系統(tǒng)性紅斑狼瘡中醫(yī)證型與IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的相關性研究

宮澤琨，張峻嶺（.天津市兒童醫(yī)院，天津　30034；天津市中醫(yī)藥研究院，天津　3000）

?

系統(tǒng)性紅斑狼瘡中醫(yī)證型與IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的相關性研究

宮澤琨1，張峻嶺2
（1.天津市兒童醫(yī)院，天津300134；2天津市中醫(yī)藥研究院，天津300120）

摘要：目的觀察系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）各中醫(yī)證型患者外周血清中γ-干擾素（IFN-γ）、白細胞介素（IL）-2、IL-4、IL-10的水平，以探求SLE中醫(yī)辨證分型的客觀化參考指標。方法根據(jù)中醫(yī)辨證將SLE分為4種證型，氣血熱盛型、脾腎陽虛型、氣陰兩虛血瘀型和氣滯血瘀肝郁型，采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心（ELISA）法，檢測并比較不同證型SLE患者及正常對照組血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平的差異。結果SLE患者外周血清IFN-γ、IL-4、IL-10的水平高于正常對照組（P＜0.01），IL-2的水平低于正常對照組（P＜0.01）；從氣血熱盛型、脾腎陽虛型、氣陰兩虛血瘀型到氣滯血瘀肝郁型IFN-γ、IL-4、IL-10的水平依次遞減，IL-2為依次遞增，其中氣血熱盛型、脾腎陽虛型與氣陰兩虛血瘀型和氣滯血瘀肝郁型相比，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。結論血清中IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-2水平可作為SLE中醫(yī)辨證分型的客觀化參考指標。

關鍵詞：系統(tǒng)性紅斑狼瘡；辨證分型；干擾素-γ；白細胞介素-2；白細胞介素-4；白細胞介素-10

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種與多種因素有關的嚴重危害健康的自身免疫性疾病。對此病采用中醫(yī)辨證治療，具有一定的優(yōu)勢和獨特的效果。傳統(tǒng)的中醫(yī)辨證主要靠望、聞、問、切采集臨床資料，客觀指標少，定量指標缺如，重復性差。近年來許多學者已研究發(fā)現(xiàn)一些實驗室檢查指標與“證”有某種內在關聯(lián)，可以為臨床辨證提供客觀依據(jù)，輔助指導臨床治療。本研究觀察不同證型SLE患者和正常對照組血清中γ-干擾素（IFN-γ）、白細胞介素（IL）-2、IL-4、IL-10的水平變化，研究這4種細胞因子與SLE辨證分型的關系，為證的實質研究提供微觀化、客觀化指標，從而更好地指導臨床治療。

1　資料與方法

1.1臨床資料

1.1.1診斷標準按照美國風濕病學會1997年修訂的SLE分類標準［1］。

1.1.2病例選擇①診斷符合1997年美國風濕病協(xié)會修訂的SLE診斷標準，近3個月內均未系統(tǒng)應用糖皮質激素、免疫抑制劑治療。②無合并其他結締組織疾病或伴結核、慢性活動性肝炎、心血管、腦血管、肝、腎或造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病、精神病患者。③簽署知情同意書，并獲得倫理委員會批準。

1.1.3中醫(yī)辨證分型參照衛(wèi)生部頒布的SLE分型診斷標準［2］，以及《中西醫(yī)結合皮膚病學》有關標準［3］，結合臨床所見，將SLE辨證分為4種證型：①氣血熱盛型：證見高熱發(fā)斑，口渴欲飲，煩躁不安，面紅尿赤，脈洪滑弦而有力，舌質絳紅，苔黃燥或白干，相當于急性系統(tǒng)性紅斑狼瘡。②氣陰兩虛血瘀型：證見倦怠無力，心慌氣短，五心煩熱，長期低熱，面色潮紅而有暗紫色斑片，盜汗自汗，腰膝酸痛，脈沉細數(shù)而無力，舌質紅紫，舌光無苔或呈黃苔，相當于亞急性系統(tǒng)性紅斑狼瘡。③氣滯血瘀肝郁型：證見低熱綿綿，口苦納呆，兩脅脹痛，月經提前，經血暗紫帶塊，煩躁易怒，盤狀紅斑或疹色暗紫，遇日光加重，脈弦，舌質暗紫或有瘀斑。④脾腎陽虛型：證見面色蒼白，全身浮腫，形寒肢冷，氣短乏力，腹脹納少，腰腿酸痛，脈沉細，舌淡，瘦小或有齒痕。尿中長期蛋白尿及紅白細胞，具有腎病綜合征樣的改變。

