一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究

邱利文

長江大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖北 荊州 434025；長江三峽生態(tài)園林有限公司，湖北 宜昌 443000

劉樂承

(長江大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖北 荊州 434025)

張國禹，黃桂云

(長江三峽生態(tài)園林有限公司，湖北 宜昌 443000)

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一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究

邱利文

長江大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖北 荊州 434025；長江三峽生態(tài)園林有限公司，湖北 宜昌 443000

劉樂承

(長江大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖北 荊州 434025)

張國禹，黃桂云

(長江三峽生態(tài)園林有限公司，湖北 宜昌 443000)

[摘要]以矮生一品紅(Euphorbia pucherima)“天鵝絨”的帶芽莖段為外植體，研究了影響叢生芽誘導(dǎo)的組培的主要因素。結(jié)果表明：適合帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L+活性炭Ac 0.3%+瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L pH為5.8，萌芽率高達(dá)93.3%，有效芽數(shù)2～3個，芽長平均2.7cm。

[關(guān)鍵詞]一品紅(Euphorbia pucherima)；帶芽莖段；叢生芽

一品紅(Euphorbiapucherima)又稱圣誕紅、象牙紅、老來嬌，是大戟科大戟屬常綠、半常綠灌木，原產(chǎn)墨西哥和熱帶非洲，是世界著名的觀賞花卉之一[1]，我國各地均有栽培。一品紅花期適逢圣誕節(jié)、元旦、春節(jié)，且花色艷麗，是理想的冬季室內(nèi)擺放裝飾的節(jié)日用花。目前，市場需求較多的為近年從國外引進(jìn)的一些矮生優(yōu)良品種，其株高約為30～50cm，株型緊湊，分株多，苞片大，苞片顏色種類多，耐低溫能力強(qiáng)，不易掉葉，連續(xù)多年在我國花卉市場上暢銷且供不應(yīng)求，深受人們的青睞[2]。由于一品紅結(jié)籽少，尤其是一些觀賞價值較高的矮化、重瓣品種基本不結(jié)實，所以，目前園藝生產(chǎn)上多采用綠枝扦插繁殖，但由于其體內(nèi)含有豐富的白色乳汁，干后呈膠膜狀，造成導(dǎo)管吸水不良，導(dǎo)致扦插繁殖速度慢，且莖段易腐爛，大大降低了一品紅扦插苗成活率，而且得到的插穗苗質(zhì)量不能均勻一致。一些優(yōu)良品種由于枝條少，引進(jìn)初期數(shù)量有限，也在一定程度上限制了優(yōu)良品種的繁殖及普及。若能利用組培方法實現(xiàn)快速繁殖，則可在短期內(nèi)大量繁殖種苗，帶來較高的經(jīng)濟(jì)利益[1～3]。目前，一品紅的盆栽越來越受到業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注，繁殖方法上主要采用一品紅莖段、葉柄、嫩芽等培育出了一品紅的胚狀體或不定芽，但這樣獲得的種苗遺傳性不穩(wěn)定，不能更好地保留母本的優(yōu)良特性[1～6]，而利用帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽的組培方法培育出的幼苗遺傳特性較好，能更好地保留母本的優(yōu)良特性。為此，本研究探討了帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽不同分裂素與生長素的激素組合的影響，這對一品紅快速繁育及工廠化育苗具有重要意義。

1材料與方法

本研究于2011年3月至2012年6月在三峽苗圃研究中心組培實驗室進(jìn)行。組培室內(nèi)溫度為(24±2)℃，濕度為(65±5)%，光照強(qiáng)度為1800～2500lx，光照時間為13h。

1.1試驗材料

供試材料選自三峽苗圃研究中心溫室內(nèi)生長健壯二年生苗，其品種為“天鵝絨”，在采集外植體前10d對一品紅盆栽苗施用水溶性水肥(N︰P2O5︰K2O為20︰10︰20)500倍液。選取健壯無病蟲害幼嫩的帶芽莖段為外植體，將外植體剪成長1.0～1.5cm，去除葉片待用。

1.2試驗方法

1.2.1外植體處理

將剪好的外植體先用洗衣粉溶液1000倍液浸泡5min，再用流水沖洗30min，涼干后待用。在接種室超凈工作臺上將預(yù)處理好的外植體用75%酒精消毒30s，然后用無菌水沖洗3次，再用0.1%HgCl2消毒12min，用無菌水沖洗5次，分別接種于基本培養(yǎng)基MS+活性炭Ac0.3%+激素組合+瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L、pH為5.6的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

1.2.2誘導(dǎo)帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽

表1　因素水平設(shè)計表

表2　L8(4×24)正交表

試驗采用三因素混合正交試驗設(shè)計，因素水平詳見表1，L8(4×24)正交設(shè)計見表2，共8個處理，添加6-BA、2.4-D、NAA不同濃度組合，求得帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽的最優(yōu)配方。將外植體剪成1.0～1.5cm帶芽的莖段，每瓶接種3個，試驗重復(fù)3次，接種7d開始，每隔10d調(diào)查1次芽的萌發(fā)、生長數(shù)量及芽長，40～50d后進(jìn)行統(tǒng)計分析，得出最優(yōu)組合，并將最優(yōu)組合再在實驗中檢驗。

