TCT技術(shù)聯(lián)合DNA定量分析在宮頸病變篩查中的作用

王俊霞 叢曉慶

山東省榮成市婦幼保健院(264300)

TCT技術(shù)聯(lián)合DNA定量分析在宮頸病變篩查中的作用

王俊霞 叢曉慶

山東省榮成市婦幼保健院(264300)

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅女性的健康[1-2]。宮頸癌的進(jìn)展是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程，而宮頸病變的早發(fā)現(xiàn)、早治療能夠明顯降低死亡率，故對(duì)于宮頸癌和癌前病變進(jìn)行早期篩查和治療有著重要作用[3-5]。本文探討液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)聯(lián)合DNA定量分析在宮頸癌篩查中的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年3月～2015年4月本院婦產(chǎn)科進(jìn)行宮頸檢查婦女，其中行TCT檢查3015例，年齡46.2±14.2(20～73)歲；行DNA定量分析1643例，年齡46.4±14.2(20～79)歲；行TCT聯(lián)合DNA定量分析387例，年齡46.7±15.1(21～80)歲。所有納入研究均詳細(xì)詢問(wèn)其既往史、月經(jīng)史及性生活史等；其中性生活史均為≥1年，期間未使用藥物避孕。

1.2 TCT標(biāo)本采集

非月經(jīng)期且禁性生活3d取材。使用窺陰器暴露宮頸，頸管刷在宮頸口與粘膜交界處旋轉(zhuǎn)5周，停留約20s，收集脫落細(xì)胞， 取樣后將宮頸刷垂直置入盛有Thinprep保存液的小瓶?jī)?nèi)，與宮頸TCT或DNA定量細(xì)胞學(xué)檢查一并送檢。送檢標(biāo)本每例均采用液基薄層制片2張，一張做常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查，一張行Feulgan DNA染色行DNA定量分析。

1.3 DNA定量分析

DNA制成薄層細(xì)胞涂片。判定標(biāo)準(zhǔn)：①未見DNA異倍體細(xì)胞；②可見少量(5%～10%)細(xì)胞增生；③可見少量 (1～2個(gè)異倍體細(xì)胞, DI≥2.5)DNA 倍體異常細(xì)胞；④可見細(xì)胞異常增生(≥10%)；⑤異倍體細(xì)胞≥3個(gè)，DI≥2.5；⑥可見異倍體細(xì)胞峰。①時(shí)判檢測(cè)陰性，④～⑥時(shí)檢測(cè)陽(yáng)性，②、③時(shí)為可疑或少量病變。

1.4 細(xì)胞學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)

TCT參考2004版Bethesda診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：①未見上皮內(nèi)病變或癌變(NILM)；②意義不明確的不典型性鱗狀細(xì)胞(ASC-US)和不典型性鱗狀細(xì)胞不除外高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(ASC- H)；③低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)；④高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)；⑤鱗狀上皮癌(SCC)。ASC-US及其以上病變?yōu)殛?yáng)性。

1.5 宮頸組織病理檢查判讀標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)胞學(xué)檢查為“ASCUS 及以上”、DNA 定量分析為“可疑或陽(yáng)性者”均建議進(jìn)行宮頸活檢組織病理檢查，鱗柱交界區(qū)取組織活檢。參照WHO 病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：正常或炎性改變、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)及浸潤(rùn)性宮頸鱗癌(ISCC)。病變達(dá)CINⅠ及以上為陽(yáng)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用 SPSS19.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以組織病理學(xué)診斷為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算各種檢測(cè)方法的符合率、假陽(yáng)性率、假陰性率、陽(yáng)性符合率、陰性符合率、敏感性、特異性，χ2檢驗(yàn)比較各組檢查結(jié)果的差異，P<0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT檢測(cè)

TCT檢測(cè)的3015例中，異常117例(3.88%)，其中 ASC-US 85例(2.82%)，ASC- H 17例(0.56%)，LSIL 8例(0.27%)，HSIL 7 例(0.23%)。479 例行病理活檢，68例TCT陽(yáng)性者病理診斷為陽(yáng)性35例。假陽(yáng)性率為9.68%(33/431)，假陰性率為27.08%(13/48)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為51.47%(35/68)，陰性預(yù)測(cè)值為96.84%(398/411)。組織病理CINⅠ及以上者共 48例，TCT 檢測(cè)的敏感性為72.92%(35/48)，特異性為92.34%(398/431)。見表1。

