抗磷脂抗體檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床應(yīng)用

魏　萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬　健

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抗磷脂抗體檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床應(yīng)用

魏萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬健

[摘要]目的評估抗磷脂抗體包括抗心磷脂抗體（Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體（anti-β2GPⅠ）在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對確診的120例SLE和100例健康體檢者血清Acl（IgG、IgM、IgA）和anti-β2GPⅠ（IgA/G/M）水平表達(dá)進(jìn)行測定，并分析其對SLE的敏感度和特異度，及血清Acl和anti-β2GPⅠ水平間的相關(guān)性。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Χ2檢驗(yàn)。結(jié)果SLE組血清Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM、anti-β2GPⅠ陽性率分別為6.7％、4.2％、1.7％、5％、18.3％，均高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論anti-β2GPⅠ抗體對SLE的敏感度高于Acl，建議兩種抗體聯(lián)合檢測，有助于提高檢出率。

[關(guān)鍵詞]抗磷脂抗體；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；抗心磷脂抗體；抗β2糖蛋白Ⅰ抗體；抗磷脂綜合征

抗磷脂抗體（antiphospholipid antibodies，APLs）是一組作用于磷脂和（或）磷脂結(jié)合蛋白的異質(zhì)性抗體。由APLs介導(dǎo)的，以動(dòng)靜脈血栓形成、血小板減少和病態(tài)妊娠為特點(diǎn)的一組自身免疫性疾病則稱為抗磷脂綜合征（antiphospholipid syndrome，APS）。2006年悉尼國際分類標(biāo)準(zhǔn)[1]已將IgG型和/ 或IgM型的抗心磷脂抗體（anticardiolipin，Acl）和抗β2糖蛋白Ⅰ抗體（anti-β2GPⅠ），以及狼瘡抗凝物作為實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)納入APS的診斷標(biāo)準(zhǔn)。抗磷脂抗體是抗磷脂綜合征患者血清中重要的標(biāo)志性抗體。繼發(fā)性抗磷脂綜合征常繼發(fā)于自身免疫性疾病，尤其是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）[2]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種可表達(dá)多種自身抗體的自身免疫性疾病，也一定程度地表達(dá)Acl和 anti-β2GPⅠ。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2012年3月—2014年12月筆者所在醫(yī)院腎內(nèi)科、皮膚科、血液科、血液凈化科等門診及住院患者血清標(biāo)本220例，其中120例確診為系統(tǒng)性紅斑狼瘡。男20例，女100例；年齡15～70歲，平均33歲。其余100例為健康對照組，來自院體檢中心進(jìn)行健康查體的健康人群。

1.2儀器與試劑檢測用酶標(biāo)儀為DNM-9606，選用的Acl試劑盒由德國ORGENTEC提供，antiβ2GPⅠ抗體試劑盒由EUROMMUN提供。

1.3方法用普通真空采血管采集受試者空腹靜脈血3 ml，室溫靜置30min，1200 r/min離心5min收集血清，保存于-20℃冰箱待用。采用酶聯(lián)免疫吸附法，同時(shí)檢測SLE組和健康對照組血清中的不同亞型（IgG、IgM、IgA型）抗心磷脂抗體（Acl）和antiβ2GPⅠ抗體水平，其中IgG型Acl＞10 U/ml為陽性，IgM型Acl＞7 U/ml為陽性，IgA型Acl＞10 U/ml為陽性，anti-β2GPⅠ抗體＞20 RU/ml為陽性，操作按說明書。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。采用Χ2檢驗(yàn)（理論頻數(shù)＜1時(shí)采用Fisher精確檢驗(yàn)）比較SLE組、健康對照組中抗磷脂抗體的陽性率。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

