黑木耳菌糠添加量對猴頭菇生物學(xué)特性及農(nóng)藝性狀的影響

張 鑫，楊邵俊，王世偉，宋宇航，鄭鋒美，唐玉琴

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林吉林132101）

黑木耳菌糠添加量對猴頭菇生物學(xué)特性及農(nóng)藝性狀的影響

張 鑫，楊邵俊，王世偉，宋宇航，鄭鋒美，唐玉琴＊

（吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，吉林吉林132101）

為尋求在猴頭菇生產(chǎn)過程中黑木耳菌糠的最佳添加量，降低猴頭菇生產(chǎn)成本和實現(xiàn)菌糠資源的有效利用，以猴頭菇基礎(chǔ)培養(yǎng)基為對照，設(shè)置4個黑木耳菌糠添加量的配方，研究不同木耳菌糠添加量對猴頭菇母種、二級種菌絲體生物學(xué)特性及農(nóng)藝性狀的影響。結(jié)果表明：促進(jìn)猴頭菇母種和二級種菌絲生長的黑木耳菌糠最佳添加量分別為50g／1 000mL和20%，該條件下，猴頭菇母種和二級種的菌絲生長速度最快，分別為4.17mm／d和2.812 0mm／d，菌絲長勢粗壯且濃密；提高猴頭菇農(nóng)藝性狀的黑木耳菌糠最佳添加量為25%，該條件下，菌袋的平均產(chǎn)量為218.4g，生物轉(zhuǎn)化率為54.60%，子實體直徑6.11cm，顏色潔白，菌刺密集。

菌糠；猴頭菇；生物學(xué)特性；農(nóng)藝性狀

猴頭菇〔Hericium erinaceus（Rull ex F.）Pers〕，隸屬擔(dān)子菌綱，多孔菌目，猴頭菌科，猴頭菌屬［1］。又名猴頭菌、刺猬菌、花菜菌和山伏菌等。猴頭菇營養(yǎng)豐富，每100g干品中含蛋白質(zhì)26.3g，在蛋白質(zhì)中含有16種氨基酸，包括人體必須的8種氨基酸［2］。猴頭菇是重要的食藥用菌，大量藥理學(xué)和醫(yī)學(xué)研究表明，猴頭菇具有利五臟助消化并對胃潰瘍、消化道腫瘤和腹脹胃炎等有一定療效，具有較強的免疫調(diào)節(jié)作用及抗氧化、耐缺氧、耐氧化等功能［37］。所以猴頭菇具有較大的開發(fā)價值。但猴頭菇的主要栽培方式是以木屑為主的代料栽培，需要耗費大量木材。目前，環(huán)境惡化加劇，為實現(xiàn)生態(tài)經(jīng)濟(jì)循環(huán)和可持續(xù)發(fā)展，尋找猴頭菇栽培料中木屑的替代物具有重要意義。我國是黑木耳的主產(chǎn)國，每年都會產(chǎn)生大量的黑木耳菌糠。菌糠中含有多種有機(jī)成分如粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、無氮浸出物、磷、鈣等［8］，但目前黑木耳菌糠主要用于燃燒，其次作為飼料［9］，未得到有效利用，既造成資源浪費又污染環(huán)境。因此，黑木耳菌糠的再利用是黑木耳產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展亟待解決的問題。為降低猴頭菇生產(chǎn)成本，實現(xiàn)菌糠資源的有效利用，筆者研究黑木耳菌糠對猴頭菇不同生長階段菌絲體生物學(xué)特性及農(nóng)藝性狀的影響，以期為黑木耳菌糠栽培猴頭菇提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

猴頭菇菌種：吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院食用菌實驗室保藏。供試菌糠：吉林省吉林市旺起鎮(zhèn)黑木耳基地。

儀器設(shè)備：生化培養(yǎng)箱HPS－280（哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司），高壓蒸汽滅菌器MLS－3751L－PC（松下健康醫(yī)療器械株式會社），超凈工作臺SJ－CJ－2FQ（新苗醫(yī)療器械制造有限公司），粉碎機(jī)，裝袋機(jī)和電子天平（普利賽斯ES225SM－DR）等。

