皮脂、馬拉色菌檢測有助于頭皮白屑風辨證分型

章曉鷹，徐平，張慧敏（上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院，上海　201203）

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皮脂、馬拉色菌檢測有助于頭皮白屑風辨證分型

章曉鷹，徐平，張慧敏
（上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院，上海201203）

摘要：目的建立有助于頭皮白屑風辨證分型的客觀化檢測指標，并探討頭皮白屑風病因病機。方法根據中醫(yī)辨證分型將白屑風患者分為血熱風燥型（26例）與腸胃濕熱型（51例），15例正常人群作為對照組。馬拉色菌采用巢式聚合酶鏈反應（PCR）方法進行檢測；皮脂含量采用油脂檢測儀檢測；紅斑采用紅斑評分標準進行評分。結果腸胃濕熱組皮脂含量為50.55±19.00，高于血熱風燥組（20.08±7.96）與正常組（19.40±11.34），差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；腸胃濕熱組球形、限制型馬拉色菌感染率分別為68.63%、94.12%、高于血熱風燥組（34.62%、61.54%）與正常組（33.33%、60.00%），差異同樣具有統(tǒng)計學意義。結論皮脂與馬拉色菌檢測可以作為頭皮白屑風辨證分型的輔助檢測指標。

關鍵詞：頭皮白屑風；辨證分型；馬拉色菌；皮脂

白屑風是一種多發(fā)于皮脂溢出區(qū)的慢性、復發(fā)性炎癥性皮膚病，是皮膚科常見疾病。皮損發(fā)生于頭部的稱為頭部白屑風，其特點是皮膚潮紅、脫屑、自覺瘙癢，因其有白屑脫落，故而得名。該疾病相當于西醫(yī)的脂溢性皮炎，由于現(xiàn)代醫(yī)學對脂溢性皮炎發(fā)病機制尚未完全明確，且中醫(yī)對頭皮白屑風的辨證分型也缺乏客觀性檢測指標，為此，我們分析比較了血熱風燥組與腸胃濕熱組皮脂含量、馬拉色菌檢出率及其紅斑評分，旨在探討有助于頭皮白屑風辨證分型的客觀化檢測指標。

1　資料與方法

1.1入選標準頭皮脂溢性皮炎性患者77例（男57例，女20例，年齡18～55歲）診斷標準參照《臨床皮膚病學》，輕型損害為片狀灰白色糠秕狀鱗屑，基底稍紅，輕度瘙癢；重者表現(xiàn)為油膩性鱗屑性地圖狀斑片，可伴有滲出和厚痂；嚴重病例全頭部被覆有油膩性厚痂，并可有臭味［1］，所有患者未內服皮質類固醇激素或抗組胺類等藥物，也未外用皮質類激素，并以15例正常人群（男5例，女10例）為對照組?；颊吲c正常對照者評價前72 h內禁止洗發(fā)。

1.2中醫(yī)白屑風診斷標準

1.2.1中醫(yī)診斷標準參照國家中醫(yī)藥管理局《中醫(yī)病證診斷療效標準·面游風》［2］和《中醫(yī)外科學》［3］擬定：主要表現(xiàn)皮損處多為淡紅色或黃紅色如錢幣樣斑塊，上覆有油膩性鱗屑或痂皮；干性多見干燥脫屑斑塊；自覺瘙癢；排除其他頭部皮膚疾患，如銀屑病、濕疹等。

1.2.2中醫(yī)證型診斷標準

1.2.2.1血熱風燥證淡紅色斑片，干燥、脫屑、瘙癢，舌質偏紅，苔薄白，脈細數。

1.2.2.2腸胃濕熱證潮紅斑片，有油膩性痂屑，甚至糜爛、滲出、舌質紅，苔黃膩，脈滑數。

1.3紅斑評分標準在頭皮23個區(qū)域中［4］，即以頭頂（旋風）及頭的頂點做一連線將頭皮分為左右兩區(qū)；以耳尖及頭的頂點做一連線；從目的中心向后做一平行于矢狀面的連線；以兩耳后面兩點及兩耳前發(fā)際最低點垂直向上7 cm處分別做一平行于冠狀面的連線；連接頭頂（旋風）與耳朵后面；以兩耳前發(fā)際最低點向后2 cm處做一平行于前額發(fā)際的連線，按孫龍紅斑評分標準［5］：無可見紅斑為0分；部分可見的淡紅斑為1分；部分可見的濃紅斑或全體均一淡紅斑為2分；全體均一可見濃紅斑為3分，最高69分。

1.4皮脂含量測定控制環(huán)境溫度20～25℃，相對濕度60%?；颊哂谄ぶ瑴y定前3 h內不進行劇烈運動，無顯性出汗，并于實驗室靜坐20 min。采用SEBUMETER SM815測量儀（德國COURAGE&KHA ZAKA公司）進行檢測。測試部位為癥狀部位，測試時剪發(fā)7mm×7mm，測試深度為1μm，在測量部位按壓30s后讀數。多個癥狀部位時取最高測定值記錄。

1.5馬拉色菌檢測

1.5.1標本采集OpSite Transparent Dressing Tap透明膠帶（美國3M）黏貼于3個固定部位頭皮并收集溶于0.5 mL的裂解液 ［50 mmol/L Tris-HCl（pH：8.0），25 mmol/L EDTA，0.2%SDS，200 mmol/L NaCl］，水浴56℃，30min，直至組織完全溶解。

