樟樹組織培養(yǎng)育苗技術(shù)

譚定新

摘 要：樟樹是生長于我國南方地區(qū)的常綠闊葉喬木的代表樹種，但傳統(tǒng)育苗技術(shù)中的播種育苗、扦插育苗和嫁接育苗各有不足，組織培養(yǎng)育苗作為一種新型快繁育苗技術(shù)，有望在實(shí)現(xiàn)工廠化優(yōu)質(zhì)育苗方面后來居上，因此本文對(duì)該項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞：樟樹；組織培養(yǎng)；育苗

樟樹[Cinnamomum camphora （L.） Presl.]是我國南方地區(qū)常見的闊葉常綠喬木，從東部的臺(tái)灣、浙江到西部的四川，由北面的湖北至南方的海南，如此廣闊的國土上都可見到它婆娑的身姿。樟樹高大挺拔，樹形美觀，能吸煙滯塵和固土防沙，是優(yōu)良的綠化樹種；材質(zhì)堅(jiān)韌，紋理優(yōu)美，防蟲耐腐，又是上好的用材樹種；根、莖、葉中可提取香精油，還是重要的化工原料樹種。所以，樟樹種植非常受歡迎。目前樟樹育苗可采用播種育苗、扦插育苗、嫁接育苗和組織培養(yǎng)育苗（組培育苗）4種方式。播種育苗發(fā)芽率高，但易變異，無法保持母本優(yōu)勢(shì)。扦插育苗能保持品種優(yōu)良特性，但受材料和季節(jié)局限，且多代繁殖也會(huì)出現(xiàn)品質(zhì)衰退現(xiàn)象。嫁接育苗可保持優(yōu)良品系，但同樣存在材料和季節(jié)限制問題。組培育苗既可保持品種優(yōu)勢(shì)，又不受材料和季節(jié)影響，是工廠化育苗的最佳方式。雖然樟樹組培育苗試驗(yàn)已取得不少積極成果，但規(guī)?；a(chǎn)鮮有報(bào)道。作為一項(xiàng)朝陽技術(shù)，當(dāng)前存在的困難是暫時(shí)的，組培育苗必然具有廣闊的前景，因此本文對(duì)該項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行了分析。

一、材料選擇

1.樹種選擇。按用途分類，樟樹有香料工業(yè)原料、景觀綠化、防護(hù)林、珍貴用材等用途。以葉精油種類和含量區(qū)分，樟樹包括芳樟、腦樟、油樟、異樟、龍腦樟和雜樟等類別。組培育苗時(shí)，應(yīng)先根據(jù)用途選擇適宜的品種。香料工業(yè)原料用樟樹必須滿足一定的葉精油含量，芳樟中芳樟醇含量應(yīng)達(dá)到33.32%～97.69%，腦樟中腦樟含量應(yīng)達(dá)到32.33%～92.03%，油樟中黃樟油素含量應(yīng)達(dá)到36.53%～69.35%。其他用途的樟樹對(duì)葉精油含量沒有嚴(yán)格要求，可按主要用途來選擇，如景觀綠化用樟樹應(yīng)選擇高大、樹形優(yōu)美的樹種，防護(hù)林用樟樹應(yīng)選擇枝繁葉茂、防風(fēng)固沙效果好的樹種，珍貴用材樟樹宜選擇材質(zhì)緊密、紋理優(yōu)美的樹種。

2.外植體選擇。目前，樟樹組培育苗主要采用以下外植體：啟動(dòng)培養(yǎng)采用莖段，愈傷組織誘導(dǎo)采用莖段、嫩葉和側(cè)芽，初代培養(yǎng)采用嫩枝和嫩梢，繼代培養(yǎng)采用莖段和嫩梢，增殖培養(yǎng)采用莖段和嫩枝，生根培養(yǎng)采用莖段、嫩枝、嫩梢及繼代單芽。另外還有利用子葉胚培養(yǎng)的。一般情況下宜選擇當(dāng)年生、健壯的嫩枝或嫩梢，取回實(shí)驗(yàn)室后剪去葉片、沖洗干凈、切段后在無菌條件下消毒。

3.培養(yǎng)基選擇。樟樹組培育苗培養(yǎng)基大都采用MS培養(yǎng)基或改良MS培養(yǎng)基、DCR1培養(yǎng)基，再加入細(xì)胞分裂素6-BA（6-芐基氨基嘌呤）/6-KT（6-糠氨基嘌呤）及生長素NAA（萘乙酸）/IBA（吲哚丁酸）/2，4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）/IAA（吲哚乙酸），還可加入GA（赤霉素）、蔗糖等。

二、組織培養(yǎng)

