表皮生長(zhǎng)因子對(duì)葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型小鼠腸道損傷的修復(fù)研究

劉淑杰　鄧　波　徐子偉

(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，杭州310021)

表皮生長(zhǎng)因子對(duì)葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型小鼠腸道損傷的修復(fù)研究

劉淑杰鄧波徐子偉*

(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，杭州310021)

摘要：本文旨在討論表皮生長(zhǎng)因子(EGF)對(duì)葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型小鼠腸道損傷的修復(fù)作用。選用24只6周齡BALB/c小鼠，隨機(jī)分為3組，即:正常對(duì)照組、DSS模型對(duì)照組、DSS+EGF組。正常對(duì)照組小鼠飲用自來(lái)水；DSS模型對(duì)照組小鼠在試驗(yàn)第1～7天飲用5%DSS水溶液，第8～10天飲用自來(lái)水；DSS+EGF組小鼠按照DSS模型對(duì)照組處理，同時(shí)每天皮下注射EGF 2次，共注射10 d。結(jié)果表明：1)與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度極顯著降低(P<0.01)；與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度極顯著增加(P<0.01)。2)DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸可見(jiàn)典型潰瘍，結(jié)腸損傷程度評(píng)分(CDS)極顯著高于正常對(duì)照組(P<0.01)；DSS+EGF組小鼠結(jié)腸組織未見(jiàn)潰瘍，與DSS模型對(duì)照組相比，CDS極顯著降低(P<0.01)。3)與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸緊密連接蛋白(Occludin)濃度顯著降低(P<0.05)；與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸Occludin濃度顯著升高(P>0.05)。4)與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸白細(xì)胞介素-2(IL-2)和白細(xì)胞介素-4(IL-4)濃度極顯著降低(P<0.01)，白細(xì)胞介素-10(IL-10)濃度顯著降低(P<0.05)；與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組結(jié)腸IL-2和IL-4濃度極顯著增加(P<0.01)，IL-10濃度顯著增加(P<0.05)。由此可見(jiàn)，EGF可能通過(guò)提高腸道Occludin表達(dá)水平，調(diào)節(jié)腸道細(xì)胞因子濃度趨于正常水平，從而修復(fù)受損腸道組織，維持腸道黏膜屏障的完整性。

關(guān)鍵詞：表皮生長(zhǎng)因子；腸道；損傷修復(fù)；結(jié)腸炎

腸道不僅是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收的場(chǎng)所，也是機(jī)體重要的免疫器官，在動(dòng)物黏膜免疫、腸道功能屏障及生長(zhǎng)發(fā)育等過(guò)程中發(fā)揮重要作用[1]。然而在實(shí)際生產(chǎn)中，多種應(yīng)激、細(xì)菌、病毒、藥物和營(yíng)養(yǎng)素等因素均能引起動(dòng)物腸道損傷，導(dǎo)致腸道結(jié)構(gòu)變化，腸道黏膜免疫系統(tǒng)中的細(xì)胞因子和抗體等分泌改變，導(dǎo)致腸道屏障功能障礙，嚴(yán)重影響了動(dòng)物正常生理功能及生產(chǎn)潛能，給畜牧業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。

表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)為促生長(zhǎng)因子家族重要成員之一，是由53個(gè)氨基酸組成的單鏈多肽[3]。EGF主要由頜下腺、胰腺和十二指腸Brunner腺等分泌，釋放入唾液、十二指腸液、乳汁、血液和羊水等[4]。EGF具有多種重要生物學(xué)功能，作為強(qiáng)有力的細(xì)胞有絲分裂原，具有刺激多種組織細(xì)胞分裂和增殖、增加細(xì)胞內(nèi)DNA和蛋白質(zhì)合成、促進(jìn)上皮組織成熟與再生、抑制胃酸分泌、促進(jìn)離子交換等重要作用[5-6]。研究顯示，母乳中EGF是促進(jìn)新生動(dòng)物胃腸道發(fā)育的重要生長(zhǎng)因子[7]。敲除小鼠胎兒期或新生期EGF的受體可導(dǎo)致其死亡，小鼠即使存活至產(chǎn)后期也要最終死于出血性小腸炎，說(shuō)明EGF對(duì)腸道生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要[8]。外源供給EGF可能是改善腸道功能結(jié)構(gòu)、修復(fù)受損腸道組織的重要途徑。鑒于此，本研究以葡聚糖硫酸鈉(dextra sulfate sodium,DSS)誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠為模型動(dòng)物，研究EGF對(duì)腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)、通透性和腸道細(xì)胞因子濃度的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)損傷腸道的修復(fù)作用，為將EGF應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)研究提供重要的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