1.5.2引物設計按參考文獻［6］設計第一輪所有7種馬拉色菌共同引物與第二輪7種馬拉色菌分型引物。

1.5.3巢式聚合酶鏈反應（PCR）檢測馬拉色菌反應條件與擴增條件

1.5.3.1第一輪PCR①PCR反應條件：2×PCR buffer 25μL（含dNTP、Taq酶等），10μmol/L的上游引物與下游引物各2.5 μL（終濃度為500 nmol/L），DNA模板20μL，總體積為50μL。②PCR擴增條件：標本先經95℃預變性5 min，1個循環(huán)；95℃變性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸50 s，共20個循環(huán)。最后，72℃終延伸5 min，1個循環(huán)。

1.5.3.2第二輪PCR①PCR反應條件：2×PCR buffer 25 μL（含dNTP、Taq酶等），10 μmol/L的上游引物與下游引物各2.5 μL（終濃度為500 nmol/L），DNA模板2 μL，補充水至18 μL，總體積為50 μL。②PCR擴增條件：同上。

1.6統(tǒng)計學方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件，各組間馬拉色菌陽性率比較用χ2檢驗；正態(tài)分布定量資料采用均數±標準差（±s）表示，非正態(tài)分布采用中Sebum位數（M）、百分位數P25和P75表示。正態(tài)分布多組間采用方差分析，再進行LSD比較，非正態(tài)分布多組間比較采用非參數秩和（kruskal-wallis）檢驗后，再進行Mann-Whitney檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

1.2.1正常組、血熱風燥組與腸胃濕熱組皮脂、紅斑比較腸胃濕熱組皮脂明顯多于血熱風燥組與正常組（P＜0.01），而正常組與血熱風燥組則差異無統(tǒng)計學意義。腸胃濕熱組與血熱風燥組紅斑相比，差異無統(tǒng)計學意義，但均高于正常組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1　3組皮脂、紅斑比較

表2　正常組、血熱風燥組與腸胃濕熱組各種類型馬拉色菌檢出率比較　例（%）

1.2.23組馬拉色菌檢出率比較腸胃濕熱組球型與限制型馬拉色菌檢出率明顯高于正常組與血熱風燥組，差異且具有統(tǒng)計學意義，而正常組與血熱風燥組差異則無統(tǒng)計學意義。見表2。

3　討論

頭皮白屑風主要特征為皮膚潮紅、脫屑、自覺瘙癢。因其有白屑脫落，故而得名，與現(xiàn)代醫(yī)學的脂溢性皮炎相接近，雖然脂溢性皮炎發(fā)病機制尚未完全闡明，并且，馬拉色菌感染與疾病關聯(lián)性也存在著爭議，但許多研究還是認為馬拉色菌感染可能是脂溢性皮炎或其頭屑增多的主要因素之一［7］，皮脂分泌增加，個體頭皮防御能力差異以及對馬拉色菌等真菌產生的不同程度炎癥反應［8］與角質細胞的異常增生［9］都決定了脂溢性皮炎的不同表現(xiàn)類型。

中醫(yī)學將頭皮白屑風分為血熱風燥型和胃腸濕熱型［10］。血熱風燥型系素體陰血虧虛，加之風邪入毛孔，郁久生燥，肌膚失養(yǎng)所致，主要強調體質之內因為虛為主，虛實夾雜，而實驗數據也提示：血熱風燥型雖然馬拉色菌感染率及頭皮脂含量與常人相近，但卻出現(xiàn)脫屑增多、紅斑、瘙癢等炎癥癥狀，其主要原因可能為此類患者頭皮防御功能下降或角質細胞功能異常、老化所致的頭皮炎癥反應；而腸胃濕熱型則為恣食肥甘油膩、辛辣制品，以致脾胃運化失常，化濕生熱，濕熱蘊阻肌膚而成，多反映了內邪與外邪交阻而致，實驗數據也表明該類患者特點為頭皮脂分泌旺盛，助長了馬拉色菌大量繁殖，由此出現(xiàn)了油膩性脫屑、紅斑、瘙癢等一系列頭皮炎癥癥狀。

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Detection of Sebum and Malassezia are Helpful for Dialectical Classification of Head Seborrheasicca

ZHANG Xiaoying，XU Ping，ZHANG huimin
Shanghai University of Traditional Chinese Medical Attached ShuguangHospital，Shanghai 201203，China

Abstract:ObjectiveIn order to establish the objective detection index for dialectical classification of （head seborrheasicca and to explore the etiology and pathogenesis of this diseases.MethodsAccording to standard clinical diagnosis of Chinese medicine，patients with head seborrheasicca were divided into blood-heat wind-dryness group（26 cases）and stomach and intestine-heat and moist group（51 cases），15 healthy subjects were taken as control group.Malassezia were detected by nested-PCR，erythema was evaluated by standard erythema score method and sebum was detected by sebum detector meter.Results Sebum was significantly higher in stomach and intestine-heat and moist group（50.55±19.00）than those in blood-heat wind-dryness group（20.08±7.96）and healthy groups（19.40±11.34，P＜0.01）.Infection rate of M.restricta and M.globosa in stomach and intestine-heat and moist group were 68.63%and 94.12%，which were also significantly higher than those in blood-heat wind-dryness group （34.62%、61.54%）and healthy groups（33.33%、60.00%）.ConclusionThe detection of sebum and Malassezia may be helpful for dialectical classification ofhead seborrheasicca.

Key words:Head seborrheasicca；Dialectical classification；Malassezia；

中圖分類號：R758.7

文獻標識碼：A

文章編號：1672-0709（2016）01-0025-03

通信作者：張慧敏，E-mail：happy2003_1@msn.com

收稿日期：（2015-01-21）