見表1、2。

表1　兩組抗磷脂抗體的檢測結(jié)果

表2　SLE組不同抗磷脂抗體的敏感度、特異度（％）

3　討論

隨著檢測技術(shù)的發(fā)展，Acl和抗β2GPⅠ抗體逐步被臨床廣泛應(yīng)用?？沽字贵w可能是導(dǎo)致系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎小球微血栓的主要原因，其可導(dǎo)致腎的血管性損害，即腎的非炎癥性血栓性血管病，在狼瘡性腎炎患者中抗磷脂綜合征腎病是另一個(gè)損害腎的重要因素，嚴(yán)重者可危及生命?？沽字贵w和狼瘡性腎炎關(guān)系密切，對于狼瘡性腎炎患者，應(yīng)注意檢測抗磷脂抗體及抗磷脂綜合征腎病，給予合理的治療?？沽字C合征是動(dòng)靜脈及小血管血栓形成的重要原因，也是90％的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的主要原因。由于抗磷脂綜合征的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，因此其診斷和鑒別診斷非常依賴抗磷脂抗體實(shí)驗(yàn)室檢測的結(jié)果。由于文獻(xiàn)報(bào)道IgM型APLs與IgG型相比與抗磷脂綜合征的相關(guān)性較弱，因此國內(nèi)部分實(shí)驗(yàn)室僅開展了IgG型Acl的檢測，但是Salobir等[3]和Ota[4]的研究小組均發(fā)現(xiàn)部分血栓和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者中僅存在IgM型APLs。IgA型APLs的臨床價(jià)值仍然存在爭議，但有文獻(xiàn)報(bào)道IgA型抗β2GPⅠ抗體常常伴隨抗磷脂綜合征臨床癥狀出現(xiàn)，并且22％的惡性APS患者中僅IgA型抗β2GPⅠ抗體陽性[5]。第13屆抗磷脂抗體國際大會(huì)建議在高度懷疑APS，IgG型和IgM型抗體均陰性的患者中應(yīng)該檢測IgA型抗體。

該研究中，Acl-IgG、Acl-IgM、Acl-IgA、Acl-IgG/IgM和抗β2GPⅠ抗體在SLE中的陽性率分別為6.7％、4.2％、1.7％、5.0％和18.3％，IgG型Acl是陽性率最高的Acl亞型。IgG型Acl、IgG/IgM型ACl和抗β2GPⅠ抗體的陽性率在不同組中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余指標(biāo)的陽性率無明顯差異。SLE患者組中，Acl陽性的患者中6.7％僅IgG亞型陽性，5％IgG/IgM亞型陽性，該組120例SLE中，臨床上僅15例被診斷伴有APS，所以抗體的檢出率總體較低。

在SLE患者組中，抗β2GPⅠ抗體的敏感度高于IgG/M/A型Acl，因此IgG/M/A型Acl不適合作為Acl的初篩試劑，建議同時(shí)檢測IgG、IgM和IgA型抗心磷脂抗體和抗β2GPⅠ抗體，有助于提高檢出率，有助于減少漏診和臨床患者的及早診斷和治療。當(dāng)然，在有條件的實(shí)驗(yàn)室，如果患者血清中antiβ2GPⅠ抗體陽性，可對其anti-β2GPⅠ抗體進(jìn)一步分型，確定anti-β2GPⅠ的亞型（IgG/IgM/IgA）。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，如果3種抗體亞型均陽性，提示患者發(fā)生血栓或病態(tài)妊娠的風(fēng)險(xiǎn)更高，并且患者復(fù)發(fā)的概率也更高[6]。有研究報(bào)道，Acl和抗β2GPⅠ抗體在單純的SLE組中的陽性率及水平顯著低于SLE伴APS組，提示此兩種抗體的檢測對預(yù)測SLE繼發(fā)APS有重要的評估價(jià)值，對鑒別SLE是否伴有APS有重要的參考價(jià)值[7]?？功?GPⅠ抗體比Acl檢出率高，所以抗β2GPⅠ抗體可作為抗磷脂綜合征的篩查。

