丙泊酚與七氟醚麻醉對(duì)圍手術(shù)期患者外周血輔助性T淋巴細(xì)胞分化的對(duì)比研究

阮振華， 陳　誠(chéng)， 錢(qián)　沂， 沙夕林

1.江蘇省如皋市人民醫(yī)院麻醉科，如皋　226500 2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院骨科，如皋　226500 3.江蘇省如皋市人民醫(yī)院感染管理科，如皋　226500 4.江蘇省如皋市人民醫(yī)院胸外科，如皋　226500

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·論著·

丙泊酚與七氟醚麻醉對(duì)圍手術(shù)期患者外周血輔助性T淋巴細(xì)胞分化的對(duì)比研究

阮振華1， 陳誠(chéng)2， 錢(qián)沂3， 沙夕林4*

1.江蘇省如皋市人民醫(yī)院麻醉科，如皋226500 2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院骨科，如皋226500 3.江蘇省如皋市人民醫(yī)院感染管理科，如皋226500 4.江蘇省如皋市人民醫(yī)院胸外科，如皋226500

[摘要]目的： 探討丙泊酚與七氟醚麻醉下輔助性T淋巴細(xì)胞(helper T lymphocytes，Th)分化的差異性。方法： 選擇2010年10月—2015年1月?lián)衿谛醒甸g盤(pán)突出癥手術(shù)患者60例，隨機(jī)分為丙泊酚全憑靜脈麻醉組(丙泊酚麻醉組)和七氟醚吸入麻醉組(七氟醚麻醉組)，各30例。所有患者行無(wú)創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓監(jiān)測(cè)。于麻醉前、麻醉后、手術(shù)開(kāi)始前、手術(shù)開(kāi)始后、術(shù)后1 d采集外周靜脈血，檢測(cè)各組患者T細(xì)胞對(duì)γ-干擾素、白細(xì)胞介素4的表達(dá)，測(cè)定外周靜脈血中Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞的百分率，及Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞的比值。結(jié)果： 2組患者無(wú)創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。丙泊酚麻醉組患者術(shù)后1 d外周靜脈血Th1細(xì)胞百分率明顯高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組患者不同時(shí)間點(diǎn)外周靜脈血Th2細(xì)胞百分率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；丙泊酚麻醉組患者術(shù)后1 d外周靜脈血Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞比值高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論： 與七氟醚相比，丙泊酚能夠促進(jìn)Th細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化，對(duì)圍手術(shù)期患者具有一定的免疫保護(hù)作用。

[關(guān)鍵詞]輔助性T淋巴細(xì)胞；分化；麻醉；丙泊酚；七氟醚

圍手術(shù)期免疫功能的變化對(duì)手術(shù)患者的預(yù)后有著重要的影響。麻醉可以通過(guò)降低創(chuàng)傷手術(shù)的應(yīng)激反應(yīng)，間接影響機(jī)體的免疫功能；而麻醉藥物也作為一種異物或抗原直接作用于機(jī)體的免疫活性細(xì)胞，從而使患者機(jī)體免疫功能發(fā)生改變。手術(shù)應(yīng)激增加了輔助性T淋巴細(xì)胞2(helper T lymphocyte 2，Th2)的分化，減少了輔助性T淋巴細(xì)胞1(helper T lymphocyte 1，Th1)的分化，從而使Th1/Th2的比例下降，細(xì)胞免疫功能受到抑制，不利于患者康復(fù)。不同的麻醉方法對(duì)應(yīng)激反應(yīng)的控制不同[1]，因此，對(duì)免疫功能的影響也不同。丙泊酚全憑靜脈麻醉是近年來(lái)應(yīng)用較多的麻醉方法。本研究通過(guò)觀察丙泊酚全憑靜脈麻醉對(duì)輔助性T淋巴細(xì)胞(helper T lymphocyte，Th)分化功能的影響，并與七氟醚吸入麻醉比較，以探討丙泊酚全憑靜脈麻醉對(duì)圍手術(shù)期患者免疫功能的影響。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2010年10月—2015年1月在江蘇省如皋市人民醫(yī)院擇期行腰椎間盤(pán)突出癥手術(shù)患者60例，美國(guó)麻醉醫(yī)師協(xié)會(huì)(American Society of Anesthesiologists，ASA)分級(jí)Ⅰ級(jí)。將患者隨機(jī)分為丙泊酚全憑靜脈麻醉組(丙泊酚麻醉組)和七氟醚吸入麻醉組(七氟醚麻醉組)，各30例。丙泊酚麻醉組男性18例，女性12例，年齡25～60歲，中位年齡55歲；七氟醚麻醉組男性18例，女性12例，年齡25～60歲，中位年齡56歲?；颊咝g(shù)前均無(wú)麻醉前用藥，術(shù)前無(wú)嚴(yán)重的心、肺、肝、腎、腦等系統(tǒng)性疾病，無(wú)感染、腫瘤及免疫系統(tǒng)等疾病，近期無(wú)輸血史，未接受免疫制劑治療。本研究經(jīng)江蘇省如皋市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并與患者簽署知情同意書(shū)。

