血培養(yǎng)病原菌的臨床分布及耐藥性分析

鄧　耀,韋永瓊

(四川省成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗(yàn)科　60031)

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·臨床研究·

血培養(yǎng)病原菌的臨床分布及耐藥性分析

鄧耀,韋永瓊

(四川省成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗(yàn)科60031)

摘要:目的分析該院血培養(yǎng)陽(yáng)性菌株的構(gòu)成及藥敏情況，為臨床治療提供依據(jù)。方法對(duì)該院2014年1～8月3 342份血液標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，分離陽(yáng)性病原菌進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果分離陽(yáng)性菌101株，陽(yáng)性率為3.02%，其中革蘭陰性菌53株，占52.48%；革蘭陽(yáng)性菌38株，占37.62%；真菌4株，占3.96%。大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率分別為29.27%和 33.3%。在凝固酶陰性葡萄球菌(MRSCN)和金黃色葡萄球菌(MRSA)中分別是68.42%和50.0%。結(jié)論目前該院血培養(yǎng)病原菌以革蘭陰性菌為主，對(duì)分離菌株進(jìn)行耐藥監(jiān)測(cè)可對(duì)臨床抗菌治療提供科學(xué)依據(jù)，降低病死率。

關(guān)鍵詞:血培養(yǎng)；血流感染；病原菌；耐藥性

近年來(lái)隨著廣譜抗菌藥的大量應(yīng)用，細(xì)菌的多重耐藥問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重，如何合理使用抗菌藥物已成為全球廣泛關(guān)注的問(wèn)題。血流感染(BSI)是非常嚴(yán)重的全身性感染，是各種病原微生物和毒素侵入血循引起菌血癥、敗血癥、膿毒癥和導(dǎo)管相關(guān)性血流感染(CRBSI)等導(dǎo)致的全身多器官功能障礙綜合征(MODS)[1]。血液、骨髓培養(yǎng)檢出陽(yáng)性病原菌是臨床診斷BSI的重要依據(jù)，由于大量抗菌藥物及侵襲性血管內(nèi)裝置的廣泛應(yīng)用，使血培養(yǎng)病原菌的分布和藥敏情況發(fā)生了變遷[2]，而各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)病種與用藥習(xí)慣上也存在差異，因此血培養(yǎng)及時(shí)、準(zhǔn)確地分離病原菌，掌握耐藥性趨勢(shì)對(duì)臨床有針對(duì)性地抗菌治療至關(guān)重要。本文回顧性分析了本院血培養(yǎng)陽(yáng)性菌株臨床分布及藥敏情況，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源3 342份血液標(biāo)本來(lái)自本院2014年1～8月門(mén)診及住院患者，無(wú)菌條件下采集靜脈血，成人8～10 mL，兒童及嬰幼兒1～3 mL，注入血培養(yǎng)瓶中，及時(shí)送檢[3]。

1.2儀器與試劑采用法國(guó)梅里埃Bact /ALERT 3D 全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)及配套血培養(yǎng)瓶(分成人培養(yǎng)瓶及兒童培養(yǎng)瓶)，Vitek32全自動(dòng)微生物分析/藥敏系統(tǒng)及配套的鑒定卡和藥敏卡。

1.3方法

1.3.1病原菌的分離血培養(yǎng)接收后立即按Bact/ALERT 3D操作程序上機(jī)培養(yǎng)監(jiān)測(cè)。儀器出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警時(shí)，轉(zhuǎn)種血平板、巧克力平板、麥康凱平板、沙保羅平板，同時(shí)直接涂片革蘭染色后報(bào)告危急值。平板置CO2培養(yǎng)箱，37 ℃培養(yǎng)18～24 h；分離培養(yǎng)檢測(cè)5 d 后顯示陰性瓶者卸瓶用血平板盲傳1次，放37 ℃培養(yǎng)24 h或48 h為無(wú)菌生長(zhǎng)則報(bào)陰性。細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求進(jìn)行[4]。

1.3.2病原菌的鑒定與藥敏試驗(yàn)病原菌株分離純化后按儀器要求配制懸液，用Vitek32選擇相應(yīng)鑒定卡和藥敏板條進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，試驗(yàn)嚴(yán)格按操作說(shuō)明進(jìn)行，判斷標(biāo)準(zhǔn)遵循美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)M100最新規(guī)則。

1.4質(zhì)控菌株儀器質(zhì)控使用標(biāo)準(zhǔn)菌株為大腸埃希菌(ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853) 和金黃色葡萄球菌(MRSA，ATCC25923)。

1.5數(shù)據(jù)分析采用WHONET5.6軟件進(jìn)行細(xì)菌分布和藥敏數(shù)據(jù)分析。

2結(jié)果

2.1菌株種類(lèi)和構(gòu)成3 342份血培養(yǎng)標(biāo)本,陽(yáng)性標(biāo)本為101份,陽(yáng)性率3.02%。其中革蘭陽(yáng)性菌38株(37.62%)，革蘭陰性菌53株(52.48%)，真菌4株(3.96%)，革蘭陽(yáng)性桿菌4株(3.96%)，見(jiàn)表1。

表1　血培養(yǎng)陽(yáng)性菌株的種類(lèi)和構(gòu)成比

注：G-b代表革蘭陰性菌；G-c代表革蘭陰性球菌；G+b代表革蘭陽(yáng)性桿菌；G+c代表革蘭陽(yáng)性菌；F代表真菌；-表示無(wú)數(shù)據(jù)。