試劑及培養(yǎng)基：瓊脂（AR）、葡萄糖（AR）、純凈水、石膏粉（市售）、麩皮（市售）和玉米芯（市售）。

PDA配方［10］：馬鈴薯200g，瓊脂20g，葡萄糖20g，水1 000mL。

猴頭菇二級種基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方［11］：玉米芯78%、米糠20%、糖1%、石膏粉1%。

1.2 黑木耳菌糠預(yù)處理

將挑選出的無污染、無病蟲害的黑木耳菌糠去袋、粉碎機(jī)粉碎置于有陽光的空曠處曬至水分蒸發(fā)，儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 菌種活化

將猴頭菇母種菌絲體接種于PDA斜面培養(yǎng)基中，25℃培養(yǎng)2周，活化備用。

1.4 菌種的制備

將已活化菌種接種于直徑為90mm的平板培養(yǎng)基（15mL PDA）中，25℃培養(yǎng)2周。在超凈工作臺中，用0.8mm無菌打孔器在平板菌絲尖端打孔，將菌絲塊接種于斜面培養(yǎng)基（15mL PDA）上，25℃避光培養(yǎng)，待菌絲長滿斜面?zhèn)溆谩?/p>

1.5 黑木耳菌糠不同添加量對猴頭菇母種及二級種菌絲體生物學(xué)特性的影響

1.5.1 黑木耳菌糠不同添加量培養(yǎng)基的配制 以PDA培養(yǎng)基為對照設(shè)4個配方，即在進(jìn)行馬鈴薯浸提時分別加入50g、100g、150g和200g的黑木耳菌糠，用紗布過濾，在濾液內(nèi)加入瓊脂、葡萄糖，定容，pH自然；121℃高壓蒸汽滅菌35min，每個處理10次重復(fù)。

1.5.2 接種培養(yǎng)與生物學(xué)特性觀測 將已活化的菌種接種于平板培養(yǎng)基中，25℃培養(yǎng)2周，每48h觀察1次，及時清除被污染的培養(yǎng)基并記錄猴頭菇母種的菌絲體濃密度、生長速度、粗壯程度和菌絲體顏色等生物學(xué)特性，觀測15d。

1.5.3 菌袋的制備 以猴頭菇二級種基礎(chǔ)培養(yǎng)料為對照設(shè)計4個配方，即分別在玉米芯內(nèi)添加15%、20%、25%和30%的黑木耳菌糠，常規(guī)拌料，含水量65%、pH調(diào)至5、裝袋（17cm×33cm× 0.04cm聚丙烯塑料袋，0.4kg／袋），無棉蓋體封口，121℃高壓蒸汽滅菌2h，每個處理60次重復(fù)。

1.5.4 接種與發(fā)菌 在超凈工作臺中，每個菌袋接1試管經(jīng)活化的菌種。將接種后的菌袋放入25℃，空氣相對濕度65%～70%的發(fā)菌室中，避光發(fā)菌［12］。

1.5.5 生物學(xué)特性觀察及記錄 接種后，每5d觀察1次，及時處理污染袋并記錄猴頭菇二級種的菌絲體濃密度、生長速度、粗壯程度和菌絲體顏色等生物學(xué)特性，觀測5周。

1.6 黑木耳菌糠不同添加量對猴頭菇農(nóng)藝性狀的影響

1.6.1 出菇管理 將滿袋的猴頭菇二級菌種開袋后給予適宜的溫度（16～20℃）、濕度（85%～90%）、光照（100lx）及通風(fēng)條件（0.5～1h／d）［1，13］，進(jìn)行科學(xué)的出菇管理，采收2潮菇后結(jié)束管理。

