免疫組化指標(biāo)在乳腺癌中的表達(dá)及臨床價值

張新閣

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免疫組化指標(biāo)在乳腺癌中的表達(dá)及臨床價值

張新閣

【摘要】目的 研究ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67免疫組化指標(biāo)在乳腺癌患者中的表達(dá)及臨床價值。方法 采取免疫組化方法檢測我院60例乳腺癌患者ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67陽性率，并分析年齡、組織分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對其表達(dá)水平的影響。結(jié)果 ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67陽性表達(dá)率分別為40.00%、46.67%、56.67%、50.00%、73.33%；41-60歲患者PR、CerbB-2、Ki 67陽性診斷率較高，浸潤性導(dǎo)管癌ER、PR、CerbB-2、Ki 67較高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者。結(jié)論 ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67均為乳腺癌的有效觀察指標(biāo)，且各指標(biāo)存在一定聯(lián)系，聯(lián)合檢測有利于準(zhǔn)確診斷及病情評價。

【關(guān)鍵詞】免疫組化指標(biāo)；乳腺癌；預(yù)后

乳腺癌為女性臨床常見惡性腫瘤，目前全球發(fā)病率呈逐年上升的趨勢［1］，且發(fā)病年齡明顯下延，隨著臨床研究的不斷成熟，越來越多的免疫組化指標(biāo)被用于病情預(yù)后和治療判斷［2］。本次研究圍繞ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67在乳腺癌中的表達(dá)特點(diǎn)進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院病理科60例乳腺癌患者為研究對象，年齡22～71歲，平均（41.30±5.06）歲；臨床分型：浸潤性小葉癌27例，浸潤性導(dǎo)管癌25例，髓樣癌8例。所選病例采集標(biāo)本后以10%福爾馬林固定，并石蠟包埋、切片（5 μm）、HE染色、復(fù)診無誤。

1.2 方法

組織標(biāo)本用10%甲醛固定1 d，常規(guī)石蠟包埋，制備5 μm厚連續(xù)切片，并貼附在APES處理的載玻片中，60°C烤片2 h，免疫組化染色主要步驟：將石蠟切片脫蠟至水，3% H2O2室溫孵育5～10 min，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性，后用蒸餾水沖洗，在PBS下浸泡約5 min，高壓鍋抗原修復(fù)，滴加一抗，在室溫環(huán)境下孵育1～2 h，也可4°C過夜，另用PBS沖洗3次，每次2 min，后用DAB溶液顯色，并用自來水進(jìn)行沖洗、脫水、復(fù)染、透明、封片等操作，與陽性標(biāo)本對比，PBS代替一抗為陰性對照。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

陽性結(jié)果表現(xiàn)為棕黃色或棕褐色顆粒，每張切片選擇10個高倍視野進(jìn)行觀察，單個視野觀察100個腫瘤細(xì)胞，計(jì)算平均陽性細(xì)胞比例。ER、PR、Ki 67陽性細(xì)胞數(shù)核著色，CerbB-2陽性細(xì)胞數(shù)陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞膜、細(xì)胞漿內(nèi)可見棕黃色顆粒，根據(jù)切片觀察視野中陽性細(xì)胞占所有細(xì)胞的比率分別陰性（＜10%）、弱陽性（10%～25%）、陽性（26%～50%）、強(qiáng)陽性（＞50%）。

表1 乳腺癌患者免疫組化指標(biāo)變化

表2 乳腺癌患者免疫組化指標(biāo)影響因素研究

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者免疫組化指標(biāo)變化

ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67陽性表達(dá)率分別為40.00%、46.67%、56.67%、50.00%、73.33%。見表1。

2.2 乳腺癌患者免疫組化指標(biāo)影響因素研究

41～60歲患者PR、CerbB-2、Ki 67陽性診斷率較高，浸潤性導(dǎo)管癌ER、PR、CerbB-2、Ki 67較高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者。見表2。

3 討論

近年乳腺癌發(fā)病率呈上升趨勢，發(fā)病年齡呈年輕化趨勢。其具體病因尚未明確，因此其早期準(zhǔn)確診斷具有較高的臨床價值［3］。本次研究圍繞ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67指標(biāo)進(jìn)行分析，研究所得結(jié)論對今后乳腺癌的防治工作有重要參考意義。

CerbB-2癌基因?yàn)槿巳旧w18 q 21中，編碼產(chǎn)物為1 850 000跨膜蛋白，具有酪氨酶蛋白激酶活性，參與細(xì)胞分裂和分化過程。目前已有研究顯示［4］，其致癌性因癌蛋白高表達(dá)、基因擴(kuò)增實(shí)現(xiàn)，其在乳腺癌發(fā)病中有重要地位，也是進(jìn)展過程中用以判斷預(yù)后的重要指標(biāo)。本次研究顯示CerbB-2陽性率為56.67%，與相關(guān)研究相符［5］。且CerbB-2表達(dá)與患者年齡有關(guān)，本研究顯示41～60歲患者陽性率為69.44%。國外研究認(rèn)為病CerbB-2和ER、PR表達(dá)為負(fù)相關(guān)關(guān)系［6］，因此基因激活性ER陰性腫瘤較為常見。p 53處于17號染色體短臂中，可分為野生型、突變型。野生型p 53基因能夠抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)化及癌基因活動，但突變型p 53基因可能導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化及癌變，促使細(xì)胞增生。有研究顯示［7］，p 63腫瘤抑制基因突變失活較為常見，且其屬于細(xì)胞增殖及分化的主要調(diào)控基因。p 53在正常細(xì)胞中可抑制腫瘤增殖，加快細(xì)胞分化，從而降低腫瘤發(fā)生率。但因?yàn)檫z傳性或獲得性因素的影響，