2.2血培養(yǎng)陽(yáng)性的臨床分布血培養(yǎng)陽(yáng)性菌株在本院14個(gè)主要科室的分布情況見(jiàn)表2，檢出陽(yáng)性細(xì)菌主要以大腸埃希菌和表皮葡萄球菌為主。

2.3陽(yáng)性菌株耐藥分析

2.3.1革蘭陽(yáng)性菌耐藥性MRSA和凝固酶陰性葡萄球菌(MRSCN)的比例分別為50.0%和68.42%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺中介或耐藥的葡萄球菌。腸球菌對(duì)四環(huán)素耐藥性高，無(wú)萬(wàn)古霉素耐藥。產(chǎn)單核李斯特菌對(duì)頭孢噻肟、克林霉素耐藥性高，對(duì)萬(wàn)古霉素敏感。

表2　血培養(yǎng)陽(yáng)性病原菌的臨床分布

2.3.2革蘭陰性菌耐藥性大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的檢出率分別為29.27%和33.3%。大腸埃希菌對(duì)亞胺培南或厄他培南均敏感。銅綠假單胞菌對(duì)氨芐西林和復(fù)方磺胺甲噁唑、頭孢唑林的耐藥率皆為100.0%，對(duì)哌拉西林、妥布霉素和亞胺培南都敏感。

3討論

血流感染是臨床常見(jiàn)、嚴(yán)重的感染性疾病,具有起病急、病死率高的特點(diǎn)，是醫(yī)院內(nèi)感染和死亡的主要原因之一，依靠血培養(yǎng)提供的陽(yáng)性結(jié)果是診斷血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)[5]。對(duì)血培養(yǎng)檢出的病原菌進(jìn)行回顧性研究可指導(dǎo)臨床合理用藥，緩解院內(nèi)感染壓力。本文統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性率為3.02%，比郝秀紅等[6]報(bào)道的結(jié)果低，但與蔣文強(qiáng)等[7]結(jié)果相近，可能與采血量、采血時(shí)機(jī)、采血前抗菌藥物使用，以及地域和人群類(lèi)別等有關(guān)。本院血流感染革蘭陰性菌占優(yōu)勢(shì)，與黃越芳等[8]報(bào)道一致，也符合近年醫(yī)院感染主要病原菌的報(bào)道[6,9]。隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，臨床血培養(yǎng)病原菌中凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)逐漸增多，這與臨床靜脈導(dǎo)管的使用增加有關(guān),本研究結(jié)果也有相似的趨勢(shì)[2]，尤以表皮葡萄球菌最多(24.75%)。表皮葡萄球菌可產(chǎn)生大量的細(xì)胞間脂多糖黏附素與細(xì)胞外黏液樣物質(zhì),有助吸附導(dǎo)管表面[10]，同時(shí)由于兒童采血不順利、采血時(shí)間延長(zhǎng)等可導(dǎo)致皮膚定植菌入血，提高檢出率，本院檢出率也符合該趨勢(shì)[1-2]。本文血培養(yǎng)病原菌以革蘭陰性菌為主，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌檢出率最高，而副傷寒沙門(mén)菌、傷寒沙門(mén)菌等常見(jiàn)致病菌明顯減少，這可能與衛(wèi)生條件改善，而侵入性醫(yī)療操作、病原菌交替、免疫缺損患者增多等因素有關(guān)。

革蘭陰性菌耐藥性增強(qiáng)與抗菌藥物的大量使用誘導(dǎo)產(chǎn)生ESBLs有關(guān)。產(chǎn)ESBLs菌是中心靜脈導(dǎo)管留置相關(guān)敗血癥的常見(jiàn)病原菌，本研究顯示亞胺培南或厄他培南對(duì)產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌依然具有強(qiáng)大的抗菌作用，可作為治療首選藥物[2,6]。在革蘭陽(yáng)性菌中CNS檢出率最高，以表皮葡萄球菌為主。CNS 為條件致病菌，但近年留置導(dǎo)管和醫(yī)用植入裝置等各種侵入性診療操作的廣泛使用使其成為重要的醫(yī)院感染病原菌，小兒免疫功能不全也是一個(gè)重要易感因素，尤其在引起新生兒敗血癥的病原菌中，CNS的重要性不容忽視[11]。而且表皮葡萄球菌可形成生物膜，使抗菌藥物難以達(dá)到良好效果。本院CNS對(duì)青霉素耐藥率達(dá)100%，對(duì)苯唑西林耐藥率達(dá)68.42%，未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素、利奈唑胺耐藥菌株，萬(wàn)古霉素仍是目前治療CNS最有效的藥物[1]。但CNS也是血培養(yǎng)最常見(jiàn)的污染菌，充分考慮血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)性時(shí)間和連續(xù)多瓶培養(yǎng)結(jié)果，由臨床醫(yī)師結(jié)合患者癥狀合考慮，排除污染還是很重要。

血培養(yǎng)是危重患者血行感染診斷及病情監(jiān)測(cè)的重要手段，血培養(yǎng)中病原菌耐藥率的增高勢(shì)必會(huì)影響臨床的治療,因此及時(shí)監(jiān)測(cè)病原菌變化及耐藥趨勢(shì)，指導(dǎo)臨床合理用藥至關(guān)重要。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.041

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)13-1846-02

(收稿日期：2016-03-21修回日期：2016-05-30)