不同消解方式對測定雞蛋中卵磷脂含量的影響

馬光路，馬曉麗（內(nèi)蒙古化工職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010070）

?

不同消解方式對測定雞蛋中卵磷脂含量的影響

馬光路，馬曉麗
（內(nèi)蒙古化工職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010070）

摘要：對雞蛋中的卵磷脂含量進(jìn)行測定。采用干法灰化法、濕式消解法和微波消解3種方式進(jìn)行消解，運用紫外分光光度法進(jìn)行測定雞蛋中的卵磷脂含量。結(jié)果：微波消解前處理具有簡單快速、試劑用量少、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點，優(yōu)于干化消解法和濕式消解法。

關(guān)鍵詞：雞蛋；卵磷脂；干化灰化法；濕式消解法；微波消解；紫外分光光度法

卵磷脂，又稱為蛋黃素，被譽為與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營養(yǎng)素”。卵磷脂可使大腦神經(jīng)及時得到營養(yǎng)補充，有利于消除疲勞，緩解神經(jīng)緊張[1-3]。

近幾年來對雞蛋中卵磷脂的研究不多，目前主要的測定方法有紫外分光光度法[1-7]、HPLC法[8]、ICP-MS 法[9]等等，其中紫外分光光度法比其他的方法具有簡單、快速、費用低等優(yōu)點，所以本文采用紫外分光光度法測定雞蛋中的卵磷脂含量。在此試驗中最耗時、也是最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)就是消化方法，本文首次比較了干法灰化法、濕式消解法和微波消解法3種消解方式對卵磷脂含量的影響。

1　材料

1.1儀器

TU-1901/TU-1900紫外-可見分光光度計：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)；TGL-16G高速離心機：北京佳緣興業(yè)科技有限公司生產(chǎn)；85-2數(shù)顯恒溫磁力攪拌器：常州華冠儀器制造有限公司生產(chǎn)；FA2004N分析天平：上海菁海儀器有限公司生產(chǎn)；JC2005E烘干箱：濟(jì)南精誠儀器公司生產(chǎn)。

1.2試劑

丙酮、無水乙醇、95 %乙醇、硝酸、硫酸、雙氧水、鉬酸銨、抗壞血酸、亞硫酸鈉：天津大茂化學(xué)試劑廠。

磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（濃度1 000 mg/L）購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。

1.3試樣

雞蛋：市購。

2　方法

2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：準(zhǔn)確吸取10 mL磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，置于100 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。

2.2樣品的制備

準(zhǔn)確稱取5.000 g樣品，置于燒瓶中，加人15 mL丙酮，用磁力攪拌器攪拌30 min，靜置，分出油脂層，用丙酮潤洗直至無色，傾出丙酮。將盛有丙酮不溶物的燒瓶置于烘干箱中，于60℃恒溫30 min，揮發(fā)掉殘余丙酮。然后向燒瓶中加人50 mL的無水乙醇，40℃下攪拌90 min，將樣品液轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶中，用無水乙醇定容，最后將溶液離心15 min待用。

稱取10 g已經(jīng)制備好的樣品置于50 mL離心管中，加入30 mL無水乙醇，充分?jǐn)嚢杓s5 min，離心2 min，將乙醇溶液收集于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中。沉淀物再用無水乙醇洗滌兩次（同上），合并乙醇提取液，并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。

2.3樣品消解

2.3.1干法灰化法

準(zhǔn)確稱蒸發(fā)干的樣品1.000 g，于酸洗的瓷坩堝中，在150℃電熱板上小火碳化至無煙，再置于550℃馬弗爐中灰化6 h，待灰化完全，取出坩堝，冷卻后加入少量（1+9）硝酸溶解，然后在電熱板上加熱趕酸，少量多次的轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶中，再加水進(jìn)行定容，放置30 min，待用。

2.3.2濕式消解法

準(zhǔn)確稱蒸發(fā)干的樣品1.000 g，置于100 mL錐形瓶中，加入10 mL硝酸-高氯酸（5+1）混合液和3～4粒防沸玻璃珠，加蓋過夜，加一小漏斗在電爐上消解，若變棕黑色，再加混合酸。直至冒白煙，消化液無色透明、放冷，然后在電熱板上加熱趕酸，移入50 mL容量瓶，用水定容至刻度，搖勻。同時做試劑空白。

2.3.3微波消解

準(zhǔn)確稱取1.000 g蒸發(fā)干的樣品于微波消解罐中，加入硝酸4 mL、雙氧水1 mL，靜置5 min，旋緊密封蓋，將罐放入微波爐內(nèi)，在溫度160℃和功率為800 W進(jìn)行消5 min。消解完畢，取出消解罐冷卻后，將消解液在電熱板上加熱趕酸，轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中，用水定容、搖勻待側(cè)。

