人乳頭瘤病毒分型檢測對宮頸病變患者的診斷價值

張肖青， 徐惠群

上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院婦科，上?！?00237

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·論著·

人乳頭瘤病毒分型檢測對宮頸病變患者的診斷價值

張肖青， 徐惠群*

上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院婦科，上海200237

[摘要]目的： 探討人乳頭瘤病毒(HPV)分型檢測在宮頸病變患者診斷中的價值。方法： 選擇2013年8月—2015年1月在徐匯大華醫(yī)院門診行宮頸癌篩查的婦女，年齡均大于25歲，行宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(TCT)、核酸擴(kuò)增熒光PCR檢測HPV?；颊叻譃閮山M：HPV 01(16、35、52、53、58)，HPV 02(18、31、33、45、56)，共計182例。所有患者進(jìn)行陰道鏡下異常轉(zhuǎn)化區(qū)定位活檢、病理檢查，其中15例行宮頸環(huán)形電切術(shù) (LEEP )，取其病變較嚴(yán)重者為最終病理診斷。結(jié)果： 以病變程度≥ CINⅡ為病理學(xué)陽性，以病變程度≤ CINⅠ為病理學(xué)陰性，HPV用于篩查≥ CINⅡ病變的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為：93.33%、84.43%、35%、99.3%。HPV 01組陽性25例，HPV 02組陽性15例，陰性組142例。15例宮頸上皮內(nèi)瘤變≥ CINⅡ病變的患者中，TCT檢測陽性率為53.33%(8/15)，HPV陽性率為93.33%(14/15)。結(jié)論： 對于宮頸病變≥ CIN Ⅱ風(fēng)險更高的患者，TCT聯(lián)合HPV檢測有利于提高其臨床檢出率。

[關(guān)鍵詞]薄層細(xì)胞檢測； 人乳頭瘤病毒；宮頸病變

人乳頭瘤病毒(human papillomavirus, HPV)檢測是宮頸癌初級篩查的重要輔助手段[1]。Berkowitz[2]研究認(rèn)為，HPV檢測可作為宮頸癌初級篩查的獨(dú)立指標(biāo)之一。Torre 等[3]研究發(fā)現(xiàn)，50%的宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)Ⅲ及70%的宮頸癌與HPV 16和(或)HPV 18感染相關(guān)。因此，本研究采用PCR技術(shù)對宮頸病變患者行HPV基因分型檢測，并與陰道鏡活檢及術(shù)后病理結(jié)果進(jìn)行比較，探討HPV分型檢測在宮頸癌前病變和宮頸癌篩查中的潛在價值。

1資料與方法

1.1一般資料選取 2013年8月—2015年1月在我院婦科門診根據(jù)病史、體征疑診為宮頸病變的25～65歲患者182例作為研究對象，具體癥狀及體征包括：宮頸接觸性出血、陰道分泌物異常反復(fù)治療效果欠佳等，對所有患者進(jìn)行宮頸篩查。本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2HPV分型及分組取患者血標(biāo)本，采用HPV核酸擴(kuò)增熒光檢測試劑盒(廣東凱普生物有限公司)進(jìn)行HPV分型，根據(jù)檢測結(jié)果分為兩組：HPV 01組、HPV 02組。HPV 01組包含HPV 16、35、52、53、58；HPV 02組包含HPV 18、31、33、45、56。

1.3宮頸液基薄層細(xì)胞檢測 (TCT)及病理學(xué)檢查采用美國新柏氏薄層液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)，細(xì)胞學(xué)診斷采用TBS (2001)分類法；病理檢查：182例均行陰道鏡檢查及組織病理學(xué)檢查，其中15例行宮頸環(huán)形電切術(shù)。陰道鏡宮頸活檢組織病理及利普(LEEP)術(shù)后組織病理 ，取其病變較嚴(yán)重者為最終病理診斷。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 19.0軟件包，計數(shù)資料采用率表示，兩組間的比較采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)(α)為0.05。

