某縣級(jí)醫(yī)院2012
—2014年不同臨床標(biāo)本分離大腸埃希菌ESBLs檢出率及其耐藥性

夏浩海, 王學(xué)敏

(通山縣人民醫(yī)院, 湖北 通山　437600)

·論著·

某縣級(jí)醫(yī)院2012
—2014年不同臨床標(biāo)本分離大腸埃希菌ESBLs檢出率及其耐藥性

夏浩海, 王學(xué)敏

(通山縣人民醫(yī)院, 湖北 通山437600)

[摘要]目的分析某山區(qū)縣級(jí)醫(yī)院大腸埃希菌臨床感染分布及耐藥性，為該區(qū)域臨床合理治療大腸埃希菌感染提供依據(jù)。 方法對(duì)2012—2014年某院臨床送檢的各類(lèi)標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、菌株鑒定與藥敏試驗(yàn)，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)用微量稀釋法初篩,紙片擴(kuò)散法做確證試驗(yàn)；采用 WHONET 5.6及SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果271株大腸埃希菌, 主要分離自中段尿(占26.94%)。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率為49.82%，以痰標(biāo)本檢出率最高(56.52%)，但不同標(biāo)本分離的大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。藥敏結(jié)果顯示，對(duì)青霉素類(lèi)耐藥率最高(>90%)，對(duì)頭孢噻吩和頭孢呋辛的耐藥率>75%，對(duì)阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦敏感性較好(耐藥率<10%)，未發(fā)現(xiàn)對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥的大腸埃希菌，產(chǎn)ESBLs株對(duì)大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率高于非產(chǎn)ESBLs株。結(jié)論分離大腸埃希菌的標(biāo)本主要來(lái)自中段尿，產(chǎn)ESBLs菌株耐藥性更高。

[關(guān)鍵詞]大腸埃希菌; 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶; 臨床分布; 抗藥性，微生物; 耐藥性

[Chin J Infect Control，2016，15(5)：327-329,333]

隨著廣譜和超廣譜抗菌藥物的不合理使用，致病菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性也日趨嚴(yán)重。大腸埃希菌是人類(lèi)腸道最重要的定植菌，也是臨床常見(jiàn)的致病菌，是最常見(jiàn)的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)細(xì)菌之一。2013年 CHINET耐藥監(jiān)測(cè)顯示大腸埃希菌為臨床分離率最高的病原菌，占所有病原菌的19.86%[1]。產(chǎn)ESBLs是大腸埃希菌主要的耐藥機(jī)制，此類(lèi)菌株一般有較高的耐藥性，能達(dá)到有效治療的抗菌藥物較少。本院是鄂南山區(qū)一所綜合性縣級(jí)醫(yī)院，近年來(lái)，抗菌藥物的不規(guī)范使用，尤其是昂貴的廣譜和超廣譜抗菌藥物的不合理使用，導(dǎo)致各種致病菌的耐藥性也日趨嚴(yán)重。因此，分析大腸埃希菌臨床感染分布及耐藥性，尤其是產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌，對(duì)指導(dǎo)本區(qū)域臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物，控制醫(yī)院感染具有重要意義。本研究對(duì)2012—2014年住院及門(mén)診患者送檢的各種標(biāo)本中分離的大腸埃希菌及其耐藥性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1菌株來(lái)源

收集2012年1月—2014年12月某院住院及門(mén)診患者送檢各類(lèi)標(biāo)本分離的大腸埃希菌，剔除同一患者重復(fù)分離株。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603，購(gòu)自湖北省臨床檢驗(yàn)中心。

1.2細(xì)菌鑒定及藥敏

根據(jù)第3版《 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]及梅里埃試劑提供的試劑說(shuō)明書(shū)規(guī)定，革蘭陰性桿菌接種于O/F反應(yīng)管，發(fā)酵型細(xì)菌上梅里埃提供的ID32E板進(jìn)行鑒定和ATB G5板進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，16～24 h后，采用梅里埃ATB Expression型微生物鑒定與藥敏測(cè)試儀測(cè)定，ATB G5藥敏板條的判斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2011版美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI) M100-S21標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.3ESBLs檢測(cè)

