奶牛子宮角和卵巢子宮靜脈插管方法的研究

王　亨，吳永啟，董慧敏，葉小康，孟　霞，劉宗平，李建基（1.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州225009；2.江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇揚(yáng)州225009）

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奶牛子宮角和卵巢子宮靜脈插管方法的研究

王亨1，2，吳永啟1，2，董慧敏1，2，葉小康1，2，孟霞1，2，劉宗平1，2，李建基1，2
（1.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州225009；2.江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇揚(yáng)州225009）

摘要：對(duì)12頭奶牛進(jìn)行卵巢子宮靜脈和子宮角插管手術(shù)方法探討，包括保定方式、麻醉方法、插管選擇、插管要領(lǐng)和護(hù)理方法等。觀察插管前后奶牛體溫、呼吸、脈搏變化以及外周血和卵巢子宮靜脈血白細(xì)胞總數(shù)的變化，評(píng)價(jià)插管手術(shù)對(duì)奶牛的影響。結(jié)果表明，運(yùn)用該手術(shù)方法進(jìn)行插管，術(shù)后奶牛體溫、脈搏和白細(xì)胞總數(shù)出現(xiàn)一過(guò)性升高，呼吸僅在術(shù)后24 h出現(xiàn)顯著性變化，之后恢復(fù)正常。12頭奶牛插管，有1頭發(fā)生阻塞，1頭插管脫落，其余均可從血管采集到血液樣本。該外科技術(shù)為子宮局部的生理和病理研究提供技術(shù)保障。

關(guān)鍵詞：奶牛；子宮角；卵巢子宮靜脈；插管術(shù)

吳永啟（1985-），男，碩士，主要從事動(dòng)物臨床疫病研究，E-mail：wyqjjkk@163.com

注：吳永啟與王亨對(duì)本文具有同等貢獻(xiàn)

奶牛子宮內(nèi)膜炎是引起奶牛生產(chǎn)性能下降的疾病之一，是奶牛疾病研究的熱點(diǎn)。子宮局部的免疫對(duì)于子宮內(nèi)膜炎的發(fā)生具有決定性意義。收集子宮局部血液觀察子宮局部免疫在子宮內(nèi)膜炎發(fā)生和發(fā)展中的作用，是研究子宮內(nèi)膜炎發(fā)病機(jī)理的方法之一。血管插管術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床和研究，為醫(yī)學(xué)的發(fā)展提供技術(shù)保障?，F(xiàn)在子宮內(nèi)膜炎造模的方法有兩種，一種是經(jīng)陰道注菌法，Christoffersen等使用輸精管向子宮內(nèi)灌注大腸桿菌，制備馬子宮內(nèi)膜炎模型［1］?？紫榉宓韧ㄟ^(guò)子宮灌注細(xì)菌，建立兔子宮內(nèi)膜炎模型［2］；另一種是經(jīng)子宮角插管注菌法，該方法本課題組已經(jīng)在羊的子宮角進(jìn)行插管并應(yīng)用［3］。奶牛子宮角插管和卵巢子宮靜脈插管方法，尚未見報(bào)道，而該方法的探索，可為奶牛子宮內(nèi)膜炎的研究，提供技術(shù)保障，故進(jìn)行該研究。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物12頭健康奶牛，體重500～650 kg，購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)牧場(chǎng)，經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，臨床檢查無(wú)異常。

1.2藥品與材料2%鹽酸利多卡因，速眠新，0.1%硫酸阿托品，16Ga中心靜脈導(dǎo)管（ARROW，美國(guó)），2 mg/mL肝素鈉，醫(yī)用硅膠管（內(nèi)徑0.96 mm，外徑1.56 mm），常規(guī)大動(dòng)物腹腔器械及眼科器械各1套。

