離心法和虹吸法制備冷沉淀凝血因子的比較

王振財

（朝陽市中心血站，遼寧 朝陽 122000）

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離心法和虹吸法制備冷沉淀凝血因子的比較

王振財

（朝陽市中心血站，遼寧 朝陽 122000）

【摘要】目的 研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。方法 將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋按照統(tǒng)計學(xué)原理袋數(shù)相同對照組和觀察組。對照組冰凍血漿使用離心法監(jiān)測凝血因子，觀察組冰凍新鮮血漿使用虹吸法進(jìn)行檢測，比較兩種檢測方法結(jié)果。結(jié)果 檢測結(jié)果顯示，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計學(xué)差異（P ＜0.05）；與此同時，離心法檢測制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。結(jié)論 在檢測冷凍血漿凝血因子的時候，采用虹吸方法進(jìn)行制備，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更優(yōu)于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質(zhì)量更值得信賴。

【關(guān)鍵詞】離心法；虹吸法；凝血因子

在醫(yī)學(xué)逐步發(fā)展的過程中，冷沉淀因子制備越來越受到重視，同時臨床使用量也在不斷增多。在治療甲型血友病、纖維蛋白原與血管型血友病方面具有明顯的效果。臨床所指的冷沉淀凝血因子是新鮮冰凍血漿在3 ℃左右融化后產(chǎn)生的血漿冷沉淀蛋白部分而冷上清則是冷沉淀制備過程中應(yīng)當(dāng)去除掉的血漿上清［1］。受到多種因素的影響，Ⅷ因子活性不強(qiáng)，半衰期非常容易失活。因而，選用較為可靠的制備方法非常重要。本文將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對象。研究比較離心法和虹吸法制備冷沉淀對凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纖維蛋白原）含量。

1 資料與方法

1.1 一般資料：將我站2015年1月至2015年6月收集的新鮮冰凍血漿200袋為研究對象。按照統(tǒng)計學(xué)原理袋數(shù)相同對照組和觀察組。兩組新鮮冰凍血漿并存在差異。

1.2 方法。虹吸法：觀察組血漿使用虹吸方法進(jìn)行檢測。將新鮮冰凍的冷凍血漿放置在4T.6C型低溫恒溫循環(huán)水浴槽中，將空聯(lián)袋懸掛在箱的外面，并且要保持兩袋之間有一定的距離。在冰凍新鮮血漿逐漸融化的時候，受到虹吸的作用，融化的血漿會逐漸流向空袋中，隨后就會剩余（42±7）mL的白色結(jié)晶顆粒，而這些就是冷沉淀。在經(jīng)過熱合后將其低溫保存進(jìn)行備用。

離心法：對照組血漿采用離心的方法。將冰凍新鮮血漿放置在4 ℃冰箱中逐漸融化12～15 h。血漿在血漿袋中逐漸融化直至有小冰塊的時候?qū)⑵淙〕?，隨后采用低溫離心。離心操作10 min，離心轉(zhuǎn)速保持每分鐘2500轉(zhuǎn)，溫度控制在2 ℃。使用轉(zhuǎn)移袋經(jīng)過無菌操作后將上層冷上清血漿分出，留下25 mL的血漿進(jìn)行冷沉淀，經(jīng)過熱合后進(jìn)行低溫儲存使用。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析：本次實驗操作中所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)都經(jīng)過SPSS17.0的統(tǒng)計學(xué)處理。采用t檢驗原理來對資料比進(jìn)行分析，產(chǎn)生的數(shù)據(jù)統(tǒng)一用χ2檢驗，檢驗結(jié)果的數(shù)據(jù)P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

見表1。

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結(jié)果比較（±s）

表1 離心法與虹吸法制備冷沉淀凝血因子結(jié)果比較（±s）

離心法　　虹吸法　t　PⅧ因子含量　82.38±2.81　105.97±15.71　17.89　?。?.05 Fbg 含量　149.97±4.12　92.56±3.79　4.25　?。?.05

3 討 論

對臨床診療來說，冷沉淀制品質(zhì)量的優(yōu)劣將直接影響臨床治療效果。因而，在臨床治療的過程中選用合適的制備方法非常重要。從近年來臨床研究比較兩種方法的檢測結(jié)果與分析，就會發(fā)現(xiàn)虹吸制備方法相對比離心制備方法更具有優(yōu)勢。在比較兩種方法檢測指標(biāo)的時候發(fā)現(xiàn)，虹吸法制備的Ⅷ因子含量多余離心法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）；與此同時，離心法制備的Fbg含量均多于虹吸法制備的含量，數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。在分析的時候就會發(fā)現(xiàn)，離心方法制備冷沉淀是制備出速凍的血漿，隨后將新鮮冰凍血漿放到一定溫度范圍的冰箱過夜，在冷沉淀結(jié)晶后，進(jìn)行離心分層。隨后就將血漿排除，剩下的就是結(jié)晶冷沉淀。血站制備冷沉淀的時候使用該種方法的不足之處表現(xiàn)在冰箱內(nèi)溫度并不是恒定不變的，很難保證在制備的過程中，冰箱溫度一直都處于該范圍。溫度不斷波動，促使凝血因子活性降低，致使得出率下降。將冰凍血漿放置在冰箱過夜，時間較長就會有蛋白析出，這樣也會降低凝血因子得出率，同時還會對其活性造成一定影響。而虹吸法制備冷沉淀保證例在恒溫的狀態(tài)下，并且整個融化的過程中保證水分與血漿的充分接觸。CT-4T.6C水浴式低溫融化箱使用獨特循環(huán)水流在保證溫度均勻的情況下，還可以快速溶解。因為冷沉淀會在2～6 ℃會結(jié)晶，析出特性。因而，虹吸法就是利用這一特點，從新鮮冰凍血漿中進(jìn)行提取沉淀。正是基于此，對于析出的沉淀而言，恒定溫度就是關(guān)鍵性的因素。與此同時，由于冷沉淀凝血因子并不是非常的穩(wěn)定。因而在提取的時候時間越短越好［2］。

綜上所述，在制備冷凍血漿凝血因子的時候，采用虹吸方法進(jìn)行制備，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更優(yōu)于離心制備方法。虹吸制備方法操作簡單，受到人為因素比較少，儀器操作少，因而虹吸制備冷沉淀將取代離心方法，質(zhì)量更值得信賴。

參考文獻(xiàn)

［1］ 徐利強(qiáng)，李建，周忠英，等.冷沉淀凝血因子制備工藝改良［J］.中國生化藥物雜志，2011，32（12）:145-146.

［2］ 楊江存，理芒會，于青，等.新鮮冰凍血漿融化后不同放置時間凝血因子的變化［J］.中國輸血雜志，2013，18（22）:211-212.

中圖分類號：R457.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）02-0031-01