2.2 DNA 定量分析

1643例DNA 定量分析中，異常180例(10.96%)，其中可疑88例(5.36%)，陽(yáng)性92例(5.60%)。405例病理活檢中DNA定量陽(yáng)性者118例中病理活檢陽(yáng)性76例。假陽(yáng)性率為13.50%(42/311)，假陰性率為19.15%(18/94)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為64.41%(76/118)，陰性預(yù)測(cè)值為93.73%(269/287)。CINⅠ及以上者共94例，DNA定量的敏感性為80.85%(76/94)，特異性為86.50%(269/311)。見表2 。

表1 TCT檢測(cè)與病理結(jié)果符合情況比較(例)

表2 DNA定量分析與病理結(jié)果符合情況比較(例)

2.3 DNA 定量聯(lián)合TCT檢測(cè)

387例共檢測(cè)出70例陽(yáng)性病例，其中病理檢測(cè)陽(yáng)性64例。假陽(yáng)性率為15.59%(46/295)，假陰性率為3.26%(3/92)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為65.93%(89/135)，陰性預(yù)測(cè)值為98.81%(249/252)。敏感性為92.75%(64/69)，特異性為97.65%(249/255)。見表3。

表3 DNA定量聯(lián)合TCT檢測(cè)與病理結(jié)果符合情況比較(例)

2.4 不同檢測(cè)方法的符合情況

在陽(yáng)性符合率方面，TCT、DNA定量及TCT聯(lián)合DNA定量的符合率分別為51.47%、64.41%、91.43%，各組間比較存在差異(P<0.05)；TCT、DNA定量及TCT聯(lián)合DNA定量的敏感性分別為72.92%、80.85%、92.75%，各組間存在差異(P<0.05)；TCT、DNA定量及TCT聯(lián)合DNA定量的特異性分別為92.34%、86.50%、97.65%，TCT聯(lián)合DNA定量特異性最高(P<0.05)。此外，3種檢測(cè)方法中，假陽(yáng)性率在TCT檢測(cè)中最低，假陰性率在T CT聯(lián)合DNA定量中最低、陰性預(yù)測(cè)值最高(P均<0.05)。TCT檢測(cè)中陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均低于其他兩組(P<0.05)。

3 討論

現(xiàn)代臨床研究表明，宮頸病變是宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素[8-9]。由于國(guó)內(nèi)女性對(duì)宮頸癌的重視程度不高，臨床出現(xiàn)癥狀時(shí)已處于宮頸癌中晚期，很大程度上影響了宮頸癌的治療效果，因此大范圍開展宮頸細(xì)胞學(xué)檢查是篩查及預(yù)防宮頸癌的重要方法[10]。隨著近幾年宮頸細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)的不斷提高，TCT較好的彌補(bǔ)了傳統(tǒng)巴氏涂片檢查中的不足，避免了取材時(shí)細(xì)胞丟失所導(dǎo)致的假陰性，提高了樣本的陽(yáng)性檢出率，其在國(guó)外的使用已較為成熟，國(guó)內(nèi)現(xiàn)處于初步推廣階段[11]。且受限于傳統(tǒng)閱片方式，其正確率與人眼疲勞程度及醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)水平等因素相關(guān)[12]。因而探尋一種高效、簡(jiǎn)單、安全篩查方法對(duì)于開展宮頸癌篩查具有重要意義。

DNA細(xì)胞定量分析技術(shù)采用液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)，通過(guò)測(cè)量細(xì)胞核內(nèi)DNA含量的變化以發(fā)現(xiàn)病變細(xì)胞，并借助計(jì)算機(jī)自動(dòng)掃描技術(shù)，能夠降低制片及閱片中人為因素的影響，保證閱片質(zhì)量，并提供客觀的診斷數(shù)據(jù)。具有準(zhǔn)確度高、敏感性強(qiáng)和重復(fù)性好等特點(diǎn)，在宮頸癌前病變及宮頸癌的診斷中具有良好的診斷價(jià)值[13]。Kuramoto等[14]通過(guò)對(duì)幾種宮頸病變篩查方法的研究顯示，陰道鏡敏感性最高，液基細(xì)胞學(xué)特異性最高。本次研究中， DNA 定量陽(yáng)性符合率為64.41%，敏感性為80.85%，特異性為86.50%；TCT符合率為51.47%，敏感性為72.92%、特異性為92.34%。結(jié)果提示DNA定量分析在診斷宮頸病變及宮頸癌方面具有較高準(zhǔn)確性，漏診率較低，但特異性低于TCT檢查。因此若將二者聯(lián)合應(yīng)用于篩查宮頸病變，對(duì)于提高宮頸病變?cè)缙谠\斷的敏感性和特異性均有一定作用。