1.3手術(shù)方法

1.3.1術(shù)前準(zhǔn)備術(shù)前24 h禁食，少量飲水。清理體表污物，并于術(shù)前0.5 h注射抗生素。

1.3.2麻醉與保定麻醉前用藥，硫酸阿托品，0.04 mg/kg體重，10 min后注射速眠新，0.005 mL/ kg體重。插管手術(shù)保定方式：左后肢半仰臥保定；從腹壁引出插管保定方式：站立保定。后肢半仰臥保定確實(shí)后，術(shù)部常規(guī)準(zhǔn)備，剃毛、消毒并采用利多卡因浸潤(rùn)麻醉；站立保定時(shí)，腹壁切開引出插管術(shù)，采用2%利多卡因腰旁神經(jīng)傳導(dǎo)麻醉，配合1%利多卡因術(shù)部浸潤(rùn)麻醉。

1.3.3中心靜脈導(dǎo)管的預(yù)處理中心靜脈導(dǎo)管連接注射器，用2 mg/mL肝素鈉溶液充滿中心靜脈導(dǎo)管，封閉待用。

1.3.4卵巢子宮靜脈插管手術(shù)方法以腹股溝外環(huán)內(nèi)側(cè)與腹中線的連線為起點(diǎn)，在腹股溝外環(huán)與乳腺基部之間，向前作平行于腹中線的切口，長(zhǎng)約30～35 cm。依次切開皮膚，分離筋膜，切開肌肉和腹膜。將左側(cè)子宮角緩慢牽引至切口外，紗布隔離。于子宮角近頭側(cè)的1/3與中1/3交界處的闊韌帶上，鈍性分離，游離卵巢子宮靜脈0.5～1.0 cm，并作預(yù)置結(jié)扎線。在血管外側(cè)做一切口，將導(dǎo)管迅速插入游離靜脈內(nèi)，直至15 cm左右，收緊結(jié)扎線，去掉中心靜脈插管上的注射器，觀察血液在插管內(nèi)的回流情況，無(wú)異常，則用注射器注入肝素溶液，封管。然后縫合血管壁，用漿膜包埋插入部血管，將血管插管置于血管固定夾中，并將固定夾的雙翼與闊韌帶的漿膜或子宮角進(jìn)行間斷縫合，固定血管插管。血管插管與子宮角漿膜肌層進(jìn)行數(shù)針結(jié)節(jié)縫合固定。固定完畢，再次觀察導(dǎo)管的通暢性。

1.3.5子宮角插管手術(shù)方法在子宮角與輸卵管交界處，做預(yù)置荷包縫合線，用眼科剪刀剪一小口，將醫(yī)用硅膠管通過(guò)此口插入子宮腔，插入長(zhǎng)度約5.0 cm，收緊荷包縫合線，固定插管。將子宮角插管、血管插管和子宮角還納腹腔，常規(guī)關(guān)腹。

1.3.6卵巢子宮靜脈插管和子宮角插管引出體外及固定的手術(shù)方法奶牛站立保定，左側(cè)腹壁常規(guī)剃毛消毒，采用1.3.2進(jìn)行傳導(dǎo)麻醉和術(shù)部浸潤(rùn)麻醉。切口采用左側(cè)腹壁中切口，依次切開皮膚、皮下筋膜、腹外斜肌、腹內(nèi)斜肌、腹橫肌和腹膜。打開腹壁后，進(jìn)行骨盆腔周圍的探查，尋找卵巢子宮靜脈插管和子宮角插管，并確定奶牛卵巢子宮靜脈和子宮角插管所對(duì)應(yīng)的體表投影，做好標(biāo)記。術(shù)者左手于腹腔內(nèi)對(duì)應(yīng)體表位置隔腹壁向外側(cè)做出切口位置指示，右手持手術(shù)刀切開皮膚2 cm，后改用止血鉗鈍性分離，至腹腔。依次將卵巢子宮靜脈插管、子宮角插管引出體外，并進(jìn)行體表固定（見前插彩版圖1）。

1.4術(shù)后護(hù)理術(shù)后，每頭牛單獨(dú)栓系飼養(yǎng)，自由飲水，飼草應(yīng)少食多餐。3 d內(nèi)，全身應(yīng)用抗生素。每隔12 h檢查卵巢子宮靜脈插管的通暢性，并向卵巢子宮靜脈插管推注肝素鈉2 mL。收集血液樣品時(shí)，應(yīng)先丟棄抗凝液體，待新鮮血液流出后，收集樣品，送檢，同時(shí)重新注入肝素鈉2 mL。