EGF(貨號(hào)：AF-100-15)購(gòu)自美國(guó)Peprotech公司。DSS(相對(duì)分子質(zhì)量為36 000～50 000)購(gòu)自上海MP公司，10%中性甲醛(40%甲醛100 mL，磷酸二氫鈉4.0 g，無(wú)水磷酸氫二鈉6.5 g，蒸餾水900 mL)購(gòu)自杭州長(zhǎng)青化工有限公司，白細(xì)胞介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)和緊密連接蛋白(Occludin)檢測(cè)試劑盒(編號(hào)H003、H052、H005、H009和p64)購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

24只6周齡清結(jié)級(jí)BALB/c小鼠，體重為18～20 g，購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司。動(dòng)物飼養(yǎng)溫度為(24±1) ℃，相對(duì)濕度為40%～70%，光照周期為12 h明、12 h暗的標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境，自由采食和飲水。小鼠飼糧浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，主要營(yíng)養(yǎng)水平為：粗蛋白質(zhì) 20 g/kg，粗纖維5 g/kg，粗脂肪4 g/kg，粗灰分8 g/kg，鈣1 g/kg，磷0.7 g/kg。小鼠隨機(jī)分為3組，每組8只，即:正常對(duì)照組、DSS模型對(duì)照組、DSS+EGF組。正常對(duì)照組小鼠在試驗(yàn)第1～10天自由飲用自來(lái)水；DSS模型對(duì)照組小鼠在試驗(yàn)第1～7天飲用5%的DSS水溶液，第8～10天飲用自來(lái)水；DSS+EGF組小鼠按照DSS模型對(duì)照組處理，同時(shí)每天08:00和16:00腹部皮下注射EGF(0.02 mg/kg)各1次，共注射10 d。每天仔細(xì)觀察試驗(yàn)小鼠的精神和活動(dòng)狀態(tài)以及毛發(fā)及糞便等。

1.3樣本采集及處理

試驗(yàn)第11天，于眶下靜脈采血，分離血清。頸椎脫臼法處死小鼠，沿腹中線打開(kāi)腹腔，取出腸道組織，測(cè)定小鼠盲腸端至肛門(mén)的結(jié)腸長(zhǎng)度。取1 cm結(jié)腸組織放入10%中性甲醛溶液中，4 ℃保存；用滅菌生理鹽水沖洗剩余部分的結(jié)腸，然后立刻將其放于-70 ℃保存。

1.4結(jié)腸形態(tài)學(xué)觀察及損傷程度評(píng)分

將固定于福爾馬林溶液中結(jié)腸樣品，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片后蘇木精-伊紅 (hematoxylin-eosin staining,HE)染色，顯微鏡下觀察各組小鼠的結(jié)腸形態(tài)結(jié)構(gòu)。采用Dieleman等[9]報(bào)道方法對(duì)結(jié)腸損傷程度評(píng)分(colonic damage score,CDS)，評(píng)分方法如下：炎癥程度按照急慢性的炎癥分為0～3；浸潤(rùn)范圍按照炎癥的程度分為0～4；隱窩損傷和修復(fù)程度分為0～4分。估算炎癥的作用范圍分為：1)1%～25%；2)26%～50%；3)51%～75%；4)76%～100%。每項(xiàng)評(píng)分均以該項(xiàng)分?jǐn)?shù)與炎癥范圍的乘積計(jì)算，損傷程度評(píng)分為每項(xiàng)評(píng)分的總和。

1.5結(jié)腸Occludin及細(xì)胞因子濃度測(cè)定

準(zhǔn)確稱取結(jié)腸組織重量，加入生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，離心后取上清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法測(cè)定結(jié)腸Occludin濃度，以及結(jié)腸IL-2、TNF-α、IL-4和IL-10濃度。

1.6數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)及Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2結(jié)果

2.1小鼠臨床表現(xiàn)

