SYSMEX CS5100全自動(dòng)凝血儀性能評(píng)估和參考區(qū)間的驗(yàn)證

潘俊均,徐名烤,林佩娜,雷亞利,杜　華，隋　洪

(廣東省東莞市康華醫(yī)院檢驗(yàn)科　523000)

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·臨床研究·

SYSMEX CS5100全自動(dòng)凝血儀性能評(píng)估和參考區(qū)間的驗(yàn)證

潘俊均,徐名烤,林佩娜,雷亞利,杜華，隋洪

(廣東省東莞市康華醫(yī)院檢驗(yàn)科523000)

摘要:目的驗(yàn)證SYSMEX CS5100全自動(dòng)凝血儀的系統(tǒng)性能，確定該檢測(cè)系統(tǒng)是否穩(wěn)定、準(zhǔn)確、可靠。方法從精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍、可比性、可報(bào)告范圍、檢測(cè)下限、參考區(qū)間的驗(yàn)證等方面對(duì)SYSMEX CS5100進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍、可比性、可報(bào)告范圍、檢測(cè)下限、參考范圍等驗(yàn)證全部通過(guò)。結(jié)論SYSMEX CS5100凝血儀是一個(gè)精密度好，準(zhǔn)確度高，攜帶污染率低，相關(guān)系數(shù)好，可比性好，檢測(cè)范圍寬的檢測(cè)系統(tǒng)。

關(guān)鍵詞:SYSMEX CS5100；全自動(dòng)凝血儀；性能驗(yàn)證

SYSMEX CS5100全自動(dòng)血凝儀是一部集合了凝固法、顯色法、凝集法、免疫法于一體，用于體外診斷的全自動(dòng)凝血分析儀，操作簡(jiǎn)單，具有超速度處理能力：凝血酶原時(shí)間(PT)或活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT) 400測(cè)試/小時(shí)，D-二聚體202測(cè)試/小時(shí)，同時(shí)具有多個(gè)急診位可供急診標(biāo)本插隊(duì)檢測(cè)。該儀器還具有標(biāo)本質(zhì)量智能監(jiān)測(cè)HIL檢測(cè)功能：可以在測(cè)定前對(duì)標(biāo)本進(jìn)行監(jiān)測(cè)，客觀判斷溶血、黃疸及乳糜信息并自動(dòng)選擇合適波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，抗干擾能力強(qiáng)。根據(jù)《臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證》[1]，國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)，《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量與能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[2]和《臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)》[3]的相關(guān)規(guī)定，作者對(duì)新引進(jìn)的CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀從精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍、可比性、可報(bào)告范圍、檢測(cè)下限、參考范圍等方面進(jìn)行驗(yàn)證性能評(píng)價(jià)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑SYSMEX CS5100全自動(dòng)凝血儀。試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品均為西門(mén)子配套產(chǎn)品。

1.2方法

1.2.2準(zhǔn)確性試驗(yàn)參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)EP15-A2[5]的文件進(jìn)行。CS5100經(jīng)校準(zhǔn)、日常維護(hù)保養(yǎng)后，使用配套德靈各水平的定值質(zhì)控品，PT、APTT,D-二聚體為2個(gè)水平，F(xiàn)IB、TT 為1 個(gè)水平驗(yàn)證其準(zhǔn)確性，每個(gè)結(jié)果重復(fù)測(cè)定3次，結(jié)果應(yīng)在質(zhì)控品標(biāo)識(shí)的可控范圍內(nèi)，偏倚應(yīng)在廠家標(biāo)識(shí)的±10%范圍內(nèi)；同時(shí)結(jié)合該儀器參加的2015年原衛(wèi)生部臨檢中心凝血室間質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.2.3攜帶污染率試驗(yàn)(1)高值標(biāo)本(A)對(duì)低值標(biāo)本(N)的污染：取各檢測(cè)項(xiàng)目高值和低值標(biāo)本各1份，將低值標(biāo)本置標(biāo)本架1位和3位置，高值標(biāo)本置于2位置，每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定3次，記錄結(jié)果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。K1=[N4-MEAN(N1、N2、N3)]/MEAN(N1、N2、N3),應(yīng)符合廠家標(biāo)識(shí)的±10%范圍內(nèi)；(2)低值標(biāo)本對(duì)高值標(biāo)本的污染：將高值標(biāo)本置標(biāo)本架1和3位置，低值標(biāo)本置于2位置，每個(gè)標(biāo)本分別測(cè)定3次，記錄結(jié)果：A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6。計(jì)算：K2=[(A4-MEAN(A1、A2、A3)]/MEAN(A1、A2、A3)，應(yīng)符合廠家標(biāo)識(shí)的±10%范圍內(nèi)。