2結(jié)果

2.1患者基線資料2013年8月—2015年1月共入選宮頸病變患者182例，年齡25～65歲，平均年齡(41.65±6.98)歲。

2.2HPV檢測結(jié)果在對142例HPV01、02為陰性的患者中經(jīng)陰道鏡和宮頸組織病理學(xué)檢查，篩選出1例為≥CINⅡ。在宮頸細(xì)胞學(xué)陰性的病例中，HPV感染陽性率為15.56%(26/167)，HPV聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查中15例被病理證實≥ CINⅡ，其中HPV 01和細(xì)胞學(xué)共陽性9例，HPV 01為陽性而細(xì)胞學(xué)為陰性7例；HPV 02與細(xì)胞學(xué)共陽性為5例，而HPV 02陽性和細(xì)胞學(xué)為陰性10例。以臨床上病理學(xué)≥CINⅡ為陽性，計算出HPV用于臨床宮頸癌早癌篩選的特異性84.43%，靈敏度為93.33%，陰性預(yù)測值99.3%，陽性預(yù)測值35%(表1)。

表1　PCR檢測與組織病理學(xué)檢查結(jié)果的關(guān)系

HPV 01：HPV 16、35、52、53、58)，HPV02：HPV 18、31、33、45、56，其中5例同時合并HPV 01陽性計入HPV 02

2.3TCT、HPV檢測和組織病理學(xué)結(jié)果的關(guān)系TCT結(jié)果為正常或炎癥者共計167例，其中HPV 01、HPV 02陽性者分別為14和9例，經(jīng)過宮頸活檢證實為病變程度≥ CINⅡ者分別為4和3例(表2)。本研究中HPV 01、HPV 02陽性者和HPV陰性者分別為25、15和142例，發(fā)生≥ CINⅡ病變者則分別為9、5、1例，3組人群的患癌風(fēng)險比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。在細(xì)胞學(xué)結(jié)果≥ ASCUS的14例患者中，≥ CINⅡ病變發(fā)生率為57.14%(8/14)。在HPV陽性的病例中，≥ CINⅡ病變發(fā)生率為35%(14/40)。HPV 01組陽性，細(xì)胞學(xué)陰性病理學(xué)陽性發(fā)生率28.57%(4/14)，HPV 02組為33.33%(3/9)。具體數(shù)據(jù)見表2。

表2　PCR檢測、細(xì)胞學(xué)與病理學(xué)結(jié)果的相關(guān)性分析

3討論

3.1HPV感染的臨床意義持續(xù)性HPV感染是發(fā)生CIN及宮頸癌的重要條件。近期的一份隨機(jī)對照試驗比較了細(xì)胞學(xué)檢測和HPV檢測之間的差異，對所有病例進(jìn)行隨訪2.5年，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對于浸潤性宮頸癌兩組檢出率接近，而隨著隨訪時間的延長(3.5年和5.5年)，發(fā)現(xiàn)HPV陰性浸潤性宮頸癌的累積發(fā)生率明顯低于細(xì)胞學(xué)陰性患者，結(jié)果提示HPV檢測浸潤性宮頸癌較細(xì)胞學(xué)檢測能夠提高60%～70%，并肯定了HPV檢測長期隨訪的有效性[4]。本研究對C INⅡ的檢出率為8.24%，與既往研究[4-5]報道的9.16%～14.5%接近。

3.2細(xì)胞學(xué)陰性HPV陽性患者的篩選作用本研究表明HPV具有更高的敏感性，而細(xì)胞學(xué)檢測更具有特異性，由于HPV的檢測較細(xì)胞學(xué)檢測更易被患者接受，明顯提高患者的依從性，可以減少CINⅡ的漏診率。Petry等[6]對HPV陽性和細(xì)胞學(xué)陰性的患者隨訪27個月，年齡不小于30歲，發(fā)現(xiàn)HPV陽性和細(xì)胞學(xué)陰性的患者診斷出子宮頸癌的患者具有分期早，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移較少等特點[7]。2012年美國陰道鏡及宮頸病理協(xié)會對該類患者的篩查中做了隨訪建議，對于超過30歲的女性建議1年后予HPV和細(xì)胞學(xué)檢查，如果HPV16/18檢測為陰性，1年后建議復(fù)查HPV和細(xì)胞學(xué)檢測，如果HPV16/18檢測為陽性建議性陰道鏡檢查[5]。故對于細(xì)胞學(xué)為陰性和HPV陽性的患者應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步篩選，建議不降低宮頸癌的漏診率。