1.無菌環(huán)境的保障。組培育苗要求無菌環(huán)境，如果污染很可能面臨全部失敗的風(fēng)險(xiǎn)。工廠化育苗應(yīng)從更衣室、接種室、培養(yǎng)室到存放培養(yǎng)基的儲(chǔ)藏室都保持無菌條件。除了日常消毒和專人管理以外，還應(yīng)確保室內(nèi)濕度不超過70%。

2.外植體消毒。消毒有多種方法。一是先用75%酒精浸泡15～20s，無菌水沖洗5～8次，在0.1%HgCl2溶液內(nèi)浸泡8～15min，再以無菌水沖洗5～8次，用無菌濾紙吸干外植體表面水分后進(jìn)行接種。二是把外植體放入0.2%滅菌凈中并在超聲波清洗儀內(nèi)處理20～30min，無菌水洗凈后，再在滴加了3滴吐溫-80的0.1%HgCl2溶液內(nèi)處理5min，無菌水洗凈后接種。

3.初代培養(yǎng)。初代培養(yǎng)物應(yīng)為長1～2cm，含1個(gè)腋芽的莖段或2～3個(gè)腋芽的頂梢。培養(yǎng)基為或，并加入3.0%蔗糖。培養(yǎng)溫度為25～30℃，每日光照12～16h，光照強(qiáng)度1000～3000lx。

4.繼代培養(yǎng)。觀察初代培養(yǎng)物獲得新芽叢后就可以進(jìn)行繼代培養(yǎng)。將芽叢分切，每個(gè)部分有2～3個(gè)芽，作為繼代培養(yǎng)物。培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 0.8mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1或或。另加入3.0%蔗糖。培養(yǎng)溫度和光照條件同初代培養(yǎng)。接種25d后增殖倍數(shù)應(yīng)達(dá)到2.69～3.46倍，芽苗生長狀況應(yīng)良好，即粗細(xì)適中，無愈傷組織及芽頂尖褐化壞死現(xiàn)象，并且葉片舒展。繁殖系數(shù)是工廠化生產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的決定性因素，如果繁殖系數(shù)較低，應(yīng)調(diào)整培養(yǎng)基配方。擴(kuò)繁有以芽繁芽和以段繁段兩種方式，一般前者繁殖較快，但易產(chǎn)生褐化、玻璃化等問題，后者繁殖系數(shù)相對(duì)小一些。玻璃化一般認(rèn)為是因透氣性差、細(xì)胞分裂素濃度過高所致，故應(yīng)采用無菌透氣濾膜并維持較低激素水平。

5.生根培養(yǎng)。從繼代培養(yǎng)物中挑選生長健壯、苗高≥1.5cm的芽苗，用于生根培養(yǎng)。培養(yǎng)基為MS+IBA 1.0mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1或1/2MS+IBA 0.5mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1或1/3MS+IBA 0.35mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+Ac 0.2 g·L-1或1/2MS+IBA 2.0mg·L-1+IAA 1.7 mg·L-1+6-BA 0.1mg·L-1+ NAA 0.05 mg·L-1。另加2.0%蔗糖和0.7%卡拉膠。培養(yǎng)溫度和光照條件同初代培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)間10～15d，生根率應(yīng)達(dá)94%～96%以上。

6.馴化。生根轉(zhuǎn)接后要進(jìn)行馴化，方法是先置于光照800lx的培養(yǎng)架上，待10d再置于光照1500lx培養(yǎng)架的頂層，再7d后置于加遮蔭網(wǎng)的大棚中，光照1500～3000lx煉苗30d，苗高達(dá)到30cm以上即可移栽。

7.移栽。移栽基質(zhì)可采用泥炭土與黃心土體積比1：4配制或65%泥炭、25%木糠、10%珍珠巖配制的輕質(zhì)基質(zhì)，后者方便運(yùn)輸、根系吸水能力強(qiáng)。容器可選用塑料營養(yǎng)袋或多孔穴盤。移栽后立即澆水，搭建塑膜小拱棚，噴施800～1000倍多菌靈1次。逐步打開薄膜，小苗長出新葉后可薄施肥。1個(gè)月后進(jìn)行正常水肥管理。

三、結(jié)語

組培育苗技術(shù)已在農(nóng)作物和一些林木育苗生產(chǎn)中獲得成功應(yīng)用，樟樹組培育苗試驗(yàn)也取得不少積極成果。但組培育苗工廠化生產(chǎn)是一個(gè)系統(tǒng)工程，目前在規(guī)?；a(chǎn)方面的技術(shù)并未完全成熟，隨著結(jié)合生產(chǎn)的研究不斷深入，樟樹組培育苗規(guī)模化生產(chǎn)為期不遠(yuǎn)了。

參考文獻(xiàn)：

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