1.2麻醉方法丙泊酚麻醉組采用丙泊酚靶控輸注5 μg/mL，靜脈注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨(0.2 mg/kg)進(jìn)行麻醉誘導(dǎo)；麻醉維持采用丙泊酚靶控輸注4 μg/mL及間斷靜脈注射舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨。七氟醚麻醉組吸入七氟醚及靜脈注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨(0.2 mg/kg)進(jìn)行麻醉誘導(dǎo)，麻醉維持采用吸入七氟醚及間斷靜脈注射舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨。2組舒芬太尼、苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨的量按照腦電雙頻指數(shù)(bispectral index，BIS)值進(jìn)行調(diào)整，舒芬太尼每次追加量0.3 μg/kg，苯磺酸順式阿曲庫(kù)銨每次追加量0.03 mg/kg， 使BIS值維持在50～60。

1.3患者一般情況監(jiān)測(cè)患者手術(shù)期間均行無(wú)創(chuàng)血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓監(jiān)測(cè)。

1.4免疫指標(biāo)測(cè)定分別于麻醉前(T1)、麻醉后(T2)、手術(shù)開(kāi)始前(T3)、手術(shù)開(kāi)始后(T4)、術(shù)后1 d(T5)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集外周靜脈血5 mL，加肝素抗凝，取1 mL經(jīng)無(wú)血清RPMI 1640培養(yǎng)液以等體積稀釋后加PMA及鈣離子通道激活劑，于37℃、5%CO2溫箱中孵育4 h后，加入藻紅蛋白(PE)標(biāo)記的抗人CD3單克隆抗體(北京同立海源生物科技有限公司)及抗人CD8單克隆抗體(北京同立海源生物科技有限公司)，避光室溫孵育30 min，磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline，PBS)清洗2遍后，以1 000 r/min離心5 min，加入紅細(xì)胞裂解液作用15 min后，用PBS清洗2次，加入PE標(biāo)記的抗γ-干擾素(interferon-γ，IFN-γ)抗體(美國(guó)Sigma公司)及異硫氰酸熒光素標(biāo)記的抗白細(xì)胞介素-4(interleukin-4，IL-4)抗體(美國(guó)Sigma公司)，室溫孵育30 min后，PBS清洗、重懸后上機(jī)檢測(cè)。以CD3+CD8-IFN-γ+標(biāo)識(shí)Th1細(xì)胞，以CD3+CD8-IL-4+標(biāo)識(shí)Th2細(xì)胞，計(jì)算Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞所占的百分比，重復(fù)檢測(cè)5次，并計(jì)算Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞的比值。

2結(jié)果

2.12組患者一般情況2組患者圍手術(shù)期血壓、心率、脈搏血氧飽和度、呼氣末二氧化碳分壓比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞百分比及其比值的比較丙泊酚麻醉組患者T5時(shí)間點(diǎn)外周靜脈血Th1細(xì)胞百分比高于七氟醚麻醉組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組患者T1～T5時(shí)間點(diǎn)外周靜脈血Th2細(xì)胞百分比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；丙泊酚麻醉組患者T5時(shí)間點(diǎn)外周靜脈血Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞比值與七氟醚麻醉組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1　2組患者不同時(shí)間點(diǎn)Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞百分比及Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞比值的比較 　n=30,

*P<0.05與七氟醚麻醉組比較

3討論

圍手術(shù)期免疫功能的變化對(duì)外科手術(shù)患者的預(yù)后有非常重要的影響[2]。外科手術(shù)后患者的膿毒血癥以及繼發(fā)的多器官功能障礙綜合征，是外科重癥監(jiān)護(hù)病房所面臨的棘手問(wèn)題，也是術(shù)后患者的主要死亡原因之一[3]。另外，麻醉藥物作為一種異物直接作用于患者機(jī)體的免疫活性細(xì)胞，從而改變了患者的免疫功能。

