不同組合尼羅羅非魚(yú)和奧利亞羅非魚(yú)的繁育比較

黃培玲++劉邦輝++方彰勝++陳紅++王廣軍++張志敏++梁浩亮

摘要：將尼羅羅非魚(yú)（Oreochromis niloticus）（♀）、奧利亞羅非魚(yú)（Oreochromisco aureus）（♂）各分成2組：完全符合標(biāo)準(zhǔn)組（NⅠ、AⅠ）、基本符合標(biāo)準(zhǔn)組（NⅡ、AⅡ），將它們進(jìn)行1對(duì)1雜交，形成4個(gè)不同組合的尼奧魚(yú)：NⅠ×AⅠ、NⅠ×AⅡ、NⅡ×AⅠ、NⅡ×AⅡ。結(jié)果表明：4個(gè)不同組合中，NⅠ×AⅠ組合子代的雄性率穩(wěn)定在93.0%左右，優(yōu)于NⅡ×AⅠ，顯著高于NⅠ×AⅡ、NⅡ×AⅡ（P<0.05）；成活率的結(jié)果類似。生長(zhǎng)比較數(shù)據(jù)顯示：NⅡ×AⅠ生長(zhǎng)最快，NⅠ×AⅠ次之，且均高于其他2組（P<005）。由結(jié)果可知，在生產(chǎn)中使用完全符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的NⅠ×AⅠ組合，在制備高雄性尼奧雜交魚(yú)NⅡ×AⅠ方面亦頗具潛力。

關(guān)鍵詞：奧利亞羅非魚(yú)（♂）×尼羅羅非魚(yú)（♀）；1對(duì)1雜交；雄性率；早期成活率；生長(zhǎng)率

中圖分類號(hào)： S917.4；S965.125文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）05-0338-02

收稿日期：2015-03-09

項(xiàng)目資助：廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專項(xiàng)（編號(hào)：A201301B12、A201101G02）。

作者簡(jiǎn)介：黃培玲（1974—），男，廣東饒平人，高級(jí)講師，從事水產(chǎn)動(dòng)物增養(yǎng)殖研究。E-mail：hplscxx@163.com。

通信作者：王廣軍，碩士，副研究員，從事水產(chǎn)動(dòng)物健康養(yǎng)殖研究。E-mail：wgj5810@163.com。羅非魚(yú)（Oreochromis spp.）別稱非洲鯽魚(yú)，原產(chǎn)于非洲，屬于慈鯛科的暖水性魚(yú)類，是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織重點(diǎn)推廣的優(yōu)質(zhì)魚(yú)類之一。奧尼羅非魚(yú)與其他種類羅非魚(yú)相比，具有生長(zhǎng)快、規(guī)格齊、耐寒、起捕率高等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)成為我國(guó)廣東等地出口創(chuàng)匯的主要養(yǎng)殖品種之一[1]。奧尼羅非魚(yú)理論上可以達(dá)到100%的雄性率，且雄性魚(yú)在生長(zhǎng)、抗病方面優(yōu)勢(shì)顯著，在苗種生產(chǎn)中尼奧魚(yú)雄性率不高等因素已經(jīng)嚴(yán)重影響羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益[2-4]。目前，我國(guó)現(xiàn)有尼羅羅非魚(yú)（Oreochromis niloticus）、奧利亞羅非魚(yú)（Oreochromisco aureus）品種較多，在苗種生產(chǎn)中易近親交配，同型合子數(shù)量增加，致使群體遺傳基因庫(kù)萎縮，從而加速衰退進(jìn)程[5]。因此，選擇合理親本開(kāi)展苗種培育尤為重要。為進(jìn)一步確定選育目標(biāo)及檢驗(yàn)選育親本種質(zhì)是否純化，準(zhǔn)確地確定尼羅羅非魚(yú)、奧利亞羅非魚(yú)純種生物學(xué)性狀，本研究開(kāi)展了不同組合尼羅羅非魚(yú)（♀）與奧利亞羅非魚(yú)（♂）的雜交研究，以期通過(guò)檢驗(yàn)雜交苗種雄性率來(lái)判斷所選尼羅羅非魚(yú)、奧利亞羅非魚(yú)親本的純度，并為羅非魚(yú)良種選育標(biāo)準(zhǔn)、選育路線的制定提供理論參數(shù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)親本羅非魚(yú)來(lái)源于廣東省惠州市水產(chǎn)科學(xué)技術(shù)研究所從中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心引進(jìn)的尼羅羅非魚(yú)親本與奧利亞羅非魚(yú)親本子二代。尼羅羅非魚(yú)、奧利亞羅非魚(yú)選擇標(biāo)準(zhǔn)分別符合SC 1027—1998《尼羅羅非魚(yú)》、SC 1042—2000《奧利亞羅非魚(yú)》。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1分類標(biāo)準(zhǔn)分別將尼羅羅非魚(yú)（♀）、奧利亞羅非魚(yú)（♂）分成2組，分別為尼羅標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ（NⅠ）、尼羅標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ（NⅡ），奧利亞標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ（AⅠ）、奧利亞標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ（AⅡ），其選擇形態(tài)分類標(biāo)準(zhǔn)如下。NⅠ：尾紋整齊且平行，之間互不交叉，其他性狀符合SC 1027—1998《尼羅羅非魚(yú)》。NⅡ：尾紋第3與第4條互相交叉，其他性狀符合SC 1027—1998《尼羅羅非魚(yú)》。AⅠ：背部顏色分界明顯，其中上半部為紫藍(lán)色，下半部為灰白色；上頜至頭頂2眼之間為藍(lán)色，頭頂后半部分為紫藍(lán)色；泄殖孔肥大且突出。AⅡ：體色呈灰藍(lán)色，頭部顏色分布不明顯，其中上頜為淺藍(lán)色，腮蓋后緣有藍(lán)點(diǎn)，泄殖孔相對(duì)偏小（奧利亞標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ、奧利亞標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ的其他性狀均符合SC 1042—2000《奧利亞羅非魚(yú)》）[6-8]。將NⅠ、NⅡ、AⅠ、AⅡ親本分開(kāi)飼養(yǎng)在長(zhǎng)×寬×高為 5 m×6 m×1 m的水泥池中備用。

