牛皰疹病毒—4對(duì)牛繁殖的影響綜述

劉蘭泉

摘要：牛皰疹病毒-4（BoHV-4）是丙型皰疹病毒科的新成員，對(duì)奶牛血管內(nèi)皮細(xì)胞、乳腺組織、子宮內(nèi)膜、胎兒組織均有很強(qiáng)的親和力，對(duì)牛的繁殖機(jī)能具有不同程度的影響。綜述BoHV-4對(duì)牛繁殖的影響，旨在為其致病機(jī)理的研究提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：牛皰疹病毒-4；繁殖；影響

中圖分類號(hào)： S852.65+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）05-0311-02

牛皰疹病毒-4（Bovine herpesvirus，BoHV-4）是導(dǎo)致牛生殖障礙的主要病毒之一，該病毒在細(xì)胞中的培養(yǎng)和生長特性（宿主范圍窄、復(fù)制周期長等）與巨細(xì)胞病毒（CMV）相似，感染組織培養(yǎng)細(xì)胞后均形成高密度包涵體和巨細(xì)胞，因此被歸入乙型皰疹病毒亞科[1]。BHV-4具有皰疹病毒共有的一般形態(tài)特征，病毒粒子直徑約為150 nm，有囊膜核衣殼，呈立體對(duì)稱的正20面體。該病毒對(duì)乙醚、氯仿、丙酮等脂溶劑均很敏感[1]。目前，BoHV-4可感染牛、綿羊、山羊、豚鼠、貓、獅子等[2]，導(dǎo)致其生殖障礙。

1BoHV-4的病毒生物學(xué)

BoHV-4主要在黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，通過被感染的單核細(xì)胞在生物體內(nèi)傳播。在感染的急性階段，病毒主要在血液淋巴細(xì)胞內(nèi)增殖；感染后7～8周，病毒的增殖速度最快[3]。該病毒對(duì)子宮內(nèi)膜和內(nèi)皮細(xì)胞具有顯著的親和力，并以此方式侵入各種組織和器官。BoHV-4不僅感染子宮和乳腺，在脾臟、膀胱、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)節(jié)、肝臟、肺臟、鼻腔黏膜、淋巴結(jié)、胸腺、扁桃體、小腸中也可分離到[4]。BoHV-4對(duì)分裂細(xì)胞的親和力較高，可穿過胎盤屏障在胎兒內(nèi)大量復(fù)制。首次感染后，病毒潛伏在淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞內(nèi)，建立潛伏感染，病毒復(fù)制可被應(yīng)激或地塞米松治療重新激活[5]。

2BoHV-4的流行病學(xué)

1963年，Bartha等首次從患有呼吸系統(tǒng)疾病和結(jié)膜炎的犢牛體內(nèi)分離到BoHV-4[6]；此后，很多國家相繼分離到該病毒。在全球動(dòng)物中，BoHV-4血清陽性率為4.2%～30.0%[7]，在某些豬群的發(fā)病率甚至高達(dá)80%。動(dòng)物的年齡顯著影響其血清陽性率，于2～3歲后急劇升高。野生動(dòng)物似乎不參與BoHV-4的傳播[8]。

3BoHV-4的致病性

BoHV-4已被發(fā)現(xiàn)與多種疾病直接相關(guān)，如腹膜炎、不孕、流產(chǎn)、子宮炎、陰道炎、睪丸炎、乳腺炎、腹瀉（與隱孢子蟲有關(guān)）、新生兒猝死、肺炎、小牛眼部疾病、腦炎、皮膚損傷、滑膜炎、蹄葉炎[9]，但在健康動(dòng)物體內(nèi)也能分離到該病毒。模型試驗(yàn)表明，接種BoHV-4后妊娠雌性發(fā)展為陰道炎、子宮內(nèi)膜炎或流產(chǎn)；與此相反，試驗(yàn)感染牛通常無癥狀或僅有輕微的臨床癥狀。BoHV-4可與其他傳染因子協(xié)同致病，感染BoHV-4的病例中75%已被鑒定出含有細(xì)菌、真菌或其他病毒?；诹餍胁W(xué)觀察BoHV-4對(duì)生殖的影響，與健康動(dòng)物相比，患子宮炎的動(dòng)物具有更高的血清陽性率、流產(chǎn)及不育癥發(fā)病概率[10]。

