ELISA法和化學(xué)發(fā)光法對(duì)血清中HIV-1HIV-2抗體、梅毒抗體和丙肝抗體的檢測(cè)意義

張巧安

(漢川市人民醫(yī)院，湖北　漢川　431600)

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ELISA法和化學(xué)發(fā)光法對(duì)血清中HIV-1HIV-2抗體、梅毒抗體和丙肝抗體的檢測(cè)意義

張巧安

(漢川市人民醫(yī)院，湖北漢川431600)

摘要：目的探討分析ELLSA法(酶聯(lián)免疫吸附法)和化學(xué)發(fā)光法對(duì)血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體和丙抗體的臨床檢測(cè)意義。方法將382份臍血作為研究分析對(duì)象，分別采用酶聯(lián)免疫吸附和化學(xué)發(fā)光法對(duì)所選標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，包含丙肝抗體、梅毒抗體、HIV-1/HIV-2抗體檢測(cè)。結(jié)果采用ELLSA檢測(cè)后HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體陽(yáng)性率分別為0.52%、0.79%、1.05%。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體3種檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為0.79%、1.05%、1.31%。標(biāo)準(zhǔn)抗體品梯度稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)，將此3種抗體稀釋程度為10 pg/mL,三組抗體采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果均為陽(yáng)性，采用酶聯(lián)免疫吸附方式進(jìn)行檢測(cè)的只有梅毒抗體呈陽(yáng)性，其余兩項(xiàng)均為陰性。結(jié)論化學(xué)發(fā)光法作為臨床進(jìn)行血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體檢測(cè)的首選方案，此檢測(cè)方式具有更高的靈敏性。

關(guān)鍵詞：酶聯(lián)免疫吸附法；化學(xué)發(fā)光法；血清；HIV-1/HIV-2抗體；梅毒抗體；丙肝抗體

進(jìn)行血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體等3種檢測(cè)時(shí)較常用酶聯(lián)免疫試驗(yàn)，為提高檢測(cè)的敏感性和特異性，漢川市人民醫(yī)院采用化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測(cè)血液標(biāo)本。本文選取漢川市人民醫(yī)院2015年3月至2015年5月期間收集的382份臍血作為研究分析對(duì)象，采用回顧分析的方式，意在探討ELLSA法(酶聯(lián)免疫吸附法)和化學(xué)發(fā)光法對(duì)血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體和丙抗體的臨床檢測(cè)意義[1-2]。

1資料及方法

1.1一般資料

選取漢川市人民醫(yī)院2015年3月至2015年5月期間收集的382份新生兒臍血作為研究分析對(duì)象，包含男性患兒201例，占比為52.62%，女性患兒181例，占比為47.38%。

1.2方法

酶聯(lián)免疫吸附法試劑由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司進(jìn)行提供，化學(xué)發(fā)光試劑由美國(guó)雅培公司進(jìn)行提供，i2000型化學(xué)發(fā)光法儀器使用美國(guó)生產(chǎn)品。

所采集的血液標(biāo)本均放置在零下二十度的冰箱中進(jìn)行保存，待檢測(cè)前方才取出，在溫室進(jìn)行解凍，檢測(cè)相關(guān)操作按照儀器和試劑盒的使用說(shuō)明進(jìn)行操作。

2結(jié)果

采用酶聯(lián)免疫吸附的方式進(jìn)行檢測(cè)，其HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體3種檢測(cè)的陽(yáng)性率詳見(jiàn)表1。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體3種的陽(yáng)性率詳見(jiàn)表2。

表1　酶聯(lián)免疫吸附方式檢測(cè)HIV-1/HIV-2抗體、

表2　化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HIV-1/HIV-2抗體、

將兩種方式所檢測(cè)出的結(jié)果進(jìn)行分析后得知，酶聯(lián)免疫吸附方式所檢測(cè)出為陽(yáng)性的采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果仍為陽(yáng)性，同時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)抗體品梯度稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)，將此3種抗體稀釋程度為10 pg/mL,三組抗體采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果均為陽(yáng)性，采用酶聯(lián)免疫吸附方式進(jìn)行檢測(cè)的只有梅毒抗體呈陽(yáng)性，其余兩項(xiàng)均為陰性。