正常對(duì)照組小鼠精神狀況、飲食及活動(dòng)均正常，毛發(fā)光澤，無(wú)便血。DSS模型對(duì)照組小鼠飲用5%DSS水溶液后，第2天開(kāi)始精神萎靡，活動(dòng)遲緩，隨著試驗(yàn)天數(shù)增加，小鼠毛發(fā)變得無(wú)光澤，飲食減少，并且出現(xiàn)稀便和血便，試驗(yàn)第6天全部出現(xiàn)嚴(yán)重血便。DSS+EGF組小鼠精神狀態(tài)和活動(dòng)較為正常，個(gè)別小鼠出現(xiàn)采食量降低。

2.2小鼠腸道長(zhǎng)度

由圖1可知，與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度極顯著降低(P<0.01)，降低了39.27%。與正常對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度極降低(P<0.01)，降低了21.01%，與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度極顯著增加(P<0.01)，增加了23.04%。

2.3小鼠腸道形態(tài)及CDS

由圖2可知，HE染色結(jié)果顯示正常對(duì)照組小鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)清楚，各層清晰可見(jiàn)，黏膜層和黏膜上皮細(xì)胞完整，未見(jiàn)脫落，固有層內(nèi)未見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)潰瘍等。DSS模型對(duì)照組結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)尚存，黏膜層和黏膜上皮細(xì)胞不完整，脫落，可見(jiàn)典型的潰瘍；潰瘍周邊黏膜上皮細(xì)胞可見(jiàn)增生；固有層內(nèi)和黏膜下層內(nèi)可見(jiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，伴淋巴濾泡形成等。皮下注射EGF的小鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)清晰，黏膜層和黏膜上皮細(xì)胞修復(fù)完整，未見(jiàn)潰瘍；僅見(jiàn)固有層內(nèi)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等。

數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。下圖同。

Data values with the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

圖1EGF對(duì)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎

小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度的影響

Fig.1Effects of EGF on colon length of mice treated with DSS-induced colitis

結(jié)腸CDS結(jié)果顯示，DSS模型對(duì)照組CDS極顯著高于正常對(duì)照組(P<0.01)。與正常對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠CDS顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05)，與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠CDS極顯著降低(P<0.01)，降低了71.88%，說(shuō)明結(jié)腸損傷得到顯著改善。

2.4結(jié)腸Occludin濃度

由圖3可知，與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸Occludin濃度顯著降低(P<0.05)，降低了30.53%。與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠Occludin濃度顯著升高(P<0.05)，升高了39.49%，與正常對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠Occludin濃度差異不顯著(P>0.05)。

2.5結(jié)腸細(xì)胞因子濃度

由表1可知，各組間小鼠結(jié)腸TNF-α濃度無(wú)顯著差異(P>0.05)。與正常對(duì)照組相比，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸IL-2和IL-4濃度極顯著降低(P<0.01)，分別降低了29.78%和36.59%；IL-10濃度顯著降低(P<0.05)，降低了24.07%。與DSS模型對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸IL-2和IL-4濃度極顯著增加(P<0.01)，分別增加了41.10%和31.56%；IL-10濃度顯著增加(P<0.05)，增加了31.17%。與正常對(duì)照組相比，DSS+EGF組小鼠結(jié)腸IL-2、IL-4和IL-10濃度均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

3討論

腸道是機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的重要器官，又是體內(nèi)最大的免疫器官，其以緊密的結(jié)構(gòu)形態(tài)最大限度地發(fā)揮屏障功能(生物屏障、物理屏障和化學(xué)屏障)，阻止外界毒素、細(xì)菌和抗?fàn)I養(yǎng)因子等有害物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)，是機(jī)體抵御異物的第一道重要防線。然而在實(shí)際生產(chǎn)中有諸多不利因素危害動(dòng)物腸道的健康，導(dǎo)致腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)改變，腸道黏膜免疫系統(tǒng)中的細(xì)胞因子和抗體等分泌紊亂，腸道屏障功能障礙，進(jìn)一步造成機(jī)體其他組織器官損傷，致使動(dòng)物生長(zhǎng)性能和健康受到極大影響，維持腸道健康是畜牧領(lǐng)域的一個(gè)重要研究課題。