相關(guān)文獻(xiàn)顯示，將DNA定量分析聯(lián)合TCT技術(shù)應(yīng)用在宮頸病變篩查的檢出率得到明顯提高[15-16]。本次研究3種檢測(cè)手段中TCT聯(lián)合DNA定量陽(yáng)性符合率和敏感性、特異性均最高，假陰性率最低、陰性預(yù)測(cè)值最高。表明TCT聯(lián)合DNA定量分析可提高宮頸病變檢測(cè)的準(zhǔn)確性，降低漏診率和誤診率，宮頸癌的預(yù)防和治療提供可靠的依據(jù)。

[1] 覃燁, 王紅麗, 任彤. 宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤病變與生殖道感染的相關(guān)性研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2014, 24(4):811-813.

[2] 劉慧強(qiáng). 我國(guó)宮頸癌流行病學(xué)特征和高危因素分析[J]. 中國(guó)婦幼保健,2016,06:1258-1260.

[3] Chambers G, Millan D, Cuschieri K, et al. Assessing the detection of human papillomavirus late mRNA in liquid base cytology samples for risk stratification of cervical disease[J]. J Med Virol, 2014, 86(4):627-633.

[4] 汪志求, 韓光鋒, 段愛(ài)雄. 紫杉醇聯(lián)合順鉑方案同步放化療治療中晚期宮頸癌近期療效觀察[J]. 蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012, 37(9):1048-1050.

[5] 吳秋萍, 葉金艷, 程浩,等. 宮頸癌術(shù)后HPV持續(xù)感染者陰道微生態(tài)狀況分析[J]. 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志, 2015, 27(10):1210-1213.

[6] 蔡玉群, 李薇, 萬(wàn)惠卿,等. 2010～2012年杭州市拱墅區(qū)已婚育齡婦女宮頸癌篩查結(jié)果分析[J]. 中國(guó)腫瘤, 2014, 23(9):752-756.

[7] 陳樂(lè)真. 婦產(chǎn)科診斷病理學(xué)[M]. 人民軍醫(yī)出版社, 2010;235-236.

[8] Ibrahim A, Rasch V, Pukkala E, et al. Cervical cancer, risk factors and feasibility of acetic acid screening method in Sudan[J]. Int J Womens Health, 2011, 3(6):117-22.

[9] Bayo S, Bosch F X, De S S, et al. Risk factors of invasive cervical cancer in Mali.[J]. Int J Epidemiol, 2015, 31(1):202-9.

[10] 盧春茹, 袁會(huì)敏, 孫文娟,等. TCT+HPV DNA檢測(cè)+陰道鏡檢查對(duì)宮頸病變臨床價(jià)值的研究[J]. 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志, 2014, 26(7):839-841.

[11] 張玲,龔平,劉靜,等. 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌患者放化療療效評(píng)估中的應(yīng)用[J]. 山東醫(yī)藥,2016,01:45-46.

[12] 許劍利,徐克惠. 高危型HPV檢測(cè)及TCT檢查在宮頸癌篩查中的應(yīng)用分析[J]. 實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2014,12:946-949.

[13] Nghiem V T, Davies K R, Beck J R, et al. Economic evaluation of DNA ploidy analysis vs liquid-based cytology for cervical screening[J]. Br J Cancer, 2015, 112(12):1951-1957.

[14] Kuramoto H, Iwami Y, Sugimoto N, et al. Application of a new liquid-based procedure (TACAS) for the screening of cervical cancer: a preliminary study.[J]. Acta Cytol, 2012, 56(1):74-9.

[15] 付玉梅, 張曉坤, 梁惠芬,等. HC2-HPV-DNA聯(lián)合TCT篩查宮頸癌早期及癌前病變的臨床分析[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 28(11):1823-1825.

[16] 李敏, 張春梅, 周仕嫻,等. TCT 聯(lián)合DNA 定量分析在宮頸病變篩查中的臨床應(yīng)用[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2015(15):2045-2047.

[責(zé)任編輯：董 琳]

2016-05-17

2016-08-02