Ki 67蛋白主要用于觀察細(xì)胞增殖活性，其定位于細(xì)胞核，半衰期較短，和增殖相關(guān)的非組蛋白性核蛋白。有研究顯示［8］，其表達(dá)與腫瘤分化程度和浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān)。本次研究顯示Ki 67陽性率為73.33%，高于其他指標(biāo)陽性率。乳腺為PR、ER靶器官，ER、PR為調(diào)節(jié)性器官組織生長發(fā)育的雌激素和孕激素受體，雌二醇受體及孕激素受體在正常乳腺上皮細(xì)胞核內(nèi)存在，乳腺癌細(xì)胞可對ER、PR表達(dá)［9-10］。乳腺癌為雌激素依賴性腫瘤，ER、PR檢測可反應(yīng)預(yù)后，并對內(nèi)分泌治療有重要的指導(dǎo)意義。研究顯示乳腺癌細(xì)胞分化程度高時ER、PR陽性表達(dá)較高。本次研究顯示ER、PR陽性檢出率分別為40.00%、46.67%。

綜上，乳腺癌為多因素、多步驟的病理改變結(jié)果，發(fā)病過程涉及一系列基因表達(dá)變化，ER、PR、CerbB-2、p 53、Ki 67在乳腺癌中有較高的表達(dá)，且互相影響，因此通過多指標(biāo)聯(lián)合檢測可提高乳腺癌預(yù)后判斷的準(zhǔn)確性，為靶向藥物的治療提供可靠的參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

［1］ 陳穎，李睿，劉源，等. 免疫組化和PCR檢測乳腺癌Her-2、EGFRt和CK5/6過表達(dá)水平用于乳腺癌療效的評估［J］. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013，47（1）：56-59.

［2］ 孫藝斐，楊忠毅，張勇平，等.18F-FES在乳腺癌患者體內(nèi)攝取與病理免疫組化的關(guān)系［J］.中國癌癥雜志，2014（2）：128-134.

［3］ 劉紅艷，宋豐舉，雷蕾，等.1267例乳腺癌臨床與免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性分析［J］.中國腫瘤臨床，2011，38（11）：656-659.

［4］ 徐東旭，徐璐，李彥君，等.SPARC蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義［J］.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014，43（6）：493-498.

［5］ 黃玉鈿，譚云山，曾海英，等.乳腺癌組織Livin和PTEN表達(dá)與腫瘤血管生成的相關(guān)性［J］.中國免疫學(xué)雜志，2012，28（10）：886-889.

［6］ Kazemi M，Salehi Z，Chakosari RJ.TP53 codon 72 polymorphism and breast cancer in northern Iran［J］. Oncol Res，2009，18（1）：25-30.

［7］ 梁曉燕，馬少君，王原，等.骨轉(zhuǎn)錄因子Runx2和骨橋蛋白OPN在人乳腺癌組織中的表達(dá)及其與乳腺癌微鈣化的關(guān)系［J］.西安交通大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2014，35（6）：828-831.

［8］ 傅少梅，殷初陽，宋暉，等.miR-340在三陰性乳腺癌的表達(dá)和意義［J］.中國生化藥物雜志，2014（1）：72-73.

［9］ 白璐，高志安.乳腺癌中4.1N蛋白和E-cadherin蛋白表達(dá)的臨床意義［J］.醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2014（8）：73-76，85.

［10］ 馮云，周會行，李軍紅，等.肝癌缺失基因1和磷酸化粘著斑激酶蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，31（8）：1448-1451.

【中圖分類號】R730.45

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9308（2016）16-0039-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.16.025

作者單位：駐馬店市中心醫(yī)院病理科，河南 駐馬店463000

The Expression and Clinical Signifcance of Immunohistochemical Markers in Breast Cancer

ZHANG Xin'ge Department of Pathology， Central Hospital of Zhumadian City， Zhumadian He'nan 463000， China

［Abstract］Objective To research the clinical value of expression of ER，PR， CerbB-2， p 53， Ki 67 immunohistochemical markers in breast cancer. Methods Detected 60 cases of positive rate of ER， PR， CerbB-2 p 53， Ki 67 in patients with breast cancer by immunohistochemical methods in our hospital， analysis of effect of age， histological type， lymph node metastasis on expression level. Results The positive expression rates of ER， PR，CerbB-2， P53， Ki67 were 40.00%， 46.67%， 56.67%， 50.00%， 73.33%，CerbB-2， Ki 67 in 41-60 years old patients with PR positive diagnosis rate was higher， the infltrating ductal carcinoma of ER， PR， CerbB-2， high Ki 67， patients with lymph node metastasis and high positive rate in patients without lymph node patients with metastasis. Conclusion ER， PR， CerbB-2，p 53， Ki 67 are the effective observation index of breast cancer， each index has certain relation， combined detection is good at urate diagnosis anddisease evaluation.

［Key words］Immunohistochemical index， Breast cancer， Prognosis