3.1子宮炎

BoHV-4在子宮內(nèi)膜細(xì)胞中復(fù)制會(huì)引起細(xì)胞病變效應(yīng)[2]，在患有子宮炎（定義為子宮內(nèi)感染，發(fā)生于產(chǎn)犢后 21 d）、子宮內(nèi)膜癌的動(dòng)物體內(nèi)，以及被感染動(dòng)物的陰道、子宮、腹膜液、血液中均可分離到BoHV-4。生殖器液體病毒排出可能在產(chǎn)后持續(xù)長達(dá)21 d。在子宮內(nèi)膜炎（定義為產(chǎn)后子宮炎癥超過21 d，對(duì)健康不產(chǎn)生任何影響）病例體內(nèi)也分離到了該病毒[11]。在疾病的急性期，32%～86%的奶牛體內(nèi)檢測不到BoHV-4抗體。在牛場，患嚴(yán)重子宮炎的母牛體內(nèi)可分離到BoHV-4，藥物治療后癥狀并無緩解。經(jīng)產(chǎn)母牛中子宮炎的患病率可達(dá)到59%。Wellemans等報(bào)道，牛人工感染BoHV-4后死亡率很高，10頭感染牛中4頭于病毒攻擊后17～72 d死亡[12]。

BoHV-4也可在健康無癥狀的動(dòng)物生殖器樣品中檢測到。BoHV-4在產(chǎn)犢時(shí)被重新激活，可能與血液中的高皮質(zhì)醇水平及該時(shí)期的各種應(yīng)激有關(guān)。此外，在患有子宮炎動(dòng)物的子宮液中分離到BoHV-4后，還分離到了化膿隱秘桿菌、大腸桿菌、鏈球菌屬、檸檬酸桿菌屬等細(xì)菌。在感染BoHV-4 的22頭患有子宮炎的病牛中，19頭同時(shí)分離到了細(xì)菌和 BoHV-4[12]。子宮內(nèi)同時(shí)分離出的致病菌、BoHV-4以及試驗(yàn)接種的有限成功病例表明，BoHV-4感染是細(xì)菌發(fā)展的誘發(fā)因素。BoHV-4現(xiàn)已被認(rèn)為是產(chǎn)后子宮炎癥發(fā)展的輔助因子。牛產(chǎn)犢后，子宮腔被大腸桿菌、化膿性鏈球菌等環(huán)境中的細(xì)菌短暫污染，這些細(xì)菌通過TLR受體被子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞識(shí)別，誘導(dǎo)炎癥性細(xì)胞因子的合成。這些細(xì)胞因子招募巨噬細(xì)胞等多形核細(xì)胞，從血液進(jìn)入子宮內(nèi)膜間質(zhì)層。在慢性感染的動(dòng)物體內(nèi)，巨噬細(xì)胞是BoHV-4定居的部位，因此也被招募進(jìn)入已發(fā)炎的子宮壁。生長于子宮內(nèi)的細(xì)菌所產(chǎn)生的炎性分子激活了病毒復(fù)制，病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)導(dǎo)致子宮內(nèi)膜細(xì)胞被感染和溶解[13]。BoHV-4通過2條途徑增加了炎癥的嚴(yán)重程度，即LPS刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子，在子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞活化NF-kB途徑，增強(qiáng)了BoHV-4的復(fù)制和IL-8的產(chǎn)生；病毒復(fù)制也能誘導(dǎo)IL-8的合成，IL-8會(huì)促進(jìn)子宮腔內(nèi)白細(xì)胞的滲出[14-15]。IL-8是最有效的中性粒細(xì)胞趨化及活化因子。TNFα和IL-8促進(jìn)中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的組織損傷，刺激中性粒細(xì)胞的脫顆粒和脂質(zhì)代謝，以及活性氧和蛋白酶的胞外釋放。單純試驗(yàn)接種BoHV-4一般只引起輕微癥狀，這可能與細(xì)菌和高血皮質(zhì)醇水平對(duì)產(chǎn)犢過程中BoHV-4復(fù)制的影響有關(guān)[13]。

3.2流產(chǎn)