3兩種檢測(cè)方式分析

3.1ELISA法

ELISA法中文名稱為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，指固相載體的表面吸附已知的抗體或抗原，使酶標(biāo)記的抗體或抗原反應(yīng)在固相表面所進(jìn)行的技術(shù)[2]。此項(xiàng)技術(shù)多用于特異性抗體和大分子抗原等的檢測(cè)中，同時(shí)具有一定的優(yōu)勢(shì)，如載體標(biāo)準(zhǔn)化的難度較低、檢測(cè)速度較快、靈敏性高、操作簡(jiǎn)單等等。此項(xiàng)技術(shù)的基本原理為利用抗體或抗原所存在的特異反應(yīng)將酶和待測(cè)物進(jìn)行連接，底物和酶會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的顏色變化，則進(jìn)行定量測(cè)定，其測(cè)定的對(duì)象為抗原或抗體。

3.2化學(xué)發(fā)光法

化學(xué)發(fā)光狀況屬于自然現(xiàn)象中較為常見(jiàn)的一種，化學(xué)發(fā)光法指利用化學(xué)發(fā)光來(lái)測(cè)定具有化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的抑制劑、催化劑、反應(yīng)物、增敏劑，以及偶合反應(yīng)中的增敏劑、催化劑、反應(yīng)物的方式[3]。其基本原理為發(fā)光系統(tǒng)和免疫反應(yīng)兩者進(jìn)行結(jié)合，從而對(duì)抗原抗體進(jìn)行檢測(cè)。

4討論

本文中所列舉的382份血液標(biāo)本，采用兩種方式進(jìn)行檢測(cè)HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體，其結(jié)果表明,化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)其較低陽(yáng)性狀況，而采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果有可能出現(xiàn)陰性狀況，基本可以證明，化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法相比，前者的敏感性更高。同時(shí)，化學(xué)發(fā)光法所檢測(cè)出值小于何數(shù)時(shí)標(biāo)本呈陽(yáng)性，而采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行測(cè)定標(biāo)本有可能出現(xiàn)陰性的情況。

綜上所述，臨床在進(jìn)行血清中HIV-1/HIV-2抗體、梅毒抗體、丙肝抗體檢測(cè)時(shí)，可將化學(xué)發(fā)光法作為首選檢測(cè)方案，此檢測(cè)方式與酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方式進(jìn)行比較具有更高的靈敏性，存在較大的臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]倪曉媚,徐成芬,曾永,等.ELISA檢測(cè)HIV抗體中臨界值質(zhì)控血清的制備[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2014,26(4):431-432.

[2]趙曉飛,張彩榮,劉曉娟,等.表達(dá)HIV-1 gag蛋白的重組乳酸乳球菌誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2014,30(11):1142-1145.

[3]張貴強(qiáng),董娜,王玉霞,等.朝鮮淫羊藿多糖對(duì)HIV-1包膜蛋白質(zhì)gp120的免疫佐劑活性[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,2013,27(6):959-965.

The Significance of Detection of ELISA Method and Chemical Luminescence Method for Serum HIV-1HIV-2 Antibody, Syphilis Antibody and Hepatitis C Antibodies

ZHANG Qiaoan

(Hanchuan People’s Hospital, Hubei Hanchuan 431600, China)

Abstract：ObjectiveTo probe into the clinical detection significance of ELLSA method (ELISA) and chemical luminescence method for HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody and antibody in serum. Methods382 part of the cord blood were selected as the research object,they were respectively measured by enzyme linked immunosorbent assay and chemical luminescence method of the samples were detected and contains anti HCV, syphilis antibody and HIV-1/HIV-2 antibody detection. ResultsThe ELLSA after the detection of HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody, hepatitis C antibody positive rates were 0.52%, 0.79%, 1.05%. By chemical luminescent method to detect the HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody, hepatitis C antibody three detection positive rate were respectively 0.79% and 1.05% and 1.31%. In addition, the dilution of the standard antibody was detected, and the dilution of the three antibodies was 10pg/ml, and the three groups were detected by chemical. luminescence method. The results were positive, and the other two were negative. ConclusionThe chemical luminescence law as a clinical in the preferred option for serum antibody HIV-1/HIV-2, syphilis antibody, HCV antibody detection, which this detection method have higher sensitivity.

Key words:ELISA; chemical luminescence; serum; HIV-1/HIV-2 antibody; syphilis antibody; hepatitis C antibody

收稿日期：2015 - 10 - 08

中圖分類號(hào)：R 446.61

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-446X(2016)05-0017-03