2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于10 mL比色管中，依次加入1 mL鉬酸銨溶液，靜置10 s。加入0.5 mL亞硫酸鈉溶液，1 mL抗壞血酸溶液，加水至刻度，搖勻。靜置0.5 h后，在660 nm波長處分別測定其吸光度，以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5樣品的測定

準(zhǔn)確吸取樣品消解液及試劑空白溶液分別置于10 mL比色管中，按照操作步驟測定吸光度。

3　結(jié)果與分析

3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制線性回歸方程為y=290.33x-0.283 3，其相關(guān)系數(shù)為0.998 9，說明線性關(guān)系良好。

3.2重復(fù)性試臉

標(biāo)準(zhǔn)溶液在660 nm下重復(fù)測定吸光值6次，計算卵磷脂的含量，結(jié)果RSD的范圍為1.5 %～2.7 %，均小于5 %，表明本試驗具有良好的重現(xiàn)性。

3.3穩(wěn)定性試驗

將標(biāo)準(zhǔn)液與樣品液在660 nm下每隔15 min檢測吸光度值，計算樣品液中卵磷脂的含量，標(biāo)準(zhǔn)液與樣品液中卵磷脂含量的RSD范圍為2.3 %～3.1 %，均小于5 %，表明卵磷脂在1 h內(nèi)測定結(jié)果穩(wěn)定。

3.4回收率試驗

準(zhǔn)確稱取樣品5.000 g 1號、3號、5號樣品各3份，分別加入磷標(biāo)液0.5、2.5、5 mL，按樣品液制備方法制備供試液，在660 nm測量吸光值，并計算樣品加標(biāo)回收率，結(jié)果見表1。

3.5不同消化方式對卵磷脂含量的影響

干法灰化法、濕式消解法和微波消解法對于卵磷脂含量的影響結(jié)果見表2（n=3）。

表2　不同消化方式測定卵磷脂的含量Table 2 The determination of lecithin by different digestion methods

由表2可知，干法處理試驗結(jié)果明顯偏低，因為在消解過程中有損失；濕式消解法處理具有原理簡單、消化完全、成本低、過程容易控制等優(yōu)點，但是耗時長；微波消解法結(jié)果令人滿意，操作簡單、快速、損耗少等優(yōu)點，所以應(yīng)該選擇微波消解法處理。

4　結(jié)論

比較干法灰化法、濕式消解法和微波消解法對樣品進(jìn)行消解，結(jié)果微波消解法因為操作簡單、快速、損耗少等特點具有優(yōu)勢。

表1　回收率結(jié)果Table 1 The results of recovery

參考文獻(xiàn)：

[1]朱云芬,陳寬維,葛慶聯(lián),等.分光光度法測定雞蛋黃卵磷脂含量[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報,2010, 26(4): 853-856

[2]陳衛(wèi)濤,張德權(quán),張柏林,等.紫外分光光度法測定保健品中卵磷脂的含量[J].中國糧油學(xué)報,2006,21(3):189-191

[3]黃島平,莫建光,勞燕文,等.紫外分光光度法測定腦維營養(yǎng)麥片中的卵磷脂[J].光譜實驗室,2001,18(3):288-290

[4]陳艷輝,玉現(xiàn)新,李超柱,等.雞蛋黃中卵磷脂的分離及分析方法研究[J].食品研究與開發(fā),2011,32(10):8-12

[5]熊建華,董開發(fā),歐陽建華.泰和烏骨雞蛋中磷脂含量的測定研究[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志,1999(2):8-9

[6]張金鵬,張婧,雷芮,等.食品中磷測定方法的改進(jìn)[J].食品工程, 2014(4):37-39

[7]王繼波.蛋黃卵磷脂的純化及含量的測定[J].廣西輕工業(yè),2006 (5):59

[8]王雅蕾,黃建國,馬春建.高效液相色譜法測定雞蛋中的腦磷脂和卵磷脂[J].分析儀器,2010(3):34-36

[9]陳紅,張億,朱蓉.ICP-MS法測定蛋黃卵磷脂中微量元素含量[J].藥物分析雜志,2010,30(7):1279-1281

Effect of Different Digestion Methods on the Content of Lecithin in Eggs

MA Guang-lu，MA Xiao-li
（Inner Mongolia Vocational College of Chemical Engineering，Hohhot 010070，Inner Mongolia，China）

Abstract：To determine the content of egg lecithin，the dry ashing，wet digestion and microwave digestion were used to digest. The spectrophotometric method were used to determine the content of lecithin in eggs. Results showed that the microwave digestion had simple，rapid，less reagent，the advantages of higher accuracy than bry ashing and wet digestion method.

Key words：eggs；lecithin；dry digestion；wet digestion；microwave digestion；spectrophotometric method

收稿日期：2015-11-28

作者簡介：馬光路（1982—），女（漢），講師，本科，研究方向：工業(yè)分析、有機分析。

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.08.036