部分流行病學(xué)資料可表明BoHV-4與奶牛流產(chǎn)的關(guān)系。在比利時(shí)，有流產(chǎn)史奶牛的BoHV-4血清陽性率（17.2%）顯著高于健康奶牛（10.0%）[16]。感染BoHV-4已被證明是流產(chǎn)的危險(xiǎn)因素[17]，該病毒主要存在于流產(chǎn)胎兒的脾淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞中，偶爾在肝枯否氏細(xì)胞、腎小管中被發(fā)現(xiàn)，并被證明在胎盤上皮內(nèi)復(fù)制，除了引起胎盤炎性浸潤外沒有任何特征性組織學(xué)病變。BoHV-4通過破壞胎盤細(xì)胞引發(fā)胎盤炎癥，改變與妊娠有關(guān)的免疫平衡，導(dǎo)致動(dòng)物流產(chǎn)[18]。

3.3不孕不育

血清BoHV-4陽性率高的牛大多發(fā)生不孕，69%的母牛檢測到BoHV-4抗體，人工授精3～14次后僅有44%的奶牛受孕[19]。據(jù)報(bào)道，屠宰場中不育母牛子宮內(nèi)的BoHV-4檢出率為87%[10]。

3.4胚胎移植

建立胚胎移植可預(yù)防牛感染BoHV-4。BoHV-4緊密附著于透明帶上，不會(huì)感染胚胎細(xì)胞，除非透明帶斷裂。體外產(chǎn)生的胚胎即時(shí)孵化后很難感染BoHV-4，而13%的胚泡細(xì)胞在相似條件下會(huì)感染BoHV-1。可見，無論在體內(nèi)或體外，BoHV-4均不會(huì)對(duì)胚胎發(fā)育造成風(fēng)險(xiǎn)[20]。

3.5公牛生殖器疾病

比利時(shí)學(xué)者首次從患有無精癥睪丸炎的公牛體內(nèi)分離到BoHV-4。該病毒可潛伏在睪丸和單核細(xì)胞內(nèi)，被重新激活后通過鼻和眼部排泄，因此精子成為病毒傳播的潛在載體[21]。

3.6乳腺疾病

在臨床或亞臨床乳腺炎病例中已分離到BoHV-4，甚至在健康牛的乳汁中也分離到了該病毒。然而，在患有臨床型乳房炎牛所產(chǎn)的牛奶中，該病毒含量比健康牛所產(chǎn)牛奶高 6.4%。據(jù)Kalman等報(bào)道，93%的亞臨床乳房炎奶牛排泄BoHV-4，而健康奶牛僅為6%[22]。該病毒存在于乳腺細(xì)胞和乳腺組織中。在子宮內(nèi)膜、乳腺上皮細(xì)胞中，BoHV-4入侵與細(xì)胞變性、脫落、化膿性炎癥有關(guān)。該病毒已在乳腺膿皰性皮炎、乳腺慢性潰瘍性皮炎的皮膚中被發(fā)現(xiàn)[17]。

BoHV-4對(duì)乳腺的致病作用尚不明確。單個(gè)乳房內(nèi)接種病毒（連同鼻內(nèi)接種）引起的亞臨床乳房炎占感染者的50%，但并未引起臨床型乳房炎。金黃色葡萄球菌、乳房鏈球菌等乳腺內(nèi)細(xì)菌的感染，會(huì)引起病毒在乳腺免疫細(xì)胞、乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞內(nèi)激活和復(fù)制。該病毒還可增加初始細(xì)菌性乳腺炎的嚴(yán)重程度和持續(xù)時(shí)間。病毒通過免疫抑制作用（感染單核細(xì)胞）及破壞血管內(nèi)皮導(dǎo)致乳腺炎的發(fā)展。在乳腺中與子宮中相似，BoHV-4不是主要的致病因子[17]，只會(huì)引發(fā)亞臨床型乳房炎。

4結(jié)論

BoHV-4廣泛存在于牛體內(nèi)，致病力有限，但其連同細(xì)菌感染會(huì)加劇子宮、陰道、乳腺的某些臨床疾病。迄今尚無BoHV-4的可用疫苗，針對(duì)該病毒的治療方法僅包括支持療法和控制細(xì)菌生長繁殖。盡管BoHV-4可導(dǎo)致奶牛致死性子宮炎，但其致病機(jī)理尚不明確，有待進(jìn)一步研究。

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