1.1.4臨床資料76例SLE患者，其中女72例，男4例，均為2006年7月—2007年9月天津市長征醫(yī)院門診及住院病人。年齡12～70歲，平均（33.52± 12.36）歲。76例SLE患者中，氣血熱盛型10例，氣陰兩虛血瘀型28例，氣滯血瘀肝郁型19例，脾腎陽虛型19例。選取健康查體者26例作為對照組，其中女24例，男2例，年齡10～69歲，平均（34.76± 10.32）歲。各組年齡、性別、病程比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2方法采集受檢者外周靜脈血5 mL，分離血清后-80℃保存。IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10試劑盒采用天津市宇基醫(yī)療技術有限公司進口分裝產品。實驗方法為雙抗體夾心ELISA法，均嚴格按照說明書操作。酶標儀SPECTRA-Ⅲ為奧地利TECAN公司生產。

2　結果

2.1SLE患者組與對照組血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平SLE患者組4個因子的血清水平與正常對照組相比差異均有統(tǒng)計學意義（除IL-2降低外其余為升高），差別有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），見表1。

表1　2組血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平（±s，pg/mL）

表1　2組血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平（±s，pg/mL）

注：SLE患者組、正常對照組間比較P＜0.01。

組別　n　IFN-γ　IL-2　IL-4　IL-10 SLE組　76　53.23±11.52　44.12±10.05 67.30±13.72 50.38±5.59正常組　26　27.8±5.63　89.63±15.23 33.23±7.49　26.67±6.32

2.2SLE中醫(yī)辨證分型各組間IFN-γ、IL-2、IL-4、 IL-10水平①血清IFN-γ濃度：氣血熱盛型、脾腎陽虛型明顯高于氣陰兩虛血瘀型與氣滯血瘀肝郁型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；氣血熱盛型與脾腎陽虛型相比無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；氣陰兩虛血瘀型與氣滯血瘀肝郁型差異亦無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。②血清IL-2濃度：氣血熱盛型、脾腎陽虛型明顯低于氣陰兩虛血瘀型與氣滯血瘀肝郁型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；氣血熱盛型與脾腎陽虛型相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；氣滯血瘀肝郁型明顯高于其他3型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或P＜0.05）。③血清IL-4濃度：氣血熱盛型、脾腎陽虛型明顯高于氣陰兩虛血瘀型與氣滯血瘀肝郁型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；氣血熱盛型與脾腎陽虛型相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；氣滯血瘀肝郁型明顯低于其他3型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。④血清IL-10濃度：氣血熱盛型、脾腎陽虛型明顯高于氣陰兩虛血瘀型與氣滯血瘀肝郁型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；氣血熱盛型與脾腎陽虛型相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；氣滯血瘀肝郁型明顯低于其他3型，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01或P＜0.05），見表2。

表2　SLE中醫(yī)辨證分型組間血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平?。ā纒）（pg/mL）

表2　SLE中醫(yī)辨證分型組間血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平?。ā纒）（pg/mL）

組別　n　IFN-γ　IL-2　IL-4　IL-10氣血熱盛型　10 77.56±10.62 21.32±4.65 103.20±15.5664.06±4.59脾腎陽虛型　19 70.38±14.80 25.10±6.07　92.70±19.8361.17±6.33氣陰兩虛血瘀型 28 38.20±9.80　47.42±15.57 50.27±13.3044.30±4.98氣滯血瘀肝郁型 19 39.65±9.36　55.63±15.23 42.58±7.35 42.35±5.82

3　討論

研究發(fā)現(xiàn)，SLE存在多種細胞因子的異常，在其發(fā)病及病程轉歸中起重要作用。細胞因子分泌和復雜網(wǎng)絡的調控異常在SLE免疫紊亂發(fā)生和病理損傷中起著重要作用［4-5］。IFN-γ是一重要的Th1細胞因子，IFN-γ是由活化的T淋巴細胞和巨噬細胞產生和分泌的?？苫罨奘杉毎?，促使其吞噬活性增強并參與遲發(fā)型超敏反應形成，協(xié)同IL-2促進細胞毒性T細胞殺傷功能；同時IFN-γ可提高單核細胞MHCⅠ類和Ⅱ類分子的表達，增加自身抗原的遞呈，促進T細胞對自身抗原的免疫反應［6-7］。此外，有研究報道IFN-γ在自身免疫性腎炎的發(fā)展中起關鍵性作用，可加速狼瘡性小鼠腎小球腎炎的發(fā)展，介導過強的免疫反應［8-9］。