1.2.4線性范圍試驗(yàn)參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)EP6-A2[6]的文件進(jìn)行，選取多個(gè)高濃度患者的血漿充分混合，重復(fù)測(cè)定5 次，取平均值作為接近預(yù)期上限的高濃度血漿(H)，用配套稀釋液分別按100%、80%、60%、40%、20%、5%進(jìn)行稀釋?zhuān)謩e測(cè)定FIB和D-二聚體，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算線性回歸方程的斜率(a)和相關(guān)系數(shù)(r)值。范圍內(nèi)線性回歸方程的斜率在1.00±0.03范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或相關(guān)系數(shù)r2≥0.95為可接受結(jié)果。

1.2.5可比性試驗(yàn)按CLIA′88 的室間質(zhì)評(píng)能力(PT) 為參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。用CS5100與通過(guò)校準(zhǔn)的CA7000全自動(dòng)凝血分析儀作為參比儀器間進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。選取20例住院患者標(biāo)本，其中包含正常、異常結(jié)果的也應(yīng)覆蓋黃疸、脂血和溶血標(biāo)本，分別在兩臺(tái)儀器進(jìn)行PT、APTT、FIB、TT、D-二聚體5個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)，計(jì)算其相對(duì)偏差。比對(duì)試驗(yàn)要求：相對(duì)偏差小于1/2 CLIA′88允許誤差為可接受結(jié)果。

1.2.6可報(bào)告范圍(最大稀釋度驗(yàn)證)只驗(yàn)證以濃度為結(jié)果的項(xiàng)目，選用3個(gè)接近檢測(cè)范圍上限的高濃度標(biāo)本，稀釋倍數(shù)為機(jī)內(nèi)自動(dòng)稀釋的最大稀釋倍數(shù)(FIB和D-二聚體分別按1/2和1/8稀釋)。每個(gè)標(biāo)本分為兩部分，分別測(cè)得原倍和最大稀釋倍數(shù)后的標(biāo)本，每組平行測(cè)定3次取均值。相對(duì)偏差(%)為(實(shí)際檢測(cè)濃度-理論濃度)/理論濃度×100%。依據(jù)項(xiàng)目的不同，選取1/2TEA為允許誤差，相對(duì)偏差在允許誤差范圍內(nèi)，判斷為儀器自動(dòng)稀釋倍數(shù)驗(yàn)證結(jié)果可接受。

1.2.7檢測(cè)下限試驗(yàn)只驗(yàn)證FIB項(xiàng)目，使用接近0水平血漿(FIB用定標(biāo)品稀釋約10倍)連續(xù)測(cè)定10次，計(jì)算CV值，檢測(cè)下限試驗(yàn)以CV為評(píng)價(jià)指標(biāo)，CV小于廠家允許的CV為20%時(shí)為可接受結(jié)果。

1.2.8參考范圍驗(yàn)證試驗(yàn)參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) C28-A2[7]的文件進(jìn)行。取100例健康人標(biāo)本按組別進(jìn)行PT、FIB、APTT、TT,D-二聚體項(xiàng)目檢測(cè)，觀察試驗(yàn)結(jié)果是否在本室推薦的參考范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果首先利用文件提供的“1/3”規(guī)則進(jìn)行離群值檢驗(yàn)，然后按照C28-A2 判斷標(biāo)準(zhǔn)，R=結(jié)果落在參考范圍內(nèi)的標(biāo)本數(shù)/總的試驗(yàn)標(biāo)本數(shù)，R>0.95時(shí)表示該參考范圍為可接受。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

2結(jié)果

2.1精密度驗(yàn)證批內(nèi)、批間CV結(jié)果見(jiàn)表1，各項(xiàng)目批內(nèi)CV均小于3%，PT、APTT、TT和FIB 的批間CV<4%，D-二聚體的批間CV<6% 符合CLIA′88 質(zhì)量分析要求,通過(guò)驗(yàn)證。

表1　精密度驗(yàn)證結(jié)果

注：“-”表示該項(xiàng)目高水平未做驗(yàn)證。

2.2準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果在質(zhì)控品標(biāo)識(shí)的可控范圍內(nèi)，見(jiàn)表2。偏倚均小于規(guī)定的允許范圍。以CS5100參加2015年衛(wèi)生部臨檢中心凝血室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)，獲室間質(zhì)評(píng)100分，驗(yàn)證通過(guò)。

表2　準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

注：-表示無(wú)數(shù)據(jù)。

2.3攜帶污染率試驗(yàn)高值標(biāo)本對(duì)低值標(biāo)本的污染和低值標(biāo)本對(duì)高值標(biāo)本的污染的攜帶污染率均在廠家標(biāo)識(shí)的±10%范圍內(nèi)，見(jiàn)表3，說(shuō)明CS5100的自潔系統(tǒng)良好，驗(yàn)證通過(guò)。

表3　攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果(%)

2.4線性范圍試驗(yàn)FIB和D-二聚體的線性結(jié)果見(jiàn)圖1、2。r2值分別為0.997 7、0.996 5，a值分別為1.016 5、0.996 5,符合線性回歸方程的斜率在1±0.03范圍內(nèi)，以及相關(guān)系數(shù)r≥0.975或相關(guān)系數(shù)r2≥0.95的要求，表明FIB和D-二聚體實(shí)測(cè)值和理論值之間具有良好的線性關(guān)系，通過(guò)驗(yàn)證。