1.2.2制種方法選出體質(zhì)量在500 g以上且性成熟的NⅠ、NⅡ、AⅠ、AⅡ4種親本各30尾，兩兩（即NⅠ×AⅠ、NⅡ×AⅠ、NⅠ×AⅡ、NⅡ×AⅡ）配組進(jìn)行雜交，分開(kāi)飼養(yǎng)，直至魚(yú)苗培育至體長(zhǎng)4 cm以上。使用型號(hào)為HS5900LF的電子標(biāo)記槍，將每尾親本打上編號(hào)，2013年4—6月開(kāi)始第1次試驗(yàn)，使用電子檢驗(yàn)器準(zhǔn)確找回第1次試驗(yàn)的1對(duì)1親本組合，并于2013年8—10月重復(fù)驗(yàn)證第1次試驗(yàn)。

分別對(duì)各試驗(yàn)組奧尼苗種進(jìn)行雄性檢驗(yàn)并統(tǒng)計(jì)雄性率。

1.2.3數(shù)據(jù)處理采用Excel、SPASS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）”表示。在單因子方差分析（ANOVA）基礎(chǔ)上采用t檢驗(yàn)分析比較，取95%置信度（P<0.05）或99%置信度（P<0.01）。

2結(jié)果與分析

2.1雄性率

由表1可見(jiàn)，2次制種，NⅠ×AⅠ組合的雄性率分別為94.5%、92.0%，均最高且較穩(wěn)定；NⅡ×AⅠ組合分別為915%、92.8%，次之；再次是NⅡ×AⅡ組合，分別為846%、83.5%；NⅠ×AⅡ組合分別為76.0%、79.0%。在2次制種中，以?shī)WⅠ為父本的雜交組合均產(chǎn)生了雄性率接近100.0%的奧尼雜交子代，NⅠ×AⅠ組合第1次制種的1個(gè)試驗(yàn)組中也產(chǎn)生了100.0%的高雄性率的子代。經(jīng)過(guò)方差分析與Duncans多重比較，NⅠ×AⅠ與NⅡ×AⅠ組合的雄性率顯著高于NⅡ×AⅡ、NⅠ×AⅡ組合（P<0.05）。

2.2生長(zhǎng)比較試驗(yàn)

由表2絕對(duì)生長(zhǎng)率結(jié)果可知，NⅡ×AⅠ組合生長(zhǎng)最快，NⅠ×AⅠ組合次之，NⅠ×AⅡ、NⅡ×AⅡ組合最慢。2次制種中，NⅠ×AⅠ、NⅡ×AⅠ組合的絕對(duì)生長(zhǎng)率分別為0.36、036，0.40、0.37，均最高且較穩(wěn)定，顯著高于NⅠ×AⅡ組合的0.28、0.26、NⅡ×AⅡ組合的0.23、0.28（P<0.05）。試驗(yàn)結(jié)果表明，NⅠ×AⅠ、NⅡ×AⅠ組合奧尼雜交魚(yú)子代的絕對(duì)生長(zhǎng)率顯著高于NⅡ×AⅡ、NⅠ×AⅡ組合（P<0.05）。

2.3早期成活率

由表3可見(jiàn)，NⅠ×AⅠ存活率最高，NⅡ×AⅠ、NⅡ×AⅡ組合次之，NⅠ×AⅡ組合最低。2次制種中，NⅠ×AⅠ、NⅡ×AⅠ組合的早期成活率均最高且較穩(wěn)定，分別為8504%、88.31%，86.47%、84.54%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于NⅠ×AⅡ組合的7748%、76.99%，NⅡ×AⅡ組合的76.97%、76.07%。經(jīng)過(guò)方差分析與Duncans多重比較，NⅠ×AⅠ、NⅡ×AⅠ組合早期成活率顯著高于NⅡ×AⅡ、NⅠ×AⅡ組合（P<005）。