1.5手術(shù)前后生理指標(biāo)和血液白細(xì)胞的觀察

分別在術(shù)前0 h（子宮血于插管前收集，同時(shí)收集尾靜脈血）、術(shù)后24，48，72，96，120 h記錄奶牛體溫、呼吸、脈搏和臨床癥狀，同一時(shí)間采取尾靜脈血和子宮血，進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)。應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1卵巢子宮靜脈和子宮角插管操作要領(lǐng)奶牛子宮位于骨盆腔入口頭側(cè)，采用左后肢半仰臥保定，充分暴露術(shù)部。切口應(yīng)盡量靠近恥骨前沿，最大限度的接近子宮角。由于卵巢子宮靜脈位于靜脈叢中，應(yīng)完整分離血管，并做預(yù)置結(jié)扎線。在分離和切開血管前，應(yīng)注意奶牛麻醉狀態(tài)和疼痛反應(yīng)，并做好表面麻醉。PICC插管預(yù)先注入肝素鈉溶液，待剪開血管后，即可順勢(shì)插入，調(diào)整插管方向，檢查血液通暢性，確定無(wú)誤后，即可結(jié)扎，并再次向PCC插管注入肝素鈉溶液，防止血凝。子宮角插管時(shí)，由于子宮黏膜下層發(fā)達(dá)，應(yīng)注意區(qū)分子宮腔和黏膜下層，確保子宮角插管位于子宮腔內(nèi)。做好插管的固定，可借助漿膜肌層的包埋和固定夾，防止插管脫落。手術(shù)插管12頭，子宮角插管術(shù)后一月內(nèi)無(wú)異常，卵巢子宮靜脈插管2頭出現(xiàn)問(wèn)題。其中1頭術(shù)后20 d發(fā)生阻塞，另外1頭由于奶牛磨蹭腹壁外插管，牽拉過(guò)度導(dǎo)致脫落，其余10例保持通暢。

2.2手術(shù)對(duì)奶牛體溫、呼吸和脈搏的影響手術(shù)后24 h奶牛的呼吸次數(shù)出現(xiàn)升高，差異極顯著（P＜0.01），但在術(shù)后48 h后恢復(fù)正常。與手術(shù)0 h奶牛的體溫、脈搏比較，奶牛在術(shù)后24、48、72、96、120 h的體溫、脈搏均差異不顯著（P＞0.05）（見圖2）。

圖2　奶牛體溫、呼吸和脈搏在手術(shù)前后的變化注：與該組0 h比較，**：P＜0.01

2.3手術(shù)對(duì)奶牛外周血和卵巢子宮靜脈血中白細(xì)胞的影響奶牛外周血和子宮血中白細(xì)胞總數(shù)在術(shù)后24 h呈上升趨勢(shì)，然后逐漸下降，但與0 h白細(xì)胞總數(shù)相比，術(shù)后24、48、72、96 h和120 h外周血和子宮血白細(xì)胞總數(shù)均差異不顯著（P＞0.05）（見圖3）。

圖3　奶牛白細(xì)胞總數(shù)在手術(shù)前后的變化

3　討論

血管插管手術(shù)已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床、教學(xué)和科研試驗(yàn)中，比如長(zhǎng)期持續(xù)性藥物輸注、危重病例急救和監(jiān)控、營(yíng)養(yǎng)或藥物代謝規(guī)律、胎兒生長(zhǎng)發(fā)育和疾病發(fā)生機(jī)理研究等［4-9］。

