陰溝腸桿菌的臨床分離及耐藥性分析

黃新明，高緒鋒，馮忠偉，侯永彬，強(qiáng)雪芹，胡禮儀△

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)附屬六安醫(yī)院檢驗(yàn)科　237005；2.安徽省淮南市東方醫(yī)院檢驗(yàn)科　232000；3.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院檢驗(yàn)科　402160)

陰溝腸桿菌的臨床分離及耐藥性分析

黃新明1，高緒鋒1，馮忠偉2，侯永彬3，強(qiáng)雪芹3，胡禮儀3△

(1.安徽醫(yī)科大學(xué)附屬六安醫(yī)院檢驗(yàn)科237005；2.安徽省淮南市東方醫(yī)院檢驗(yàn)科232000；3.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院檢驗(yàn)科402160)

目的了解六安地區(qū)陰溝腸桿菌的臨床分布及其對(duì)常用抗菌藥物的藥敏情況，為臨床抗感染治療提供依據(jù)。方法采用常規(guī)方法分離并收集439株陰溝腸桿菌，Vitek-2全自動(dòng)微生物分析儀檢測(cè)其對(duì)12種抗菌藥物的敏感情況，并進(jìn)行分析。結(jié)果陰溝腸桿菌的臨床分布以呼吸道為主，在分離出的439株細(xì)菌中，來源于痰液標(biāo)本285株(64.9%)，分泌物標(biāo)本99株(22.6%)，尿液標(biāo)本30株(6.8%),其他標(biāo)本25株(5.7%)。在藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果中，敏感率排在前3位的抗菌藥物分別為美洛培南(96.3%)、阿米卡星(92.9%)、左氧氟沙星(79.7%)；陰溝腸桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率最高的是阿莫西林/克拉維酸，耐藥率為94.9%，其次是氨芐西林，耐藥率為92.8%。結(jié)論陰溝腸桿菌對(duì)多種抗菌藥物均有不同程度的耐藥，碳青霉烯類抗菌藥物對(duì)該菌具有極高的抗菌活性，可作為治療該菌較嚴(yán)重感染的首選藥物。

陰溝腸桿菌；抗菌藥物；耐藥性

陰溝腸桿菌是常見的條件致病菌之一，也是院內(nèi)感染的重要致病菌，它的常見感染部位為呼吸道、泌尿道等。隨著廣譜抗菌藥物及免疫抑制劑的大量、不合理使用，陰溝腸桿菌的耐藥情況日趨嚴(yán)重[1-2]。故了解其對(duì)藥物的敏感率和耐藥率，對(duì)探討其耐藥機(jī)制具有重要意義，也可為該菌的臨床治療提供依據(jù)。筆者對(duì)安徽醫(yī)科大學(xué)附屬六安醫(yī)院臨床標(biāo)本分離到的439株陰溝腸桿菌及其對(duì)臨床常用抗菌藥物的耐藥性進(jìn)行了回顧性分析，并提出防治對(duì)策。現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1菌株來源本院2014年1～12月住院患者的各類標(biāo)本中分離出的陰溝腸桿菌439株，排除同一患者的同一菌株。

1.2儀器與試劑試驗(yàn)所用的Vitek-2全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏儀、GNI+鑒定卡、GNS藥敏試驗(yàn)卡等均為法國(guó)生物梅里埃公司的產(chǎn)品，藥敏紙片由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。

1.3菌株鑒定嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》及Vitek-2全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏儀操作說明進(jìn)行，各種標(biāo)本常規(guī)接種培養(yǎng)、分離、純化，以GNI+鑒定卡進(jìn)行細(xì)菌鑒定。

1.4藥敏試驗(yàn)藥物敏感試驗(yàn)采用GNS藥敏試驗(yàn)卡進(jìn)行檢測(cè)?？咕幬锇ò逼S西林(AMP)、哌拉西林(PIP)、環(huán)丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、慶大霉素(GEN)、妥布霉素(TOB)、頭孢吡肟(FEP)、頭孢他啶(CAZ)、頭孢呋辛(CXM)、亞胺培南(IMP)、美洛培南(MEM)、四環(huán)素(TCY)、阿米卡星(AMK)、復(fù)方磺胺甲噁唑(SXT)、阿莫西林/克拉維酸(AMC)、替卡西林/克拉維酸(TCC)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)，共17種。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC25922，金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC25923，銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC27853。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

2.1陰溝腸桿菌的臨床標(biāo)本來源分布陰溝腸桿菌的臨床分布以呼吸道標(biāo)本為主，在分離出的439株細(xì)菌中，來源于痰液標(biāo)本285株(64.9%)，分泌物標(biāo)本99株(22.6%)，尿液標(biāo)本30株(6.8%),其他標(biāo)本25株(5.7%)。

2.2陰溝腸桿菌的耐藥性分析陰溝腸桿菌對(duì)17種臨床常見抗菌藥物的耐藥性見表1。該菌對(duì)所測(cè)試的17種抗菌藥物均有不同程度的耐藥，敏感率排在前三位的是MEM(96.3%)、AMK(92.9%)、LVX(79.7%)；陰溝腸桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率最高的是AMC，耐藥率為94.9%，其次是AMP，耐藥率為92.8%。