綜上所述，該研究評估了檢測這兩種抗體的價(jià)值，探討如何選擇正確的檢測項(xiàng)目，提高檢測的敏感度和特異度。臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)重視IgM、IgA型抗磷脂抗體的臨床價(jià)值，建議有條件的實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)開

展Acl 3種亞型抗體和anti-β2GPⅠ抗體的聯(lián)合檢測，提高APS診斷的敏感性和特異度，并且重視該兩種抗體均陽性的高風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]Miyakis S，Lockshin MD，Atsumi T，et al. International consensus statement on an update of the classification creteria for definite antiphospholipid syndrome（APS）[J]. J Thromb Haemost，2006，4（3）：295-306.

[2]Biggioggero M，Meroni PL. The geoepidemiology of the ntiphospholipid antibody syndrome[J].Autoimmun Rev，2010，9：A299-A304.

[3]Salobir B，Sabovic M，Hojnik M，et al. Anti-beta 2-glycoprotein Ⅰantibodies of IgM class are linked to thrombotic disorders in yong women without autoimmune disease[J]. Immunobiology，2007，212（2）：193-199.

[4]Ota K，Dambaeva S，Lee J，et al. Persistent high levels of IgM antiphospholipid antibodies in a patient with recurrent pregnancy losses and rheumatoid arthritis[J].Am J Reprod Immunol，2014，71（3）：286-292.

[5]Ruiz-García R，Serrano M，Martínez-Flores JA，et al. Isolated IgA anti-β2 glycoproteinⅠantibodies in patients with clinical criteria for antiphospholipid syndrome[J].J Immunol Res，2014：70（4）：395.

[6]Pengo V，Ruffatti A，Legnani C，et al.Clinical course of highrisk patients diagnosed with antiphospholipid syndrome[J].J Thromb Haemost，2010，8（3）：237-242.

[7]韓曉蓓，孫桂榮，劉明軍，等.抗磷脂綜合征相關(guān)自身抗體臨床應(yīng)用價(jià)值評估[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，37（8）：851-854.

[2015-11-12收稿，2015-12-10修回]

[本文編輯：董冰媛]

The clinical application of antiphospholipid antibodies detection in systemic lupus erythematosus

WEI Ping，WANG Yan-xia，ZHANG Ai-ping，et al. Nephrosis Laboratory Center，the General Hospital of Jinan Military Region，Jinan，Shandong 250031，China

[Abstract]Objective To investigate the prevalence and clinical significance of different subtypes（IgG，IgM，IgA）of anticardiolipin antibodies（Acl）and anti-β2-glycoproteinⅠantibodies（anti-β2GPⅠ）in systemic lupus erythematosus（SLE）. MethodsIgG，IgM，IgA Acl and anti -β2GPⅠwere tested by enzyme -linked immunosorbent assay（ELISA）in the 120 patients with SLE and 100 healthy controls. The sensitivity and specificity of Acl and anti-β2GPⅠfor the diagnosis of SLE and the correlation of serum Acl and anti-β2GPⅠlevels were analyzed with Χ2test. Results The positivity rates of Acl-IgG，Acl-IgM，Acl-IgA，Acl-IgG/IgM，antiβ2GPⅠwere 6.7％，4.2％，1.7％，5％，18.3％respectively，which were significantly higher in the SLE group than those in the healthy controls（P＜0.05）. ConclusionThe sensitivity of anti-β2GPⅠfor SLE is higher than that of Acl.The Acl and anti-β2GPⅠare advised to co-test to improve the detection rate.

[Key words]Antiphospholipid antibodies；Systemic lupus erythematosus；Anticardiolipin antibodies；Beta 2-GlycoproteinⅠ；Antiphospholipid syndrome

[中圖分類號]R593.24

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

DOI：10.14172/j.issn1671-4008.2016.05.005

[作者單位]250031山東濟(jì)南，濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院腎內(nèi)科腎病實(shí)驗(yàn)中心（魏萍，王艷俠，石書梅，張愛平，馬健）