B族溶血性鏈球菌（GBS）感染對妊娠結(jié)局的影響

趙小婭　謝月英　周旭麗　謝綱　文佳　洪威

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B族溶血性鏈球菌（GBS）感染對妊娠結(jié)局的影響

趙小婭★謝月英周旭麗謝綱文佳洪威

［摘要］目的探討妊娠晚期孕婦產(chǎn)前篩查B族溶血性鏈球菌（group B Streptococcus，GBS）感染的臨床價值及對妊娠結(jié)局的影響。方法以2014年1月至2014年12月在本院產(chǎn)科門診就診的4 091例妊娠晚期孕婦為研究對象，采用實時熒光定量PCR（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測是否感染GBS，以檢測結(jié)果為陽性的孕婦為GBS陽性組，共225例，按1∶1比例在檢測結(jié)果為陰性孕婦中隨機抽取225例作為陰性組，隨訪該2組孕婦的妊娠結(jié)局。結(jié)果4 091例孕婦GBS陽性檢出率為5.4%（225/4 091）。GBS陽性組與陰性組比較，發(fā)生胎膜早破［20.4%（46/ 225）和11.1%（25/225）］、宮內(nèi)感染［19.1%（43/225）和7.5%（17/225）］、新生兒感染［11.5%（26/225）和5.7% （13/225）］概率均明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。早產(chǎn)和難產(chǎn)發(fā)生率在GBS陽性和陰性孕婦中比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論GBS感染會明顯增加胎膜早破、宮內(nèi)感染及新生兒感染的發(fā)生率，對妊娠結(jié)局造成不良影響，應(yīng)對孕晚期孕婦常規(guī)進(jìn)行GBS篩查。

［關(guān)鍵詞］B族溶血性鏈球菌；實時熒光定量PCR；感染；妊娠結(jié)局；新生兒

★通訊作者：趙小婭，E-mail：364973677@qq.com

B族溶血性鏈球菌（group B Streptococcus，GBS）是孕婦生殖道感染的重要致病菌，20世紀(jì)70年代起，GBS被證實為新生兒及孕婦感染的主要原因［1-2］。正是由于GBS感染的嚴(yán)峻性，1990年美國疾病控制中心制定了GBS篩查和處理指南，美國婦產(chǎn)科協(xié)會、美國兒科協(xié)會建議對孕35～37周孕婦進(jìn)行GBS產(chǎn)前檢測，可有效降低新生兒早期敗血癥感染率達(dá)80%左右［3］。此觀點漸漸引起了我國圍生醫(yī)學(xué)研究者的高度重視。自2014年起，本院采用實時熒光定量PCR技術(shù)（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTPCR）對晚期孕婦進(jìn)行GBS感染檢測，旨在探討妊娠晚期GBS帶菌狀況及其對妊娠結(jié)局的影響，現(xiàn)報道如下：

1　資料與方法

1.1一般資料

2014年1月至2014年12月在本院產(chǎn)科門診自愿接受GBS產(chǎn)前篩查的4 091例孕婦，年齡20～41歲，平均年齡28.1歲，孕34～39周，平均孕35.6周，一個月內(nèi)未使用抗生素。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集

采集前先擦去外陰過多分泌物，將一根無菌棉拭子置孕婦陰道內(nèi)旋轉(zhuǎn)一周采集陰道下1/3的分泌物；再將另一根棉拭子置入肛門，在肛門括約肌上2～3 cm處輕輕取得直腸分泌物。標(biāo)本置于加蓋無菌試管中送檢。

1.2.2檢測方法

GBS RT-PCR檢測試劑由福建泰普生物科學(xué)有限公司提供，熒光定量PCR儀為美國ABI公司7300Rt-PCR儀，按照B族鏈球菌抗酸檢測試劑盒進(jìn)行檢測主要步驟如下：（1）樣本前處理：在取樣拭子管中加入1 mL B族鏈球菌檢測清洗液，用震蕩器高速震蕩2 min制成標(biāo)本懸浮液；取出全部樣品放入1.5 mL離心管中，13 000 rpm離心5 min棄上清，加入1 mL B族鏈球菌檢測清洗液；震蕩重懸，13 000 rpm離心5 min棄上清；（2）核酸提?。撼恋碛?0 μL清洗緩沖液重懸；加入提取固形物，高速渦旋震蕩5 min破碎細(xì)胞。95℃干浴2 min，立即冰浴2～5 min，13 000 rpm離心1 min，上清液用于PCR擴(kuò)增。樣本檢測的其余操作步驟和PCR反應(yīng)條件按照說明書進(jìn)行。

