自動(dòng)電位滴定測(cè)定馬蹄提取物中多酚類化合物

湯亞芳，黃廣鳳（鎮(zhèn)江高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校，江蘇鎮(zhèn)江212003）

?

自動(dòng)電位滴定測(cè)定馬蹄提取物中多酚類化合物

湯亞芳，黃廣鳳
（鎮(zhèn)江高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校，江蘇鎮(zhèn)江212003）

摘要：建立電位滴定法測(cè)定馬蹄中多酚類化合物含量的定量分析方法。以高錳酸鉀為氧化劑，在強(qiáng)酸性介質(zhì)中，以沒食子酸為參照，用二階微分法確定待測(cè)樣品試液的滴定終點(diǎn)電位，對(duì)馬蹄提取物中的多酚類化合物進(jìn)行自動(dòng)滴定，并與可見分光光度法進(jìn)行對(duì)比。方法的RSD為1.29%（n=5），平均回收率為99.34%。結(jié)果表明，本方法體系可以完成對(duì)多酚類物質(zhì)的快速測(cè)定。

關(guān)鍵詞：自動(dòng)電位滴定；馬蹄；提??；多酚

目前對(duì)多酚類化合物含量的測(cè)定方法有很多，主要有分光光度法、一階導(dǎo)數(shù)吸光光度法、高效液相色譜法和自動(dòng)電位滴定法等。分光光度法測(cè)量快速、靈敏度高，但同一樣品的測(cè)定，受樣品溶液的濃度影響較大［1］。一階導(dǎo)數(shù)吸光光度法可在不加掩蔽劑的情況下，有效地消除一種或多種干擾物的影響，但是計(jì)算干擾物質(zhì)的光譜零交點(diǎn)繁瑣［2］。高效液相色譜法檢測(cè)分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復(fù)性好，定量精度高，應(yīng)用范圍廣，適用于分析大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差的化合物，但價(jià)格昂貴，要用各種填料柱，容量小，分析生物大分子和無機(jī)離子困難，流動(dòng)相消耗大，分析成本高。而自動(dòng)電位滴定法不易受樣品溶液濃度變化的干擾，重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)便、靈敏度高且不易受指示劑終點(diǎn)判斷誤差的影響。馬蹄，為莎草科荸薺屬多年水生草本植物荸薺的地下球莖。其可作水果鮮食，有“土中紅水果”之稱，藥用價(jià)值高，既能達(dá)到保健、治療的目的又是一味美食，正是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)［3］，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)馬蹄的研究頻頻報(bào)道［4-8］，但關(guān)于馬蹄多酚的含量的自動(dòng)電位滴定還少見報(bào)道。本文建立二階微分法的自動(dòng)電位滴定新方法，在最佳試驗(yàn)條件下對(duì)沒食子酸標(biāo)樣及馬蹄提取物多酚類化合物進(jìn)行自動(dòng)測(cè)定，并同可見分光光度法加以比較，建立了自動(dòng)電位滴定的馬蹄多酚測(cè)試方法。

1　材料與方法

1.1馬蹄樣品溶液的制備

取一定量新鮮馬蹄，剔除腐爛者，洗凈后切碎置于60℃的烘箱中，干燥24小時(shí)，干燥后用粉碎機(jī)粉碎，過40目篩備用。稱取5.07 g的粉末，用60%的乙醇以1∶30（g/mL）的料液比在60℃的恒溫水浴中浸提4 h，經(jīng)玻璃砂芯漏斗過濾，將濾液置于250 mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度，定容待用。

1.2終點(diǎn)電位的確定

準(zhǔn)確量取高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL（V1）于50 mL潔凈燒杯中，分別加入10 mL蒸餾水、5 mL硫酸（3 mol/L），將鉑電極和甘汞電極插入液面下，在電磁攪拌下，立即用沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.002 100 g/mL）做滴定劑進(jìn)行電位滴定。記錄消耗滴定劑的體積V與電位值E，用二階微商法計(jì)算出滴定的終點(diǎn)電位。

1.3樣品溶液中多酚類化合物的測(cè)定

準(zhǔn)確量取已準(zhǔn)確標(biāo)定的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL 于50 mL潔凈燒杯中，分別加入10 mL蒸餾水、5 mL 3 mol/L硫酸，以樣品溶液為滴定劑，立即用已設(shè)置好終點(diǎn)電位的電位滴定儀進(jìn)行自動(dòng)滴定，并記錄消耗滴液的體積，計(jì)算樣品溶液中多酚類化合物的量。重復(fù)操作5次，同時(shí)做空白試驗(yàn)。

3　結(jié)果與討論

3.1滴定終點(diǎn)的判定

取2個(gè)平行樣，按照試驗(yàn)步驟操作，滴定速度設(shè)為1滴/s，并均在終點(diǎn)跳出后再用手動(dòng)滴加幾滴。根據(jù)數(shù)據(jù)繪制E/V曲線，如圖1。

