安徽省2015年豬口蹄疫定點監(jiān)測分析

陳　曦，王　軍，占松鶴，何長生，周迎春，劉　磊，朱良強（.安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥　30095；. 霍邱縣動物疫病預防與控制中心，安徽霍邱　37400）

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安徽省2015年豬口蹄疫定點監(jiān)測分析

陳曦1，王軍1，占松鶴1，何長生1，周迎春1，劉磊2，朱良強1
（1.安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥230095；2. 霍邱縣動物疫病預防與控制中心，安徽霍邱237400）

摘要：為了解安徽省豬口蹄疫感染狀況和免疫情況，使用熒光RT-PCR和ELISA檢測方法，對安徽省12個生豬固定監(jiān)測點采集的578份扁桃體樣品和578份血清樣品分別開展口蹄疫（通用型）病毒核酸、豬A型口蹄疫抗體和豬O型口蹄疫抗體檢測。結(jié)果顯示：豬口蹄疫（通用型）病毒核酸陽性率為0，A型抗體陽性率為25.95%，O型抗體合格率為32.87%。結(jié)果表明，安徽省中小型生豬養(yǎng)殖場口蹄疫防控情況較好；部分豬場使用了A型口蹄疫疫苗免疫，但效果并不理想；O型口蹄疫抗體合格率不高，除免疫時間短的因素外，說明仍有部分豬場不重視口蹄疫免疫。

關(guān)鍵詞：口蹄疫；定點監(jiān)測；分析

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的一種高度接觸性傳染病，是世界上危害最嚴重的豬病之一[1]。按照《2015年國家動物疫病定點監(jiān)測實施方案》要求[2]，為了解安徽省規(guī)模豬場豬口蹄疫感染和免疫狀況，在全省選取12個規(guī)模豬場，作為豬口蹄疫固定監(jiān)測點，開展豬口蹄疫（通用型）病毒核酸、免疫抗體和感染抗體檢測，以便準確了解規(guī)模豬場口蹄疫免疫和感染情況，為科學防控豬口蹄疫提供技術(shù)支撐。

1　材料與方法

1.1樣品采集

1.1.1時間。2015年6月和10月采集兩次樣品，11月份統(tǒng)一檢測。

1.1.2采樣范圍全椒縣、望江縣、霍邱縣3個定點監(jiān)測縣的5個小型生豬養(yǎng)殖場（30＜存欄量≤100）、7個中型生豬養(yǎng)殖場（100＜存欄量≤1 000），共12個監(jiān)測點。

1.1.3樣品采集。采集扁桃體578份、血清578份，共1 156份樣品。血液離心后分離血清，-20 ℃保存?zhèn)溆?；組織樣品-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2實驗器材

單道、8道、12道移液器；96孔U型反應板；100 mL、1 000 mL量筒；超純水機（KL-UP-Ⅲ-10）；96通道全自動洗板機（ELX405R）；酶標儀（TECAN SUNRISE REMOTE）；全自動核酸提取儀（KingFisher Flex）；高速冷凍離心機（MIKRO-200R）；實時熒光定量PCR儀（ABI StepOne Plus）。

1.3檢測試劑

口蹄疫A型液相阻斷ELISA檢測試劑盒（批號：20150706103）、O型液相阻斷ELISA檢測試劑盒（批號：20150624101），均購自農(nóng)科院蘭州所；口蹄疫病毒通用型實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號：20150611P）、磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒（批號：TN20141026P、TN20150901P），均購自北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司。