按照CLSI 規(guī)定，利用梅里埃ATB G5板條上1 μg/mL的頭孢他啶初篩，初篩陽(yáng)性者，利用30 μg的頭孢他啶、30 μg/10 μg的頭孢他啶/克拉維酸和30 μg的頭孢噻肟、30 μg/10 μg的頭孢噻肟/克拉維酸的藥敏紙片進(jìn)行產(chǎn) ESBLs菌株表型確證實(shí)驗(yàn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

臨床感染標(biāo)本分布及耐藥性采用WHONET 5.6統(tǒng)計(jì)，應(yīng)用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1標(biāo)本來(lái)源分布

2012年1月—2014年12月共送檢各種臨床標(biāo)本9 515份，1 664份標(biāo)本培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為17.49%；分離大腸埃希菌271株，其中 135 株為產(chǎn)ESBLs，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率為49.82%。大腸埃希菌主要分離自中段尿，占26.94%。產(chǎn)ESBLs菌株檢出率以痰標(biāo)本最高(56.52%)，但不同標(biāo)本分離的大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。具體分布情況見(jiàn)表1。

表1　2012—2014年大腸埃希菌及其產(chǎn)ESBLs株標(biāo)本分布

2.2藥敏試驗(yàn)結(jié)果

271株大腸埃希菌對(duì)20種臨床常用抗菌藥物藥敏結(jié)果顯示，對(duì)青霉素類(lèi)耐藥率最高>90%；對(duì)頭孢噻吩和頭孢呋辛的耐藥率>75%；對(duì)阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦敏感性較好，耐藥率均<10%；未檢出耐亞胺培南或美羅培南的大腸埃希菌。除亞胺培南、美羅培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦外，產(chǎn)ESBLs的菌株耐藥性高于非產(chǎn)ESBLs菌株(χ2=9.69～167.99，均P<0.05)。大腸埃希菌對(duì)頭孢西丁的耐藥率低于青霉素類(lèi)和頭孢菌素類(lèi)抗生素(χ2=6.42～217.24，均P<0.05)。大腸埃希菌對(duì)第三代頭孢菌素類(lèi)抗生素中頭孢噻肟的耐藥率高于頭孢他啶(χ2=14.29，P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥情況(株數(shù)，%)

3討論

大腸埃希菌是臨床感染性疾病中最常見(jiàn)致病菌， 其廣泛分布于自然環(huán)境中，可引起泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)，以及傷口感染等，嚴(yán)重時(shí)可引起血流感染。本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌主要分布于中段尿，與黃家祥、岑葉平等[3-4]報(bào)道的結(jié)果一致，在中段尿陽(yáng)性標(biāo)本中占48.67%，說(shuō)明大腸埃希菌是引起泌尿系統(tǒng)感染的主要病原菌。

藥敏結(jié)果顯示，271株大腸埃希菌對(duì)亞胺培南、美羅培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率<10%，對(duì)阿莫西林/克拉維酸、奈替米星和頭孢西丁耐藥率在30%左右，而對(duì)其他被檢測(cè)的抗菌藥物耐藥率均>39%，對(duì)青霉素類(lèi)抗生素的耐藥率>90%，可見(jiàn)本區(qū)域大腸埃希菌耐藥性已經(jīng)十分嚴(yán)峻，可供經(jīng)驗(yàn)性使用的抗菌藥物非常有限。雖然碳青霉烯類(lèi)抗生素治療大腸埃希菌引起的感染效果顯著，但碳青霉烯類(lèi)抗生素的價(jià)格昂貴，且抗菌譜廣，易致菌群失調(diào)造成二重感染[5]，因此，碳青霉烯類(lèi)抗生素應(yīng)作為治療大腸埃希菌感染的最后選擇。