1.6.2 采收管理及產(chǎn)量記錄 采收時記錄每袋鮮菇的產(chǎn)量及農(nóng)藝性狀，共采收2潮菇。

1.6.3 生物轉(zhuǎn)化率的計算 生物轉(zhuǎn)化率［14］（%）＝鮮菇重（kg）／培養(yǎng)料干重（kg）

2 結(jié)果與分析

2.1 黑木耳菌糠不同添加量猴頭菇母種和二級種菌絲體的生物學(xué)特性

2.1.1 母種菌絲體長勢及生長速度 由表1可知，菌糠添加量為50g／1 000mL時與對照組相比菌絲長勢及菌絲顏色無明顯差異，但菌糠添加量分別為100g／1 000mL、150g／1 000mL和200g／1 000mL時與對照組相比菌絲體長勢變得細(xì)弱、稀疏，菌絲體顏色由潔白逐漸變暗。由此可知，黑木耳菌糠添加量達(dá)到一定值時，會對猴頭菇母種菌絲體的生長起到一定的抑制作用。經(jīng)差異顯著性分析，菌糠添加量分別為50g／1 000mL、150g／1 000mL、200g／1 000mL時與對照差異極顯著，菌糠添加量為50g／1 000mL時的平均生長速度最快，比添加量為200g／1 000mL時快1.25mm／d，比對照組快0.04mm／d；故對猴頭菇母種菌絲生長有促進(jìn)作用的最優(yōu)配方為添加黑木耳菌糠50g／1000mL。

表1 不同黑木耳菌糠添加量猴頭菇母種和二級種菌絲的長勢和生長速度Table 1 Growth vigor and growth rate of mother strain and secondary－generation of H.erinaceus cultured on media with different black edible fungus chaff additive amount

2.1.2 二級種菌絲體長勢及生長速度 菌糠添加量分別為15%和20%時與對照組相比菌絲長勢無明顯差異，但菌糠添加量分別為25%和30%時與對照相比菌絲體長勢變得細(xì)弱、稀疏，菌糠添加量為15%處理與對照組相比菌絲顏色無明顯差異，但菌糠添加量分別為20%、25%和30%時與對照相比，菌絲體顏色變暗。由此可知，當(dāng)黑木耳菌糠添加量達(dá)到一定值時，會對猴頭菇二級種菌絲體的生長起到一定的抑制作用。經(jīng)差異顯著分析，菌糠添加量分別為15%、20%和25%時與對照組差異極顯著，且菌糠添加量為20%時平均生長速度最快，比菌糠添加量為30%時快0.689 7mm／d，比對照快0.576 7mm／d；由此可知，對猴頭菇二級種菌絲生長有促進(jìn)作用的最優(yōu)配方為添加黑木耳菌糠20%。

表2 不同黑木耳菌糠添加量猴頭菇的產(chǎn)量及品質(zhì)Table 2 Yield and quality of H.erinaceus cultured on media with different black edible fungus chaff additive amount

2.2 黑木耳菌糠不同添加量猴頭菇的農(nóng)藝性狀

由表2可知，與對照組相比，黑木耳菌糠添加15%、20%、25%和30%時子實體顏色、菌刺密集度無明顯差異。由此可知，黑木耳菌糠添加量對猴頭菇的農(nóng)藝性狀無明顯作用。菌糠添加量為25%時生物轉(zhuǎn)化率最高，較對照組高10.15%，菌糠添加量為20%、25%和30%時生物轉(zhuǎn)化率無顯著差異，與對照及添加15%時差異極顯著。隨著黑木耳菌糠添加量的增加，猴頭菇子實體平均直徑逐漸增大，說明黑木耳菌糠對猴頭菇生長有一定促進(jìn)作用；但菌糠添加量為30%時其子實體半徑小于菌糠添加量為25%的子實體，大于對照組。由此可知，當(dāng)黑木耳添加量達(dá)到一定量后，其促進(jìn)作用降低。但在試驗中未出現(xiàn)抑制現(xiàn)象。綜上所述，黑木耳菌糠添加量為25%為最優(yōu)配方。

3 結(jié)論與討論

在猴頭菇母種培養(yǎng)過程中，當(dāng)黑木耳菌糠的添加量為50g／1 000mL時，猴頭菇母種菌絲體的生物學(xué)特性達(dá)最佳。黑木耳菌糠中含有大量的速效有機(jī)成分如粗灰分、無氮浸出物、磷和鈣等，這些物質(zhì)在進(jìn)行馬鈴薯浸提時被粗提出來，融入培養(yǎng)基，這些有機(jī)成份為猴頭菇母種菌絲體生長提供了部分營養(yǎng)物質(zhì)及N源，從而促進(jìn)猴頭菇母種菌絲體的生長；但當(dāng)添加量達(dá)100g／1 000mL時，黑木耳菌糠對猴頭菇母種菌絲生長起到抑制作用；黑木耳菌糠粗提液中含有較多黑木耳的次級代謝產(chǎn)物，當(dāng)這些次級代謝產(chǎn)物達(dá)一定量時，對猴頭菇母種菌絲體的生長起抑制作用。