1.4檢測方法

采用液相阻斷ELISA，檢測口蹄疫A型、O型抗體；采用口蹄疫病毒熒光RT-PCR，檢測口蹄疫（通用型）病毒核酸。具體步驟嚴格按照說明書進行。

2　結(jié)果

2.1病原學監(jiān)測結(jié)果

檢測豬扁桃體578份，檢出豬口蹄疫（通用型）病毒核酸陽性樣品0份，陽性率為0（表1）。

表1　不同場點類型口蹄疫（通用型）病原學檢測結(jié)果

2.2血清學檢測結(jié)果

2.2.1A型抗體檢測結(jié)果。檢測豬血清578份，檢出A型抗體陽性樣品150份，陽性率為25.95%。

2.2.1.1不同場點類型檢測結(jié)果。小型場和中型場陽性率分別為17.5%和29.19%，差異極顯著（X2=8.22，P＜0.01）（表2）。在使用A型疫苗的望江縣2個監(jiān)測點（均為中型場），共采集樣品130份，檢出陽性樣品69份，陽性率為53.08%；在其余未使用A型疫苗的監(jiān)測點，共采集樣品448份，檢出陽性樣品81份，陽性率為18.08%。

表2　不同場點類型豬口蹄疫A型抗體檢測結(jié)果

2.2.1.2不同年齡段檢測結(jié)果。空懷母豬口蹄疫A型抗體陽性率最高，為70.15%，最低為育肥豬，陽性率為9.01%?？諔涯肛iA型口蹄疫感染風險是育肥豬的23.7倍（RR=23.7，95%置信區(qū)間11.8~47.62，P<0.01）（表3）。

表3　不同年齡階段豬口蹄疫A型抗體檢測結(jié)果

2.2.2O型抗體檢測結(jié)果。檢測豬血清578份，其中小型生豬養(yǎng)殖場160份、中型生豬養(yǎng)殖場418份，檢出O型免疫抗體合格樣品190份，合格率為32.87%。

2.2.2.1不同場點類型檢測結(jié)果。小型場和中型場合格率分別為31.87%和33.25%，差異不顯著（表4）。

表4　不同場點類型豬口蹄疫O型抗體檢測結(jié)果

2.2.2.2不同年齡段檢測結(jié)果。妊娠母豬和空懷母豬O型抗體合格率較高，整體來說母豬群抗體合格率（69.52%，73/105）高于育肥豬群（24.73%，117/473），母豬群與育肥豬群抗體合格率差異顯著（X2=78.11，P＜0.01））（表 5）。

表5　不同年齡段豬口蹄疫O型抗體檢測結(jié)果

3　結(jié)果分析

3.1病原學檢測結(jié)果分析

在病原學檢測中，未檢出豬口蹄疫（通用型）病毒核酸陽性樣品，這說明安徽省中、小型生豬養(yǎng)殖場口蹄疫疫病防控情況較好。

3.2A型血清學檢測結(jié)果分析

豬口蹄疫A型抗體陽性率較高，是由于部分豬場使用了A型口蹄疫疫苗導致的。使用了A型疫苗的監(jiān)測點，抗體陽性率為53.08%，說明豬場使用三價滅活疫苗效果并不明顯；未免A型疫苗的豬群，陽性率為18.08%，但未發(fā)現(xiàn)臨床病例，表明存在隱性帶毒現(xiàn)象，應予以重視，要及時開展流行病學調(diào)查和監(jiān)測，力爭將發(fā)病風險降至最低。小型與中型生豬養(yǎng)殖場A型抗體陽性率差異顯著，是由于中型養(yǎng)殖場管理水平高于小型養(yǎng)殖場，并在防疫過程中使用了A型口蹄疫疫苗。

目前農(nóng)業(yè)部尚未批準生產(chǎn)A型口蹄疫疫苗，也未規(guī)定牛羊口蹄疫三價疫苗可以用于豬群免疫。同時有報道稱牛羊使用的 A 型口蹄疫疫苗對豬沒有確切的保護[3]。但生豬養(yǎng)殖場使用牛羊口蹄疫三價苗用于豬群免疫口蹄疫現(xiàn)象越來越普遍。建議農(nóng)業(yè)部調(diào)研豬場使用牛羊口蹄疫疫苗現(xiàn)狀，評估可能對養(yǎng)豬業(yè)產(chǎn)生的危害，從而明確豬場口蹄疫免疫相關(guān)標準。另外，豬A型口蹄疫空懷母豬抗體陽性率最高、育肥豬最低的結(jié)果與國內(nèi)報道的口蹄疫A型均多發(fā)于種豬，而同期仔豬和育肥豬不見發(fā)病的現(xiàn)象一致。但目前A型口蹄疫多限于母豬發(fā)生并無定論[4]。