IL-2也是一種Th1細胞因子，IL-2作為一種免疫增強因子參與機體的免疫調節(jié)，其誘導的免疫細胞增殖反應是整個免疫應答過程中的關鍵階段。研究表明，處于疾病活動期的病人有50%在血清中測到高水平IL-2。但也有人認為活動期SLE患者血清中IL-2低于正常人，對此，有觀點認為在SLE患者血清中細胞因子存在動態(tài)變化。本研究中SLE患者IL-2水平的降低可能跟下列3種因素有關：①Th2因子對Th1因子的抑制；②SLE患者自身的免疫缺陷；③T細胞呈現(xiàn)低反應性，IL-2分泌減少。

IL-4是一種重要的Th2細胞因子，促進Th0細胞向Th2型細胞轉化，促進B細胞增殖產生抗體，誘導高水平的IgE、IgG產生，也可拮抗Th1細胞活性，抑制Th1細胞因子的產生。IL-4通過與白細胞介素4受體（IL-4R）結合發(fā)揮多樣生物學活性［10］。Th2細胞分化途徑仍不是很清楚，但不容置疑的是IL-4能誘導Th2細胞的分化，Th2細胞反過來再產生IL-4，促進SLE患者的自身抗體的免疫應答反應，加重SLE的病理損傷［11］。

IL-10是Th2型細胞分泌的一種多功能性細胞因子，是具有免疫刺激、免疫抑制和抗炎活性的免疫調節(jié)分子。有學者推測IL-10在SLE中作用是促進B細胞的分化和產生自身抗體［12］。IL-10增高會導致患者體內抗體產生水平增高，或者通過細胞因子之間及其受體作用調節(jié)刺激B細胞增生并促進其合成IgG，導致SLE患者免疫球蛋白分泌增多［13］。在本次研究中，SLE患者血清IL-10濃度與正常對照組相比明顯升高，差別有統(tǒng)計學意義，也與國內外其他報道相一致［14］。

筆者發(fā)現(xiàn)SLE患者存在Th1/Th2細胞因子表達異常，但未明確顯示哪類因子占優(yōu)勢。上述細胞因子的分泌異常導致SLE患者免疫紊亂進而造成病理損傷。其原因可能是氣血熱盛型與脾腎陽虛型多為疾病的急性期或者活動期，且脾腎陽虛型多有腎臟損害，而氣陰兩虛血瘀型和氣滯血瘀肝郁型多處于病情相對穩(wěn)定期，因此氣血熱盛型、脾腎陽虛型上述指標明顯高于（或者低于）氣陰兩虛型和氣滯血瘀肝郁型，這與“證是機體在疾病發(fā)展過程中某一階段的病理概況，與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關”的含義是一致的。所以，高濃度的血清IFN-γ、IL-4、IL-10（或低濃度IL-2）水平可作為氣血熱盛型、脾腎陽虛型辨證指標之一；而且IL-2、IL-4、IL-10 3個因子的水平氣滯血瘀肝郁型與其他3型相比差異有統(tǒng)計學意義，對辨證有一定參考價值。在中西醫(yī)結合診療SLE過程中，除了臨床表現(xiàn)和細胞因子水平以外，還要結合臨床其他一些生化和免疫學指標，如血沉、抗核抗體、免疫球蛋白、血清補體水平等指標，宏觀和微觀結合，精確規(guī)范辨證，有助于使中醫(yī)辨證更加客觀。

參考文獻：

［1］張學軍.皮膚性病學［M］.6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004，1143-1144.

［2］中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.系統(tǒng)性紅斑狼瘡辨證標準［J］.臨床薈萃，1990，5（增刊）：67.

［3］邊天羽，俞錫純.中西醫(yī)結合皮膚病學［M］.天津：天津科學技術出版社，1987：306-307.

［4］程肪，徐滬濟，嚴安定，等.輔助性T細胞相關細胞因子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿中的變化和意義 ［J］.中華風濕病學雜志，2010，14（5）：196.

