾方面進(jìn)行探討。

在前列腺癌診斷方面，BARBISAN等[8]認(rèn)為從前列腺正常上皮到增生直至發(fā)展成癌，PSCA的表達(dá)不斷增加，這與本文結(jié)論一致，且本文中PSCA的表達(dá)與Gleason評(píng)分相關(guān)性明顯，中低分化癌普遍高表達(dá)，提示PSCA在細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過(guò)程中發(fā)揮作用。本文低分化癌中的3例病例為陰性，考慮為低分化癌的癌細(xì)胞合成分泌功能降低，進(jìn)而影響PSCA的表達(dá)，在實(shí)際工作中需注意低分化癌的鑒別診斷。

在治療方面，PSCA的高度組織特異性及其與腫瘤分級(jí)的密切關(guān)系，使得基于PSCA為靶點(diǎn)的免疫治療研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)[9]， ANTONARAKIS等[10]選取13例PCa患者，將人抗PSCA單克隆抗體AGS-1C4D4通過(guò)靜脈注射方式注入體內(nèi)，劑量不同，3周1次，中位時(shí)間24周，觀察結(jié)果顯示，15%(2/13)的患者PSA降低幅度大于25%，46%(6/13)的患者病情穩(wěn)定持續(xù)時(shí)間超過(guò)12周，并且患者對(duì)不良反應(yīng)基本耐受。

在預(yù)后判斷方面，ZHAO等[11]認(rèn)為PSCA具有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和侵襲轉(zhuǎn)移的作用，而MOORE等[12]認(rèn)為PSCA可能不會(huì)影響到PCa的發(fā)生，但是具有抑制PCa轉(zhuǎn)移的作用。本文中PSCA 的表達(dá)與患者年齡、PSA水平、腫瘤分期及有無(wú)轉(zhuǎn)移情況等臨床預(yù)后情況均無(wú)明確聯(lián)系，是否與本實(shí)驗(yàn)研究樣本量偏少，或者是臨床隨訪缺失有關(guān)，待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量研究證實(shí)。

在與AR聯(lián)合檢測(cè)方面，本文中AR在PCa和BPH中表達(dá)無(wú)明顯差異性，與Gleason評(píng)分無(wú)明顯相關(guān)，與PSCA的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)，提示AR與PSCA之間可能無(wú)明顯的內(nèi)在聯(lián)系，考慮PCa的發(fā)生發(fā)展過(guò)程并不是完全依賴AR，AR在PCa癌細(xì)胞內(nèi)可能會(huì)發(fā)生激素非依賴轉(zhuǎn)化[13]，這些都限制了AR在PCa診斷治療中的價(jià)值。在與ER聯(lián)合檢測(cè)方面，從本實(shí)驗(yàn)可發(fā)現(xiàn)隨著PCa 病理分級(jí)的增高，PSCA表達(dá)增強(qiáng)的同時(shí)伴有ER表達(dá)降低的趨勢(shì)，二者之間存在明顯負(fù)相關(guān)。在BPH中，ER陽(yáng)性率達(dá)到100%，且普遍高表達(dá)，而PSCA陽(yáng)性率為43.3%，基本為弱陽(yáng)性。提示ER的缺失對(duì)PCa的發(fā)生和進(jìn)展有一定的作用，ER和PSCA在分子水平上可能存在某種互相聯(lián)系，聯(lián)合檢測(cè)PSCA和ER可以指導(dǎo)PCa和BPH的診斷和治療。

總之，PSCA在前列腺細(xì)胞增殖、腫瘤形成的演進(jìn)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測(cè)PSCA和ER有助于指導(dǎo)PCa和BPH的診斷和治療。

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(編輯王瑋)

收稿日期：2015-05-30修回日期：2015-07-10

作者簡(jiǎn)介:丘佳明(1977-)，男(漢族)，學(xué)士學(xué)位，副主任醫(yī)師，研究方向：腫瘤病理診斷.E-mail:qiujiaming@sina.com

中圖分類號(hào):R737

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

DOI：10.3969/j.issn.1009-8291.2016.01.011

Expression of PSCA in prostate cancer and significance of combined detection of PSCA, AR and ER

QIU Jia-ming,YE Kai

(Department of Pathology, the 2nd People’s Hospital of Changshu, Changshu 215500, China)

ABSTRACT:ObjectiveTo investigate the expression of prostate stem cell antigen (PSCA) in prostate cancer (PCa) and benign prostatic hyperplasia (BPH), and the clinical significance of combined detection of PSCA, androgen receptor (AR) and estrogen receptor (ER).MethodsThe expressions of PSCA, AR and ER were determined with immunohistochemical method in 50 cases of PCa and 30 cases of BPH. ResultsPSCA expression was higher in PCa, lower or loss of expression in BPH. Different PSCA expression levels were significantly correlated with Gleason score in PCa. The expression of AR in PCa was not correlated with Gleason score and PSCA. The positive rate of ER in BPH was 100%, and generally strong positive. The positive rate of ER in PCa was 12%. There was negative correlation between the expression of PSCA and ER in BPH and PCa. ConclusionsPSCA may play an important role in cell proliferation and formation of PCa. The combined detection of PSCA and ER is helpful for the diagnosis and treatment of PCa.

KEY WORDS:prostate stem cell antigen; androgen receptor; estrogen receptor; prostate cancer