EGF屬于促生長(zhǎng)因子家族成員，具有促進(jìn)胃腸上皮細(xì)胞增殖與分化、腸道組織生長(zhǎng)和發(fā)育等重要作用，被認(rèn)為是腸道內(nèi)環(huán)境平衡的調(diào)控因子[10]。產(chǎn)后母乳中的EGF是刺激新生動(dòng)物腸道細(xì)胞增殖和腸道成熟的主要營(yíng)養(yǎng)因子[11]。EGF可顯著增加新生大鼠小腸重量、長(zhǎng)度和DNA含量，加速早期胚胎腸道杯狀細(xì)胞成熟速度[12-13]。在本研究中，皮下注射EGF極顯著增加小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度，結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，黏膜層和黏膜上皮細(xì)胞修復(fù)完整，未見(jiàn)潰瘍；僅見(jiàn)固有層內(nèi)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等，并且小鼠結(jié)腸CDS極顯著降低。這些說(shuō)明EGF緩解了小鼠結(jié)腸的縮短，維持了結(jié)腸上皮結(jié)構(gòu)的相對(duì)完整性。

機(jī)械屏障是腸道黏膜屏障功能最重要的組成部分，細(xì)胞間緊密連接是構(gòu)成腸道機(jī)械屏障的基礎(chǔ)，能夠防止細(xì)菌內(nèi)毒素及毒性大分子等有害物質(zhì)進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，對(duì)維持腸黏膜上皮屏障功能的完整性具有重要作用[14]。Occludin是腸道內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接的主要功能蛋白，與腸道緊密連接及屏障功能密切相關(guān)，其濃度減少會(huì)導(dǎo)致腸道屏障功能障礙[15]。大鼠腸道缺血性損傷后早期即有滲透性增高及腸黏膜屏障功能損傷，皮下注射高劑量EGF可顯著增加大鼠空腸和回腸Occludin濃度[16]。機(jī)體組織受到損傷時(shí)，內(nèi)源性EGF合成增

加，但是組織中EGF含量普遍較低，隨著病情發(fā)展，EGF可能被耗竭而加重?fù)p傷，此時(shí)外源性補(bǔ)充EGF可減輕組織損傷[17]。在本研究中，小鼠飲用5%的DSS溶液顯著降低了小鼠結(jié)腸Occludin濃度；而皮下注射EGF顯著增加了小鼠結(jié)腸Occludin濃度。這些結(jié)果說(shuō)明DSS增加了小鼠腸道的通透性，破壞了腸道屏障功能，而外源遞送EGF顯著降低了腸道黏膜通透性，保護(hù)了腸道上皮的屏障功能，這個(gè)結(jié)果與HE染色結(jié)果相一致。

A：正常對(duì)照組 Normal control group；B：DSS模型對(duì)照組 DSS model control group；C：DSS+EGF組 DSS+EGF group。

圖2EGF對(duì)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠的結(jié)腸形態(tài)及結(jié)腸損傷程度評(píng)分的影響

Fig.2Effects of EGF on colonic morphology and CDS of mice treated with DSS-induced colitis

圖3　EGF對(duì)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎

促炎因子和抑炎因子平衡失調(diào)被認(rèn)為是腸道炎癥性疾病的一個(gè)重要發(fā)病機(jī)制，細(xì)胞因子異常表達(dá)與結(jié)腸炎的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[18]。給小鼠灌服2.5%DSS溶液6 d，結(jié)腸炎癥組織白細(xì)胞介素-6(IL-6)和TNF-αmRNA表達(dá)水平顯著升高，IL-4 mRNA表達(dá)水平極顯著降低[19]。大鼠飲用5%DSS溶液，結(jié)腸組織的TNF-α和IL-6濃度顯著升高，IL-2、IL-10和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)濃度顯著降低[20]。目前關(guān)于DSS結(jié)腸炎產(chǎn)生的確切機(jī)制還尚不清楚，可能與巨噬細(xì)胞功能失調(diào)、腸道菌群失衡、某些細(xì)胞因子濃度改變、DSS影響結(jié)腸上皮DNA合成、抑制細(xì)胞增生以及破壞腸道黏膜屏障等有關(guān)[21]。IL-2是參與免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞因子，具有雙向調(diào)節(jié)的特點(diǎn)，IL-2濃度降低，可導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能障礙，降低結(jié)腸黏膜局部防御功能，從而加重組織損傷[22]。IL-4可抑制單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、白細(xì)胞介素-8(IL-8)和TNF-α等，促進(jìn)白細(xì)胞介素-1(IL-1)的受體抗體產(chǎn)生，在維持腸道免疫和抑制腸道炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[23]。IL-10介導(dǎo)Th1和Tp細(xì)胞之間的相互調(diào)節(jié)，可抑制細(xì)胞因子TNF-α、IL-1和IL-6等釋放和炎癥反應(yīng)[24]。在本研究中，DSS模型對(duì)照組小鼠結(jié)腸IL-2和IL-4