1.2.3數(shù)據(jù)的觀測與處理

試驗數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，百分率的數(shù)據(jù)先經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析和多重比較。

2結(jié)果與分析

2.1萌芽率

方差分析表明：6-BA、生長素種類分別對外植體萌芽率有極顯著和顯著的影響，而生長素濃度對外植體萌芽率無顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)表明：6-BA濃度1.2mg/L萌芽率最高達(dá)64.97%，極顯著地高于其他3個濃度的萌芽率；多重比較結(jié)果(表4)表明：激素種類NAA的萌芽率達(dá)58.38%，顯著地高于2.4-D的萌芽率，理論上推測激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05～0.10mg/L。試驗盡管沒有考慮因素之間的交互作用，但并不能排除相互作用，故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5，結(jié)果表明激素組合配方P6萌芽率顯著高于P1、P2、P3、P4、P5、P7、P8，萌芽率以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L)較好(圖1a)。

表3　6-BA濃度水平間的多重比較

注：表中同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示在5%水平上差異顯著，不同大寫字母表示在1%水平差異顯著。表4、表5同。

表4　生長素種類間的多重比較

表5　組合間的多重比較

圖1　一品紅帶芽莖段叢生芽誘導(dǎo)

2.2有效芽數(shù)

方差分析表明：6-BA對外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)有顯著的影響，而生長素種類和濃度對外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)無顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)說明：6-BA濃度1.2mg/L外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)平均達(dá)3.0個，顯著地高于其他3個濃度的有效芽數(shù)，理論上推測激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05～0.10mg/L或6-BA 1.2mg/L+2.4-D 0.05～0.10mg/L。試驗盡管沒有考慮因素之間的交互作用，但并不能排除相互作用，故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5，結(jié)果表明激素組合配方P5、P6有效芽數(shù)顯著高于P1、P2、P3、P4、P7、P8，有效芽數(shù)以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L和6-BA 1.2mg/L，2.4-D 0.1mg/L)較好(圖1b)。

2.3芽長

方差分析表明：6-BA對外植體萌發(fā)的芽長有顯著的影響，而生長素種類和濃度對外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)無顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)表明：6-BA濃度1.2mg/L外植體萌發(fā)芽長平均達(dá)1.9cm，顯著地高于其他3個濃度的萌發(fā)芽長，理論上推測激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05～0.10mg/L或6-BA 1.2mg/L+2.4-D 0.05～0.10mg/L。試驗盡管沒有考慮因素之間的交互作用，但并不能排除相互作用，故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5，結(jié)果表明激素組合配方P5、P6芽長顯著高于P1、P2、P3、P4、P7、P8，萌發(fā)的芽長以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L和6-BA 1.2mg/L，2.4-D 0.1mg/L)較好(圖1c)。

由此可見，以萌芽率為主要指標(biāo)，同時參考有效芽數(shù)和芽長，且生長勢表現(xiàn)較佳，一品紅莖段誘導(dǎo)叢生芽以激素組合6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L較好。

3討論

1)在一品紅帶芽莖段組培研究中，植物生長調(diào)節(jié)劑的研究多集中外源激素的使用上，如在叢生芽增殖研究中主要研究是的細(xì)胞分裂素，外植體愈傷組織的誘導(dǎo)方面，使用較高濃度生長素，以誘導(dǎo)脫分化和促進(jìn)愈傷組織的生長[4]，在帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽中應(yīng)重點(diǎn)研究生長素與分裂素的用量，調(diào)整6-BA與NAA添加的比例，促進(jìn)帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽的萌芽率，有利于有效芽分化，促進(jìn)芽生長。

2)在一品紅組織培養(yǎng)中，應(yīng)注意選擇適宜的外植體和合理的消毒時間，以帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽較容易獲得無菌苗，有利于優(yōu)良品種的推廣，但同一種品種不同部位帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生發(fā)生的能力的大小有待進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]顧敏燕，孫莉，鄭淑萍.一品紅組培快繁及配套移栽技術(shù)研究[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2014，(7)：160～162.

[2]邵元健，周蔣陳.一品紅組織培養(yǎng)研究[J].北方園藝，2012，(2)：127～129.

[3]郭海濱，張?zhí)旖。鯐岳?一品紅組培苗快繁技術(shù)的研究[J].甘肅農(nóng)業(yè)科技，2011,(5)：16～18.

[4]張穎，王曉立.一品紅組培養(yǎng)研究[J].北方園藝，2011，(24)：155～157.

[5]石峰.一品紅組培技術(shù)研究[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，(5)：57.

[6]張立磊，崔惠，楊和連.一品紅組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)研究[J].廣西園藝，2004，5(3)：2～3.

[收稿日期]2015-10-14

[作者簡介]邱利文(1981-)，男，碩士生，研究方向為三峽庫區(qū)特有珍稀植物保護(hù)與繁育。通信作者：劉樂承， lchliu18@yangtzeu.edu.cn。

[中圖分類號]Q813；Q949.753.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1673-1409(2016)03-0033-04

[引著格式]邱利文，劉樂承，張國禹，等.一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究[J].長江大學(xué)學(xué)報(自科版) ，2016，13(3)：34～36.