1.2.3診斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）宮內(nèi)感染：產(chǎn)時產(chǎn)婦發(fā)熱、體溫≥38℃；產(chǎn)婦脈搏＞100次/min；胎兒心動過速，胎心率持續(xù)＞160次/min，孕婦末梢血白細(xì)胞計數(shù)＞15.0×109/L，中性粒細(xì)胞比例明顯增高；子宮壓痛；羊水有臭味，符合以上任何2項者診為宮內(nèi)感染［4］。（2）新生兒感染：孕婦有宮內(nèi)感染、胎膜早破等高危因素，新生兒體溫升高及體溫不升，膚色蒼白，精神萎靡，拒奶、嘔吐等臨床表現(xiàn)，末梢血白細(xì)胞計數(shù)＞25.0× 109/L。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

所有資料應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1妊娠晚期孕婦GBS感染率

4091例孕檢孕婦中，GBS陽性225例，陽性率為5.4%，部分樣本實時熒光定量PCR擴(kuò)增結(jié)果見圖1。

2.2妊娠婦女的一般情況

檢測結(jié)果陽性孕婦作為GBS陽性組，共225例，按1∶1比例在檢測結(jié)果為陰性孕婦中隨機抽取225例作為陰性組。GBS陽性組平均年齡26.9歲，平均孕35.5周；GBS陰性組平均年齡27.3歲，平均孕35.7周，兩組年齡、孕周情況比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具體結(jié)果見表1。

2.3GBS陽性組和陰性組孕婦的妊娠結(jié)局

GBS陽性組對用藥顧慮未予抗生素干預(yù)治療。GBS陽性組孕婦胎膜早破、宮內(nèi)感染及新生兒感染率發(fā)生率較陰性組明顯增高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而兩組孕婦早產(chǎn)、難產(chǎn)發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果詳見表2。

3　討論

GBS是一種革蘭氏陽性鏈球菌，寄居于陰道和直腸，20世紀(jì)60年代首次發(fā)現(xiàn)其可以導(dǎo)致嚴(yán)重的新生兒感染，隨后進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)GBS在圍產(chǎn)期感染中是第一位的致病菌，可以導(dǎo)致圍產(chǎn)兒死亡［5］，同時可以明顯增加宮內(nèi)感染的發(fā)生率，給母兒預(yù)后造成嚴(yán)重威脅。西方國家一直以來對其非常重視，美國疾病控制中心制訂的GBS篩查和處理指南［5］已經(jīng)很大程度上減少了圍產(chǎn)期B族鏈球菌感染的發(fā)生率和危害。對于妊娠孕婦GBS帶菌率文獻(xiàn)報道各不相同，孕期GBS感染率在東西方國家一直存在較大差異，以美國及北歐為首的發(fā)達(dá)國家中，GBS幾乎成為圍產(chǎn)期感染的主要致病菌，感染率為5%～35%［6］，另有研究報道為10%～30%［6-7］。

表1　2組妊娠婦女的一般情況Table 1　Information for the 2 groups of pregnant women

表2　GBS陽性與陰性組孕婦妊娠結(jié)局比較Table 2　Comparison of the outcomes between the GBS-positive and GBS-negative cases