濃度極顯著降低，IL-10濃度顯著降低；皮下注射EGF極顯著增加小鼠結(jié)腸IL-2和IL-4濃度，顯著增加IL-10濃度，并與正常對(duì)照組相比，EGF組小鼠結(jié)腸IL-2、IL-4和IL-10濃度無(wú)顯著改變。這些說(shuō)明EGF能夠調(diào)節(jié)結(jié)腸炎小鼠IL-2、IL-4和IL-10濃度達(dá)到正常范圍，抑制腸道炎癥反應(yīng)，改善大鼠結(jié)腸炎癥狀，對(duì)損傷腸道具有一定的保護(hù)與修復(fù)作用。

表1　EGF對(duì)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸細(xì)胞因子濃度的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

4結(jié)論

皮下注射EGF可改善DSS結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織形態(tài)，降低結(jié)腸CDS，抑制結(jié)腸組織Occludin濃度降低以及IL-2、IL-4和IL-10濃度增加，對(duì)損傷腸道具有保護(hù)與修復(fù)作用。

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(責(zé)任編輯武海龍)

Study on Intestinal Damage Repair of Epidermal Growth Factor on Dextra Sulfate Sodium-Induced Colitis in Mice

LIU ShujieDENG BoXU Ziwei*

(Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China)

Abstract:This study aimed to evaluate the effects of intestinal damage repair of epidermal growth factor (EGF) on dextra sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. Twenty-four BALB/C mice aged at 6 weeks were randomly assigned into three groups: normal control group, DSS model control group and DSS+EGF group. The normal control group received normal drinking water; DSS model control group received 5% DSS solution in drinking water for 7 consecutive days and followed with normal drinking water for 3 days; DSS+EGF group received the same treatment of DSS as DSS model control group, meanwhile, these mice were administered with EGF by intraperitoneal injection twice a day and for 10 days. The results showed as follows: 1) DSS model control group significantly shortened colon length of mice compared with the normal control group (P<0.01), and DSS+EGF group significantly increased colon length of mice compared with the DSS model control group (P<0.01). 2) Mice in DSS model control group revealed a typical ulcer of the colonic tissues, and significant increased colonic damage score (CDS) compared with the normal control group (P<0.01). Mice in DSS+EGF group did not show the ulcer of the colonic tissues, and significantly reduced CDS compared with DSS model control group (P<0.01). 3) DSS model control group significantly decreased colonic tight junction proteins (Occludin) concentration of mice compared with normal control group (P<0.05). DSS+EGF group significantly increased colonic Occludin concentration of mice compared with DSS model control group (P<0.05). 4) DSS model control group significantly decreased colonic interleukin (IL)-2 (P<0.01), IL-4 (P<0.01) and IL-10 concentrations (P<0.05) of mice compared with normal control group. DSS+EGF group significantly increased colonic IL-2 (P<0.01), IL-4 (P<0.01) and IL-10 concentrations (P<0.05) of mice compared with DSS model control group.The results show that EGF can repair damaged intestinal tissue and maintain the integrity of the intestinal mucosal barrier by increasing intestinal Occludin expression and regulation of levels of intestinal cytokines concentrations.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(6)：1735-1741]

Key words:epidermal growth factors; intestinal tract; damage repair; colitis

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.06.014

收稿日期：2016-03-09

基金項(xiàng)目：國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金(CARS-36)；國(guó)家青年科學(xué)基金項(xiàng)目(C170105/31501966)；公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)(201403047)

作者簡(jiǎn)介：劉淑杰(1978—)，女，內(nèi)蒙古扎蘭屯人，助理研究員，博士，從事動(dòng)物健康養(yǎng)殖與分子生物學(xué)研究。E-mail： Liushujie78@126.com *通信作者：徐子偉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail： xzwfyz@sina.com

中圖分類(lèi)號(hào)：S811.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)06-1735-07

*Corresponding author, professor, E-mail: xzwfyz@sina.com