圖1　E-V曲線Fig.1 E-V curved shape

圖1可知，當(dāng)?shù)稳肴芤后w積為3.00 mL時(shí)，開始發(fā)生明顯的電位突躍，但E-V曲線法較平坦，突躍不明顯，而在遠(yuǎn)離滴定終點(diǎn)處，滴定劑體積（V）的變化所引起的電池電動(dòng)勢(shì)（E）變化很小，越接近滴定終點(diǎn)，所引起的變化越大，即在滴定終點(diǎn)前ΔE/ΔV逐漸增大，到滴定終點(diǎn)時(shí)，達(dá)最大值，過滴定終點(diǎn)又逐漸變小。最后制作ΔE2/ΔV2-V曲線法，如圖2。

圖2　二階微商曲線Fig.2 Second derivative Δ2E/ΔV2-V shape

結(jié)合圖2電位突躍值，選取滴定液體積為3.30 mL～3.40 mL時(shí)的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，即可求出滴定終點(diǎn)的體積，對(duì)應(yīng)的終點(diǎn)電位E為-6.67 mV。

3.2樣品準(zhǔn)確度的測(cè)定

以樣品溶液作為滴定劑，滴定高錳酸鉀的標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)操作5次，所用滴定劑體積為20.66 mL，由5次滴定試驗(yàn)所得到的馬蹄樣品溶液中總多酚類化合物含量濃度的平均值為0.342 g/L，所得測(cè)定結(jié)果的RSD為1.29%，結(jié)果精密度滿意。

取濃度不同的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，用可見分光光度法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖3　沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.3 Standard curve of gallic acid

測(cè)得樣品溶液的吸光度為0.105，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，得到樣品溶液濃度為1.62×10-2g/mL，與自動(dòng)電位滴定法測(cè)得的1.61×10-2g/mL非常接近，說明本方法的準(zhǔn)確性符合要求。

3.3回收率的測(cè)定

在已知多酚化合物含量的樣品液中分別加入0.010、0.015、0.020、0.025、0.030 g干燥的沒食子酸做回收率試驗(yàn)，結(jié)果顯示，使用自動(dòng)電位滴定儀測(cè)定還原糖含量的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，回收率在96.7%～100.3%之間，平均回收率為99.34%，說明該方法可以得到較好的分析結(jié)果。

4　結(jié)論

本文建立的自動(dòng)電位滴定法，由于是以儀器記錄電位變化來確定終點(diǎn)，故不受樣品試液顏色的干擾，5次平行測(cè)定的RSD為1.29%，平均回收率為99.34%，具有很好的準(zhǔn)確度和精密度，可有效地彌補(bǔ)高錳酸鉀滴定時(shí)難以用指示劑確定終點(diǎn)的缺陷；另外，在有沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液做參比的情況下，不需對(duì)高錳酸鉀進(jìn)行標(biāo)定，省去測(cè)定步驟，該方法簡(jiǎn)便、靈敏、重現(xiàn)性好，可用于果蔬中多酚類化合物含量的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)：

［1］孫宏，張澤.分光光度法測(cè)定天然多酚類化合物含量的研究進(jìn)展［J］.生物質(zhì)化學(xué)工程，2008，42（3）：55-58

［2］張美榮，王鵬，王林.一階導(dǎo)數(shù)吸光光度法直接測(cè)定水和食品中鈣［J］.理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè)，2004，40（6）：324-328

［3］朱寶鼎.水生蔬果-荸薺［J］.美食，2010，11（11）：52-53

［4］劉旭，周忠光，安柏松，等.荸薺藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)藥信，2010，27（6）：106-108

［5］潘麗，朱志賢，鄭露，等.荸薺主要病害的研究進(jìn)展［J］.長(zhǎng)江蔬菜，2010，27（14）：10-14

［6］郝淑賢，劉欣，黃卉，等.荸薺英提取物抑菌特性初探［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，27（3）：115-117

［7］蔡佳燕，壽森炎.荸薺組織培養(yǎng)研究進(jìn)展［J］.北方園藝，2008，32（6）：72-74

［8］林慶宇，張志，魏小平，等.自動(dòng)電位滴定法測(cè)定馬蹄中的總還原糖［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（26）：16450-16451

Determination of Polyphenols in Chinese Water Chestnut Extraction by Automatic Potentiometric Titration

TANG Ya-fang，HUANG Guang-feng
（Zhenjiang Vocational Technical College，Zhenjiang 212003，Jiangsu，China）

Abstract：The automatically potentiometric titration was used to determine polyphenols in Chinese Water chestnut. The sample was tested used potassium permanganate as an oxidant in strong acid medium，gallic acid as reference，and the result was compared with the visible spectrophotometry. The RSD of method was 1.29% （n=5），and the average recovery was 99.34%. The results showed that the methodology can be completed on the rapid determination of polyphenols.

Key words：automatic potentiometric titration；Chinese Water Chestnut；extraction；polyphenols

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.09.039

作者簡(jiǎn)介：湯亞芳（1974—），女（漢），講師，碩士，研究方向：光譜分析。

收稿日期：2015-01-30