在猴頭菇二級種培養(yǎng)過程中，當(dāng)玉米芯中黑木耳菌糠添加量為20%時，菌絲體生物學(xué)特性達(dá)到最佳。黑木耳菌糠中含有大量的菌體蛋白、粗脂肪、粗纖維及速效有機(jī)成分。菌糠被粉碎后直接加入到培養(yǎng)料中，提供猴頭菇菌絲體養(yǎng)分，促進(jìn)猴頭菇菌絲體生長；但當(dāng)黑木耳菌糠添加量達(dá)20%，其促進(jìn)作用隨添加量的增加而逐漸減弱，當(dāng)添加量達(dá)30%時，黑木耳菌糠對猴頭菇二級種菌絲生長起抑制作用；菌糠中可能存在黑木耳菌絲體與猴頭菇菌絲體形成競爭，同時還存在一些次級代謝產(chǎn)物，對猴頭菇生長存在抑制，隨著黑木耳菌糠添加量的增多，競爭和抑制作用逐漸增強，猴頭菇菌絲體生長受到抑制。

添加黑木耳菌糠對猴頭菇生物轉(zhuǎn)化率及農(nóng)藝性狀有促進(jìn)作用，且黑木耳菌糠為廢料，費用較玉米芯等材料低，一定程度上降低了猴頭菇的生產(chǎn)成本，提高了猴頭菇生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益；同時，黑木耳菌糠的有效利用又為實現(xiàn)生態(tài)經(jīng)濟(jì)循環(huán)和可持續(xù)發(fā)展做出了一定貢獻(xiàn)?？傮w而言，利用黑木耳菌糠栽培猴頭菇具有較好的應(yīng)用前景，可進(jìn)一步推廣。

［1］徐錦堂，蘭 進(jìn).中國藥用真菌學(xué)［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997.

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（責(zé)任編輯：孫小嵐）

Effects of Different Black Edible Fungus Chaff Additive Amount on Biological Characteristics and Agronomic Traits of Hericium erinaceus

ZHAN Xin，YANG Shaojun，WANG Shiwei，SONG Yuhang，ZHENG Fengmei，TANG Yuqin＊
（Julin Agriculture Science and Technology College，Jilin，Jilin132101，China）

The effects of different edible fungus chaff additive amount on biological characteristics and agronomic traits of H.erinaceus mother strain and secondary－generation mycelium were studied by designing four different edible fungus chaff formulas to discuss the optimum additive amount of edible fungus chaff in production process of H.erinaceus，reduce production cost of H.erinaceus and realize effective utilization of fungus chaff.Results：The optimum edible fungus chaff additive amount for mycelium growth of H.erinaceus mother strain and secondary－generation is 50g／1 000mL and 20% respectively.The mycelium growth rate of H.erinaceus mother strain and secondary－generation can be up to 4.17mm／d and 2.8120mm／d separately and their mycelium growth performances sturdy and thick.The average yield per bag，biological conversion rate and fruiting body’s diameter of H.erinaceus cultured on the medium with 25%edible fungus chaff are 218.4g，54.60%and 6.11cm respectively and the fruiting body with dense fungus thorny material is pure white.

fungus chaff；Hericium erinaceus；biological characteristics；agronomic trait

S567.3

A

1001－3601（2016）07－0291－0030－03

2016－02－01；2016－06－28修回

吉林省大學(xué)生創(chuàng)新項目“黑木耳菌糠對猴頭菇生產(chǎn)及多糖含量影響的研究”（2015038）

張 鑫（1995－），女，在讀本科，專業(yè)：應(yīng)用生物科學(xué)。E－mail：dcwandzx＠163.com

＊通訊作者：唐玉琴（1964－），女，教授，從事食藥用菌和微生物方面的教學(xué)與研究。E－mail：2295657175＠qq.com