2.5可比性試驗(yàn)PT組的偏倚均不超過(guò)3.70%,APTT偏倚組均不超過(guò)5.64%,FIB偏倚組均不超過(guò)6.30%,TT偏倚組均不超過(guò)5.50%,D-二聚體偏倚組均不超過(guò)6.25%。以上項(xiàng)目小于1/2 CLIA′88允許誤差，表明不同儀器見(jiàn)的可比性高，驗(yàn)證通過(guò)。

2.6可報(bào)告范圍(最大稀釋度驗(yàn)證)FIB和組按儀器自動(dòng)稀釋的最大倍數(shù)稀釋后的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4，相對(duì)偏差均在允許誤差范圍內(nèi)，通過(guò)驗(yàn)證。

圖1　FIB線性

圖2　D-二聚體線性

項(xiàng)目FIB1/2稀釋驗(yàn)證結(jié)果(g/L)濃度1濃度2濃度3D-二聚體1/8稀釋驗(yàn)證結(jié)果(mg/L)濃度1濃度2濃度3原倍均值5.835.033.598.978.288.63稀釋后均值6.105.343.868.387.948.05相對(duì)偏差(%)4.636.167.436.614.116.80允許誤差(%)101010101010

表5　參考范圍驗(yàn)證結(jié)果

2.8參考范圍驗(yàn)證試驗(yàn)對(duì)本室推薦的參考值區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，見(jiàn)表5。R均在0.95以上，通過(guò)驗(yàn)證。

3討論

臨床工作中許多疾病的凝血異常診斷，止血、抗凝和溶栓藥物的臨床應(yīng)用均依賴實(shí)驗(yàn)室檢查，其臨床重要性與日俱增，檢驗(yàn)內(nèi)容不斷擴(kuò)大，工作量也日益增多；不斷出現(xiàn)的方法革新和自動(dòng)化，改變了以往單靠手工操作，自配試劑，工作效率低的局面。與此同時(shí)，要求方法標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)行質(zhì)量控制的呼聲也愈來(lái)愈高。雖然目前全自動(dòng)凝血儀在裝機(jī)時(shí)儀器廠商已提供了儀器性能的初步參數(shù)，但由于各實(shí)驗(yàn)室之間外界環(huán)境，被檢人群，檢驗(yàn)人員技術(shù)等存在著差異，因此實(shí)驗(yàn)室在儀器使用前必須對(duì)性能參數(shù)重新評(píng)估，國(guó)內(nèi)也出現(xiàn)越來(lái)越多關(guān)于凝血儀性能評(píng)價(jià)的報(bào)道[8]。作者根據(jù)《臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證》,國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)和《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量與能力認(rèn)可準(zhǔn)則》的相關(guān)規(guī)定，對(duì)新引進(jìn)的SYSMEX CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀從精密度、準(zhǔn)確度、檢測(cè)限、攜帶污染率、線性范圍、可比性、可報(bào)告范圍、檢測(cè)下限、參考范圍等方面進(jìn)行驗(yàn)證性能驗(yàn)證。其中精密度實(shí)驗(yàn)中批內(nèi)CV<規(guī)定1/4允許誤差，批間CV<規(guī)定的1/3允許誤差，說(shuō)明該儀器具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性。準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)表明偏差在允許范圍內(nèi)，提示儀器具有較高的準(zhǔn)確度。線性實(shí)驗(yàn)和攜帶污染實(shí)驗(yàn)也表明儀器具有良好的檢測(cè)線性關(guān)系和自潔努力系統(tǒng)，比對(duì)實(shí)驗(yàn)中與CA7000比對(duì)結(jié)果可以知道相關(guān)性良好，可以保證了實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的一致性?？蓤?bào)告范圍實(shí)驗(yàn)CS5100系統(tǒng)自動(dòng)稀釋在最大倍數(shù)(FIB和D-二聚體分別按1/2和1/8稀釋)下，結(jié)果仍在規(guī)定的范圍內(nèi)，表明可報(bào)告范圍寬。檢測(cè)下限實(shí)驗(yàn)中FIB在0.30 g/L前后CV仍在廠家規(guī)定的范圍內(nèi)(CV<20.00%)，表明儀器的檢測(cè)下限低。參考值范圍驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中R值均在0.95以上，表明本室推薦的參考值區(qū)間仍適用。

通過(guò)對(duì)SYSMEX CS5100全自動(dòng)血凝儀的全面的性能驗(yàn)證，作者認(rèn)為該儀器操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，自動(dòng)化程度高，精密度好、準(zhǔn)確度高，攜帶污染率低，相關(guān)系數(shù)好，可比性好，檢測(cè)范圍寬的檢測(cè)系統(tǒng)。特別適合工作量大或是現(xiàn)代化的大型實(shí)驗(yàn)室工作的需要，可以充分滿足臨床工作的需求，能更好地服務(wù)醫(yī)患工作。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.058

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)13-1875-03

(收稿日期：2016-03-12修回日期：2016-04-15)