表1　陰溝腸桿菌對(duì)抗菌藥物的敏感情況(n=439，%)

3討論

陰溝腸桿菌屬于腸桿菌科腸桿菌屬，營(yíng)養(yǎng)要求不高，具有周鞭毛、動(dòng)力陽(yáng)性、兼性厭氧等特征，廣泛存在于水、土壤等外界環(huán)境和人、動(dòng)物腸道中,在機(jī)體免疫力低下，或異位寄生、侵入時(shí)便可引發(fā)感染，是引起醫(yī)院感染較為常見的條件致病菌之一。隨著免疫抑制劑、廣譜抗菌藥物、腫瘤藥物等的大量使用,各種侵襲性診療手段的普遍應(yīng)用，以及頭孢菌素類抗菌藥物對(duì)腸桿菌屬細(xì)菌產(chǎn)生的AmpC酶不穩(wěn)定等多種因素，導(dǎo)致陰溝腸桿菌已成為院內(nèi)感染的主要病原體之一。李美等[3]分析了2008～2012年臨床分離陰溝腸桿菌的分布及耐藥性，陰溝腸桿菌在醫(yī)院感染菌中占第六位。另外甘泳江等[4]對(duì)2001～2010年臨床分離陰溝腸桿菌的分布及耐藥性變遷進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示陰溝腸桿菌占全部病原菌的6%～9%。這使臨床抗感染治療面臨潛在的威脅。

相關(guān)研究均顯示，陰溝腸桿菌的檢出率及其耐藥率有逐年上升的趨勢(shì)[3-4]。本院病歷資料顯示陰溝腸桿菌感染者多見于機(jī)體抵抗力下降的昏迷患者、重癥患者、老年人及術(shù)后應(yīng)用大量抗菌藥物、免疫抑制劑、激素等進(jìn)行治療的患者，這些患者常引起合并感染，導(dǎo)致陰溝腸桿菌的感染率升高。本研究顯示，17種抗菌藥物進(jìn)行的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果中，敏感率排在前三位的抗菌藥物分別為MEM(96.3%)、AMK(92.9%)、LVX(79.7%)，與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[5-7]，由此提示在臨床抗感染治療中，可將這3種藥物作為經(jīng)驗(yàn)用藥的首選藥物。陰溝腸桿菌對(duì)LAZ、頭孢噻肟、頭孢曲松等第3代頭孢菌素的耐藥率相對(duì)較高，這與第3代頭孢菌素的廣泛應(yīng)用密切相關(guān)。陰溝腸桿菌的耐藥性主要由可誘導(dǎo)的染色體Ⅰ型酶(AmpC酶)介導(dǎo)產(chǎn)生[8]，第3代頭孢菌素的廣泛使用，足以使陰溝腸桿菌高產(chǎn)AmpC酶而引起耐藥。另外，陰溝腸桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率最高的是阿莫西林/克拉維酸，耐藥率為94.9%，其次是AMP，耐藥率也高達(dá)92.8%，由此可見陰溝腸桿菌對(duì)這些藥物的抗菌活性非常低，臨床上不考慮使用它作為其抗感染治療的藥物。

本研究結(jié)果還顯示，碳青霉烯類抗菌藥物對(duì)陰溝腸桿菌的抗菌活性相對(duì)較強(qiáng)。雖然碳青霉烯類抗菌藥物仍然保持其較高的抗菌活性，但是由于其應(yīng)用增加而出現(xiàn)了耐藥菌株，這可能與碳青霉烯酶的產(chǎn)生及外膜蛋白缺失等有關(guān)[9-10]，這也提醒臨床醫(yī)務(wù)工作者應(yīng)對(duì)碳青霉烯類耐藥菌株應(yīng)引起足夠重視。另外，由于碳青霉烯類抗菌藥物是產(chǎn)生頭孢菌素酶的強(qiáng)誘導(dǎo)劑，可能導(dǎo)致陰溝腸桿菌對(duì)頭孢菌素類的耐藥，因此應(yīng)該把碳青霉烯類抗菌藥物作為特殊使用的抗菌藥物，醫(yī)院對(duì)其使用必須進(jìn)行嚴(yán)格審批和管理。雖然出現(xiàn)了不同程度的耐藥，但它仍然是目前抗菌活性較強(qiáng)的藥物，建議臨床上可以作為多重耐藥菌株感染的首選藥物。

陰溝腸桿菌已成為院內(nèi)感染的主要病原菌，且其耐藥機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，因此陰溝腸桿菌的耐藥現(xiàn)象絕不可忽視，應(yīng)密切監(jiān)視耐藥菌株的流行情況，嚴(yán)格合理地使用廣譜抗菌藥物，早期防止院內(nèi)感染，減少耐藥菌株的出現(xiàn)。對(duì)于陰溝腸桿菌感染，臨床在進(jìn)行抭感染治療時(shí)應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥物，定期輪換使用不同的抗菌藥物或采用聯(lián)合用藥方式，以避免產(chǎn)生BushⅠ(AmpC)型β-內(nèi)酰胺酶及其突變菌株與多重耐藥菌株。

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2016-01-28修回日期：2016-03-18)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.12.035

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1673-4130(2016)12-1684-02

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