2012—2014年271株大腸埃希菌中135株產(chǎn)ESBLs，檢出率為49.82%， 略低于2013年中國(guó)CHINET關(guān)于大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs檢出率54.00%的報(bào)道[1]， 接近于本省某縣級(jí)醫(yī)院48.75%的報(bào)道[6]，但是高于國(guó)內(nèi)何衛(wèi)平、儲(chǔ)從家等[7-8]低于40%的報(bào)道，可能與本區(qū)域大量使用第三代頭孢類(lèi)抗生素有關(guān)。 頭孢西丁是頭霉素類(lèi)抗生素，具有高度抗β-內(nèi)酰胺酶活性，此也是本研究中大腸埃希菌對(duì)頭孢西丁敏感性高于青霉素類(lèi)和頭孢菌素類(lèi)抗生素的原因。第三代頭孢菌素類(lèi)抗生素中，頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌的耐藥率明顯低于頭孢噻肟，這與我國(guó)主要流行CTX-M型ESBLs有關(guān)[9]，CTX-M型ESBLs對(duì)頭孢噻肟的水解能力明顯強(qiáng)于頭孢他啶。本研究中，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對(duì)大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率高于非產(chǎn)ESBLs株，且表現(xiàn)出多重耐藥性，可能是由于ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo)，攜帶ESBLs編碼質(zhì)粒的菌株往往同時(shí)攜帶AmpC酶，以及氨基糖苷類(lèi)、喹諾酮類(lèi)等抗菌藥物的耐藥基因，而呈現(xiàn)多重耐藥性[10]。

綜上所述，大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥形勢(shì)較為嚴(yán)峻，尤其是產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的高檢出率應(yīng)引起重視。臨床上應(yīng)及時(shí)掌握細(xì)菌耐藥特性，嚴(yán)格按照藥敏結(jié)果指導(dǎo)臨床用藥，合理謹(jǐn)慎使用抗菌藥物。

[參 考 文 獻(xiàn)]

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(本文編輯：文細(xì)毛)

Detection of extended-spectrum β-lactamases and antimicrobial resistance ofEscherichiacoliisolated from different clinical specimens of a county hospital in 2012-2014

XIAHao-hai，WANGXue-min(ThePeople’sHospitalofTongshanCounty,Tongshan437600,China)

[Abstract]ObjectiveTo analyze the distribution and antimicrobial resistance of Escherichia coli (E. coli) causing infection in a county hospital, and provide basis for clinical treatment of E. coli infection. MethodsFrom 2012 to 2014, all kinds of clinical specimens in a hospital were performed bacterial culture, identification， and antimicrobial susceptibility testing； extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) were initially screened by broth microdilution method, and confirmed by disc diffusion method； data were statistically analyzed by WHONET 5.6 and SPSS 19.0 software. Results271 isolates of E. coli were detected, and mainly isolated from midstream urine (26.94%). The detection rate of ESBLs-producing E. coli was 49.82%, most were isolated from sputum specimens ( 56.52%), but there was no significant difference in detection rates of ESBLs-producing E.coli isolated from different specimens (P>0.05). Antimicrobial susceptibility testing results showed that the resistance rate of E.coli to penicillins was the highest (>90%), to cefalotin and cefuroxime were both >75%, susceptibility rates to amikacin and piperacillin / tazobactam were both high (resistance rates<10%), carbapenem-resistant strain was not found, resistance rates of ESBLs-producing strains to most antimicrobial agents were significantly higher than non-ESBLs-producing strains.ConclusionE. coli is mainly isolated from midstream urine specimens, antimicrobial resistance of ESBL-producing strains is more serious.

[Key words]Escherichia coli; extended-spectrum β-lactamase; clinical distribution; drug resistance, microbial; drug resistance

[收稿日期]2015-09-29

[作者簡(jiǎn)介]夏浩海(1979-)，男(漢族)，湖北省通山縣人，主管檢驗(yàn)師，主要從事細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)研究。 [通信作者]夏浩海E-mail:xiahh008@163.com

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2016.05.010

[中圖分類(lèi)號(hào)]R378.2+1

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1671-9638(2016)05-0327-04