［5］張江淮，陳偉，丁瓊，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清TGF-β、IFN-γ、IL-10的檢測意義［J］.安徽醫(yī)學，2010，31（7）：736.

［6］楊佳薈，劉莉，郭品娥，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人外周血Th細胞和Tc細胞IFN-γ及IL-4表達水平與疾病的關系［J］.中國免疫學雜志，2006，22（2）：168-171.

［7］姚煦，李遇梅，胡茲嘉，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者干擾素γ受體基因多態(tài)性研究 ［J］.中華醫(yī)學遺傳學雜志，2005，22（3）：320-323.

［8］曾惠瓊，葉志中，汪迅，等.SLE患者外周血IFN-γ水平與疾病活動性的相關研究［J］.現(xiàn)代免疫學，2007，27（1）：69-71.

［9］盧寶彥，王子娥，劉義慶，等.SLE患者外周血單個核細胞IFN-γ 及IL-10mRNA表達與疾病活動性的相關性 ［J］.山東醫(yī)藥，2008，48（20）：1-2.

［10］姚煦，李遇梅，胡茲嘉，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者白細胞介素-4受體基因多態(tài)性的研究［J］.中華風濕病學雜志，2005，9（7）：385-388.

［11］鄒吉敏，袁寶軍，苗麗娟，等.SLE患者血清IL-4、IL-10的檢測及意義［J］.中國煤炭工業(yè)醫(yī)學雜志，2006，9（2）：178-179.

［12］Groux H，Cottrez F.The complex role of interleukin-10 in autoimmunity［J］.J Autoimmun，2003，20：281.

［13］Filiatreau S，Sweenie CH，Mcgeachy MJ，et al.B-cells regulate autoimmunity by provision of IL-10［J］.Nat Immunol，2002，3：944-950.

［14］李薇，肖影輝，王曉東，等.SLE患者血清IL-10、IL-18檢測及臨床意義［J］.新醫(yī)學，2012，42（3）：6.

Relationships Between Traditional Chinese Medical Syndrome Types and Interferon-γ，Interleukin-2，Interleukin-4 and Interleukin-10 in Systemic Lupus Erythematosus

GONG Zekun1，ZHANG Junling2
1.Tianjin Children'sHospital，Tianjin 300134，China；2.Tianjin Academy of Traditional Chinese Medicine Affiliated Hospital，Tianjin 300120，China

Abstract:ObjectiveIn order to explore the levels of serum interferon-γ（IFN-γ），interleukin（IL）-2，IL-4 and IL-10 in systemic lupus erythematosus（SLE）patients of various Chinese medicine syndrome types in order to seek the objective indices for syndrome differentiation of SLE.MethodsSLE patients were sorted into four syndrome types by Chinese medicine syndrome differentiation，i.e.Qi Xue Re Sheng Xing（QXRSX），Pi Shen Yang Xu Xing（PSYXX），Qi Yin Liang Xu Xue Yu Xing （QYLXXYX），and Qi Zhi Xue Yu Gan Yu Xing（QZXYGYX）.The levels of serum IFN-γ，IL-2，IL-4 and IL-10 were detected by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）.ResultsThe levels of serum IFN-γ，IL-4 and IL-10 of all SLE patients were significantly higher than those in the normal control group（P＜0.01），the levels of serum IL-2 of all SLE patients were lower than those in the normal control group（P＜0.01）.The levels of serum IFN-γ，IL-4，IL-10 in different syndrome types decreased in order of type QXRSX to PSYXX to QYLXXYX to QZXYGYX（but IL-2 was increasing）.Compared to QXRSX，PSYXX and QYLXXYX，QZXYGXY there were significant differences（P＜0.01）.ConclusionThe levels of serum IFN-γ，IL-2，IL-4 and IL-10 could be taken as the objective indicesfor reference in syndrome differentiation of SLE.

Key words:Systemiclupuserythematosus；Syndromedifferentiation；Interferon-γ；Interleukin-2；Interleukin-4；Interleukin-10

中圖分類號：R593.24+1

文獻標識碼：A

文章編號：1672-0709（2016）01-0010-03

基金項目：天津市衛(wèi)生局中醫(yī)、中西醫(yī)結合科研基金資助項目（No.200029）

通信作者：張峻嶺，E-mail：13920301679@126.com

收稿日期：（2015-07-06）