課題組在前期已經(jīng)成功應(yīng)用醫(yī)用硅膠管進(jìn)行山羊卵巢子宮靜脈插管的探討［6］，并應(yīng)用該技術(shù)進(jìn)行了子宮內(nèi)膜炎的研究。由于奶牛體型較大，硅膠管較柔軟，可能會(huì)隨著動(dòng)物體位的改變而彎折，影響采血。同時(shí)，瘤胃蠕動(dòng)力強(qiáng)，卵巢子宮靜脈叢分支多，故該實(shí)驗(yàn)選用醫(yī)用PICC導(dǎo)管植入卵巢子宮靜脈。經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，采用PICC導(dǎo)管插管，可順利導(dǎo)入靜脈叢血管，且該導(dǎo)管具有很好的韌性和硬度，不易發(fā)生折疊阻塞。插入部帶有的翼型固定夾便于固定導(dǎo)管，防止滑脫。PICC已經(jīng)廣泛應(yīng)用于人類醫(yī)學(xué)臨床疾病的診斷和治療，其優(yōu)勢(shì)已得到廣泛認(rèn)可［10-12］，在體外操作時(shí)具有一定的硬度，進(jìn)入體內(nèi)后變?nèi)彳?，不易損傷血管和形成血栓，感染幾率小。采用肝素抗凝封管，可保障收集管暢通，減少阻塞的可能性。炎癥是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素。研究發(fā)現(xiàn)手術(shù)后外周血和子宮血出現(xiàn)一過(guò)性白細(xì)胞升高，但未超出生理范圍，術(shù)前和術(shù)后生理指標(biāo)除呼吸在24 h顯著升高外，其余均差異不顯著，呼吸的升高可能跟手術(shù)刺激有關(guān)，說(shuō)明該手術(shù)方法經(jīng)過(guò)手術(shù)愈合期后，恢復(fù)正常，能夠滿足對(duì)子宮生理和病理研究的需要。同時(shí)子宮角的插管為子宮灌注提供了無(wú)菌通道，減少?gòu)年幍拦嘧⑽廴镜膸茁省Ｊ中g(shù)操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，由于奶牛體型大，腹腔深，所以切口應(yīng)盡量靠近恥骨，便于子宮的牽引和隔離。子宮無(wú)法牽引出腹腔的奶牛，應(yīng)進(jìn)行充分的腹腔內(nèi)隔離，行腹腔內(nèi)卵巢子宮插管，不應(yīng)強(qiáng)行拉出，減少子宮闊韌帶和系膜的撕裂。插管結(jié)束后，為了準(zhǔn)確的定位子宮的位置，應(yīng)將奶牛保定體位轉(zhuǎn)為站立保定，更好的確定子宮在體表的投影，以減少插管在腹腔內(nèi)的纏繞，防止胃腸蠕動(dòng)時(shí)，使插管脫落。術(shù)后要每天檢查切口部位，特別是腹壁出管處，應(yīng)每日涂以抗生素軟膏，抗感染，促進(jìn)愈合。

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Study on themethod of catheterization of utero- ovarian vein and uterinehorn in dairy cattles

WANG Heng1，2，WU Yong-qi1，2，DONG Hui-min1，2，YE Xiao-kang1，2，MENG Xia1，2，LIU Zong-ping1，2，LI Jian-ji1，2
（1.College of Veterinary Medicine，Yangzhou University，Yangzhou 225009，China；2.Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses，Yangzhou 225009，China）

Abstract：Catheterization of utero-ovarian vein and uterine horn were applied on 12 dairy cattle.In the meanwhile，restraint method，anesthesia，cannula selection，operational keypoints and nursing attentions were discussed.The influence of catheterization was evaluated by examination on T，P，R and changes of WBC in peripheral and utero-ovarian vein.The results revealed that T，P and WBC had a transient increase and there was significant increase at 24 h post catheterization.But all indexes recovered quickly to normal physiological ranges.One cannula dropped，one was blocked and samples could be collected from other cattle.The technique of catheterization may provide the basis of study on the physiology and pathology about the bovine uterus.

Key words：Dairy cattle；uterine horn；utero-ovarian vein；catheterization Corresponding author：LI Jian-ji

中圖分類號(hào)：S823.9

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：0529- 6005（2016）03- 0028- 03

收稿日期：2014-07-22

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然基金資助項(xiàng)目（31072176）；江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目（PAPD）；揚(yáng)州大學(xué)中青年骨干教師境外研修資助項(xiàng)目

作者簡(jiǎn)介：王亨（1978-），男，副教授，博士，從事動(dòng)物臨床疫病的研究，E-mai：sdauelww@163.com

通訊作者：李建基，E-mail：yzjjli@163.com