我國目前產(chǎn)婦GBS帶菌情況尚不作為常規(guī)檢查，也無大標(biāo)本的流行病學(xué)資料，但有條件的地區(qū)已經(jīng)在做篩查和診斷性檢查。馬延敏等［8］報道北京地區(qū)孕婦GBS感染率為11.07%；陳慧慧等［9］檢測上海地區(qū)992名孕婦帶菌率為3.70%，黃永健等［10］報道江西地區(qū)孕婦GBS感染率為8.76%。本研究采用RT-PCR對4 091例晚孕期孕婦進(jìn)行檢測，GBS感染率為5.4%，稍高于陳慧慧等的報道，但低于全國其他地區(qū)的報道。孕婦的GBS帶菌率受很多因素影響，如檢測方法，以往常用的篩查方法是細(xì)菌培養(yǎng)，但是細(xì)菌培養(yǎng)耗時長，假陽性率高。另外，陰道菌種和菌落的可變性。例如，35周或更早的檢查結(jié)果是陰性，但在分娩前可出現(xiàn)GBS感染。同時，不同人群由于社會經(jīng)濟(jì)和衛(wèi)生保健水平的不同，孕婦GBS帶菌率也會存在較大差異。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GBS陽性組妊娠晚期孕婦發(fā)生胎膜早破、宮內(nèi)感染概率明顯增高，這是由于GBS可上行感染胎膜，通過炎癥細(xì)胞的吞噬作用及細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白水解酶的直接侵襲，使胎膜局部張力減少，從而導(dǎo)致胎膜早破，病原微生物可上行入侵宮腔，引起羊水、胎膜、胎盤感染，即宮內(nèi)感染。同時，GBS感染也將增加新生兒感染的風(fēng)險，這與其他研究者［8-9］的報道相符。本研究中早產(chǎn)的發(fā)生率陽性組稍高于陰性組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能與取樣孕周定在35周以后，已將大部分早產(chǎn)排除在外，同時也可能與樣本量少有關(guān)。近年來，RT-PCR因靈敏性和特異性高、穩(wěn)定、及時、檢測時間短，操作方便等優(yōu)勢，已成為臨床篩查GBS的熱門方法［11］。然而，在妊娠期孕婦GBS篩查之后預(yù)防性治療方面還存在較多問題，有報道指出孕婦產(chǎn)時應(yīng)使用預(yù)防抗生素以應(yīng)對新生兒GBS感染［12］。但事實上盡管進(jìn)行預(yù)防性治療防治GBS感染，新生兒發(fā)病率和死亡率仍然很高，包括分娩期抗生素治療實施不當(dāng)、抗生素耐藥等。面對中國龐大的患者群，如何進(jìn)行篩查普及和預(yù)防性的治療，以及如何避免過度治療都是需要慎重考慮的。

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Influence of group B Streptococcus（GBS）infection on pregnancy outcome

ZHAO Xiaoya，XIE Yueying，ZHOU Xuli，XIE Gang，WEN Jia，HONG Wei
（Deparment of Pathology，Xiangtan City Maternal and Child Health-Care Hospital，Xiangtan，Hunan，China，411104）

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the group B Streptococcus（GBS）infection rate in pregnant women during late pregnancy and its influence on pregnancy outcomes.MethodsA total of 4 091 women in later stages of pregnancy who had regular antenatal examinations in the Xiangtan City Maternal and Child Health-Care Hospital were chosen from Jan.2014 to Dec.2014.The method of real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR）was utilized to detect with the presence of GBS.A 1∶1 matching case control study was carried out with 225 pregnant women positive of GBS and 225 women negative of GBS，and the pregnancy outcomes in the 2 groups were followed up.ResultsThe late pregnancy GBS infection ate in 4 091 pregnant women was 5.4%（225/4 091）.Compared with the GBS negative group，the GBS positive group had a higher incidence of premature rupture of membranes［20.4%（46/ 225）vs 1.1%（25/225）］，intrauterine infection［19.1%（43/225）vs 7.5%（17/225）］，neonatal infection ［11.5%（26/225）vs 5.7%（13/225）］，the difference sare statistically significanct（P＜0.05）.There were no statistically significant differences in the premature birth and dystocia（P＞0.05）.ConclusionsMaternal GBS carrier in late gestation are more likely to have adverse pregnancy outcomes due to increased incidences of intrauterine infection，premature rupture of membranes and neonatal infections.It is necessary for women in later stages of pregnancy to take routine screening of GBS infection.

［KEY WORDS］Group B Streptococcus（GBS）；Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR）；Infection；Pregnancy outcome；Neonate

作者單位：湘潭市婦幼保健院病理科，湖南，湘潭411104