丙泊酚全憑靜脈麻醉和七氟醚吸入麻醉是臨床常用的2種全身麻醉方式。丙泊酚起效時(shí)間快，而維持時(shí)間短，持續(xù)輸注也無(wú)明顯蓄積，具有蘇醒快而完全，不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)，目前廣泛應(yīng)用于臨床。丙泊酚對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用十分復(fù)雜。需要指出的是，T淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)特異性免疫的細(xì)胞，活化機(jī)制已經(jīng)成為免疫學(xué)研究的熱點(diǎn)[4]。CD4+T細(xì)胞又稱Th細(xì)胞，該細(xì)胞的表型為CD3+CD4+CD8-，是一種十分受人關(guān)注的機(jī)體免疫效應(yīng)細(xì)胞。Th細(xì)胞在特異性抗原的刺激或在其他細(xì)胞因子的作用下會(huì)分化成Th1和Th2細(xì)胞。Th1、Th2細(xì)胞的極化問(wèn)題是目前研究的熱點(diǎn)?；颊呗樽砗蟀l(fā)生的Th1/Th2失衡問(wèn)題也已受到人們的關(guān)注。本研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚能增加Th1細(xì)胞的百分比，但對(duì)于Th2細(xì)胞方向分化影響卻不明顯，結(jié)果導(dǎo)致Th1細(xì)胞/Th2細(xì)胞比值的增大，說(shuō)明丙泊酚影響Th細(xì)胞的分化，并且促使其向Th1方向分化，最終誘發(fā)Th2極化效應(yīng)，機(jī)體的這種細(xì)胞效應(yīng)維護(hù)了圍手術(shù)期的免疫功能平衡。Th細(xì)胞被激活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制比較復(fù)雜，目前丙泊酚影響Th細(xì)胞分化作用的機(jī)制尚不清楚。

麻醉藥物能夠作為異物或抗原影響患者機(jī)體的免疫功能，所以麻醉藥物的合理選擇對(duì)患者免疫功能的維持具有重要的意義。本研究證明，丙泊酚較七氟醚能促進(jìn)Th細(xì)胞向Th1方向分化，對(duì)患者的免疫功能具有保護(hù)作用。

參考文獻(xiàn)

[1]Kalajdzija M,Cero I,Prnjavorac B,et al.Influence of clonidine on the hemodynamic stability and stress response in the course of surgery on general anesthesia[J].Med Arh,2011,65(4):210-212.

[2]畢振華,任波,董剛,等.丙泊酚聯(lián)合瑞芬太尼麻醉肝硬化患者圍手術(shù)期免疫功能的觀察[J].臨床麻醉學(xué)雜志,2013,29(3):232-234.

[3]Mariappan P,Smith G,Moussa SA,et al.One week of ciprofloxacin before percutaneous nephrolithotomy significantly reduces upper tract infection and urosepsis:a prospective controlled study[J].BJU Int,2006,98(5):1075-1079.

[4]姜曼,許桂蓮,黎萬(wàn)玲,等.脫脂棉及尼龍棉柱分離純化T淋巴細(xì)胞的比較研究 [J] .免疫學(xué)雜志,2003,19(4):309-311.

[本文編輯]姬靜芳

Comparsion of propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia on differentiation of peripheral helper T lymphocytes in perioperative patients

RUAN Zhen-hua1, CHEN Cheng2, QIAN Yi3, SHA Xi-lin4*

1.Department of Anesthesiology, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 2.Department of Orthopedics, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 3.Department of Hospital Infection Management, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 4.Department of Thoracic Surgery, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China

[Abstract]Objective： To study the difference regarding differentiation of helper T lymphocytes(Th) between propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia.Methods： A total of 60 patients, who received selective lumbar disc herniation surgery during Oct. 2010 and Jan. 2015, were selected and divided into two groups randomly, the propofol group which received total intravenous anesthesia with propofol and the sevoflurance group which received inhalation anesthesia with sevoflurance, with 30 cases in each. The non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure were monitored in all patients.Peripheral venous blood was sampled before and after anesthesia,before and after surgery,and one-day after surgery,respectively.The T cell expression on interferon-γ and interleukin-4, the percentage of Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood, and the ratio between Th1 cell and Th2 cell were evaluated in each group.Results： There was no significant difference between the two groups regarding the non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure. The percentage of Th1 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery(P<0.05).There was no significant difference regarding the percentage of Th2 cell in peripheral blood between the two groups at different time point. The ratio between Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery (P<0.05).Conclusions： Compared with sevoflurance,propofol can preferably promote Th cell to differentiate into Th1 cell.Propofol may therefore have immunoprotective effect for patients during perioperative period.

[Key Words]helper T iymphocytes; differentiation; anesthesia; propofol; sevoflurance

[中圖分類(lèi)號(hào)]R 614.1

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[作者簡(jiǎn)介]阮振華，主治醫(yī)師.E-mail: jsntrzh@163.com*通信作者(Corresponding author).Tel: 0513-87312708，E-mail: 464246774@qq.com

[收稿日期]2015-10-04[接受日期]2016-02-18