3.3HPV不同分型對宮頸癌篩選的臨床意義HPV不同分型對不同地區(qū)人群的診斷率和漏診率存在差異，就我國而言，在遼寧、廣東和臺灣等地HPV33、58和52的感染率明顯高于HPV18，故對于HPV16/18分型是否同樣適合國內(nèi)HPV陽性和細(xì)胞學(xué)陰性的患者需要進(jìn)一步研究[8]。本研究不僅包含HPV16、18，還涵蓋其他型別，HPV01組陽性細(xì)胞學(xué)陰性病理學(xué)陽性發(fā)生率28.57%，HPV02組為33.33%，避免了宮頸高級別病變的漏診。對于可能出現(xiàn)過度診斷與治療的問題，目前隨著宮頸癌致癌作用相關(guān)的生物標(biāo)志物的出現(xiàn)，p16 與 Ki-67 雙染試劑盒的應(yīng)用，可給臨床提供更好的分流方案。對于p16和Ki-67兩種染色均為陽性，可能存在上皮高級別內(nèi)瘤變的可能性，而HPV陽性和細(xì)胞學(xué)陰性同樣存在上皮高級別內(nèi)瘤變的風(fēng)險，故兩者均需要行陰道鏡檢查排除上皮高級別內(nèi)瘤變的可能[9]。

綜上所述，對于宮頸病變≥CIN Ⅱ風(fēng)險更高的患者，TCT聯(lián)合HPV檢測有利于提高其臨床檢出率。

參考文獻(xiàn)

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[本文編輯]葉婷，賈澤軍

Diagnostic value of human papillomavirus genotyping for the cervical lesions

ZHANG Xiao-qing, XU Hui-qun*

Department of Gynecology, Dahua Hospital of Shanghai Municipality, Shanghai 200237, China

[Abstract]Objective： Type of human papillomavirus (HPV) points detection value in the diagnosis of cervical lesions.Methods： Selection in August 2013 - January 2015 in xuhui dahua outpatient women cervical cancer screening, age less than 25 years old, a cerical liquid thin-layer cytology test (TCT), fluorescence PCR detection of HPV for nucleic acid amplification, divided into two groups, HPV01,35,52,53,58 (16);A total of 298 cases of HPV02,31,33,45,56 (18).There are indications of selected 182 patients with abnormal transformation zone positioning biopsy under colposcope, pathological examination, including 15 routine cervical Loop electricity cut method (Loop electrosurgieal excision procedure, LEEP), take its pathological changes is more serious for the final pathologic diagnosis.Results： In this study based on acuity CIN lesions Ⅱ for pathology is positive, with the lesion degree CIN I for pathology or less negative, HPV is used for screening or greater CIN Ⅱ lesion degree of sensitivity, specific, positive predictive value and negative predictive value, respectively, 93.33%, 84.43%, 35%, 99, 3 %.Positive HPV01 group 25 cases, positive HPV02 group 15 cases (with 5 positive HPV01 group) at the same time, the negative group 142 cases.In CIN or Ⅱ lesions (a total of 15 cases), 9, 5, and 1 case respectively, compared the risk of cancer, difference of three groups was statistically significant (χ2= 93.98, P< 0.01).For cervical intraepithelial neoplasia acuity CIN Ⅱ lesions of 15 cases, TCT testing positive rate was 53.33% (8/15), HPV detection positive rate was 93.33% (14/15).Conclusions： TCT joint HPV detection, can identify patients with cervical lesions of higher risk CINII or, more should pay attention to the role of HPV clinically.

[Key Words]thin-layer cytology test; human papillomavirus; cervical lesions

[中圖分類號]R 373.9

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[作者簡介]張肖青，主治醫(yī)師. E-mail: 2562471549@qq.com*通信作者(Corresponding author). Tel: 021-64535555, E-mail: drxuhuiqun@gmail.com

[收稿日期]2015-12-20[接受日期]2016-03-22