3討論

3.1奧尼魚(yú)雄性率的穩(wěn)定性問(wèn)題

從本研究可以看出，雄性率表現(xiàn)比較穩(wěn)定。同一批制種、同一組合的不同重復(fù)間，或同一組合、同一重復(fù)的2次制種間，子代雄性率的差異不大，其中更穩(wěn)定的是NⅠ×AⅠ組合，其子代雄性率基本都在93%左右。這與筆者之前進(jìn)行親本的純度驗(yàn)證結(jié)果相似。越來(lái)越多的試驗(yàn)證明，除了性染色體外，常染色體、環(huán)境因子等其他隨機(jī)因素對(duì)羅非魚(yú)的性別形成也有影響。然而，奧尼魚(yú)雄性率的波動(dòng)究竟是由環(huán)境因子還是遺傳因子引起，尚無(wú)明確的解釋，生產(chǎn)上多歸因于種質(zhì)不純。但是同一批魚(yú)在不同的環(huán)境條件下，性別比也會(huì)發(fā)生變化，不排除環(huán)境因子與遺傳表達(dá)存在著交互聯(lián)系，溫度、基因型對(duì)羅非魚(yú)性別控制有交互影響[9-11]，從遺傳-環(huán)境的交互作用解釋奧尼魚(yú)雄性率不穩(wěn)定的問(wèn)題可能更為合理。

值得注意的是，Tuan等用泰國(guó)品系尼羅羅非魚(yú)95個(gè)家系（1雌1雄配對(duì)）正常交配得到子代7 822尾，其總體雄性率為50.5%[12]；然而，各個(gè)家系間子代性別比波動(dòng)很大（155%～100.0%），其中有51個(gè)（53.7%）家系子代的性別比經(jīng)卡方檢驗(yàn)與1 ∶ 1有顯著差異，有5個(gè)家系還出現(xiàn)了近乎全雌或全雄的極端的性別比。這些結(jié)果說(shuō)明，即使在同一品系內(nèi)，羅非魚(yú)的性別決定也存在不穩(wěn)定性。因此，在選擇生產(chǎn)奧尼魚(yú)的親本時(shí)，僅選到品系的水平是不夠的，還應(yīng)進(jìn)一步在品種內(nèi)建立純系。同時(shí)，研究遺傳-環(huán)境互作因子對(duì)雜交魚(yú)性別的影響，有可能成為提高雜交魚(yú)雄性率穩(wěn)定性的重要途徑。由本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，以AⅠ作為父本的雜交后代雄性率明顯高于以AⅡ作為父本的雜交后代雄性率，因此可以推斷AⅠ純度較高。

3.2奧尼魚(yú)雄性率與早期成活率關(guān)系

在生產(chǎn)實(shí)際中很難確定遺傳因子、環(huán)境因子在哪個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)性別起到?jīng)Q定作用，但是可以通過(guò)雜交子代的雄性率、成活率以及親本出苗數(shù)的不同來(lái)分析性別差異的原因[5，10]。因此設(shè)計(jì)雜交魚(yú)早期成活率這一指標(biāo)，考察20～35日齡的雜交魚(yú)苗的平均成活率。這段時(shí)間正是羅非魚(yú)性別分化階段，早期成活率的高低在某種意義上反映羅非魚(yú)在該階段生理代謝的穩(wěn)定性。生理代謝穩(wěn)定，則成活率高，羅非魚(yú)性別分化受到的干擾也少，性別決定越穩(wěn)定。如NⅠ×AⅠ組合的雄性率最高，早期成活率也最高；NⅠ×AⅡ組合的雄性率最低，早期成

活率也最低。從某種角度反映了魚(yú)苗成活率與雄性率存在一定關(guān)系，與Tuan等研究的結(jié)果[12]基本一致。

3.3對(duì)親本的評(píng)價(jià)

從分析結(jié)果可知，NⅠ×AⅠ組合子代的雄性率穩(wěn)定在93%左右，且成活率、生長(zhǎng)率也較好，顯然是目前生產(chǎn)奧尼魚(yú)較理想的親本組合。在NⅡ×AⅠ組合的2次制種中均出現(xiàn)了98%及以上的高雄性率，表明NⅡ×AⅠ的高雄特征是可能出現(xiàn)并予以保持的。另外，NⅠ×AⅠ組合的第1次制種中也出現(xiàn)了100.0%的高雄性率。這些均表明，以AⅠ羅非魚(yú)為父本有生產(chǎn)高雄性雜交魚(yú)的較大潛力；而且，相對(duì)于NⅠ來(lái)說(shuō)，以NⅡ?yàn)槟副荆梢垣@得較高的雄性率以及生長(zhǎng)率，因此筆者推薦NⅠ×AⅠ組合，也就是符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的組合。

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