3.3O型血清學檢測結(jié)果分析

小型、中型生豬養(yǎng)殖場O型口蹄疫免疫抗體合格率較低且差異不顯著。原因在于免疫接種口蹄疫疫苗后一周即采血檢測，造成了合格率偏低；另一種原因可能在于部分生豬養(yǎng)殖場存在不重視口蹄疫免疫現(xiàn)象，影響了全年平均抗體合格率。母豬群O型口蹄疫抗體合格率高于育肥豬群，說明母豬群豬飼養(yǎng)周期長于育肥豬群豬，而且存在二次或多次免疫情況（二免后的抗體合格率會大大提高[5]），免疫狀況明顯好于育肥豬群。這與寧華杰對長沙市生豬口蹄疫免疫效果評價結(jié)果相一致[6]。育肥豬和保育豬抗體合格率較低，提示養(yǎng)殖場在飼養(yǎng)管理過程中應做到應免盡免和及時補免。

參考文獻：

[1]韋顯凱，鄭敏，趙國民，等.不同規(guī)模豬場O型口蹄疫免疫抗體監(jiān)測和效果分析[J].畜牧與獸醫(yī)，2013，45（1）：76-77.

[2]中國動物疫病預防控制中心.關(guān)于印發(fā)《2015年國家動物疫病定點監(jiān)測實施方案》的通知[A].北京：中國動物疫病預防控制中心，2015.

[3]古保揚.淺談對A型口蹄疫的幾點認識[J].今日養(yǎng)豬業(yè)，2013（4）：35-36.

[4]唐萬勇，丁文格.警惕A型口蹄疫在豬群發(fā)生[J].中國豬業(yè)，2015（2）：73-75.

[5]魏孔福，祁淑蕓，林密，等.O型口蹄疫疫苗免疫?？贵w消長動態(tài)的LPB-ELISA檢測[J].中國獸醫(yī)科學，2007，37（9）：787-790.

[6]寧華杰，繆智剛，吳杰，等.長沙市生豬口蹄疫免疫效果的評價[J].中國動物檢疫，2011，28（4）：65-66.

（責任編輯：朱迪國）

Analysis on Sentinel Surveillance Situations for Pig FMD in Anhui Province in 2015

Chen Xi1，Wang Jun1，Zhan Songhe1，He Changsheng1，Zhou Yingchun1，Liu Lei2，Zhu Liangqiang1
（1.Anhui Provincial Animal Disease Control and Prevention Center，Hefei，Anhui 230095；2.Huoqiu Animal Disease Control and Prevention Center，Huoqiu，Anhui 237400）

Abstract：In order to understand the infection and immunity of FMD in pigs in Anhui Province，578 tissue samples and 578 serum specimens from 12 sentinel surveillance sites were taken and analyzed by using the method of RT-PCR and ELISA to detect virus nucleic and antibodies of A and O type FMD.The results showed that the virus nucleic acid positive rate was 0，the antibody positive rate of type A was 25.95%，and the pass antibody rate of type O was 32.87%. The results indicated that the prevention and control measures of FMD in small and medium-scaled pig farms of Anhui province were effective.Although the A type of FMD vaccines were immunized in parts of pig farms，the effects were not ideal. The reasons of lower pass antibody rate of type O were short of immune time and indifference of immunization in part of pig farms.

Key words：FMD；sentinel surveillance；analysis

中圖分類號：S851.3

文獻標識碼：A

文章編號：1005-944X（2016）07-0004-03

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.07.002

通訊作者：朱良強