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    蔬菜水果中腈菌唑農(nóng)藥殘留氣相色譜檢測法

    2016-05-14 14:07:15韋莉莎
    南方農(nóng)業(yè)·下旬 2016年5期

    韋莉莎

    摘 要 腈菌唑作為一種麥角甾醇生物合成抑制劑,具有持效期長、對農(nóng)作物安全、藥效好、強內(nèi)吸性等特點,可以有效預防和治療很多蔬菜水果生長過程中的常見疾病,如梨、蘋果的黑星病、銹病和白粉?。粺煵莸陌追鄄?;麥類的網(wǎng)斑病、大麥條紋病、小麥莖枯病、網(wǎng)腥黑穗病、堅黑穗病和散黑穗??;葡萄的白粉病和黑腐??;核果的腐爛病、污點病、褐銹病和白粉病等。腈菌唑作為農(nóng)藥,在農(nóng)作物上使用之后,雖然多數(shù)會發(fā)生轉(zhuǎn)化,但是農(nóng)作物中仍然會殘留一些農(nóng)藥,如果長時間攝入食物中殘留的農(nóng)藥,會對人體的健康造成很大的威脅,所以必須重視農(nóng)藥的殘留量。在20世紀60年代,就已經(jīng)有人開始應(yīng)用薄層色譜酶抑制法檢測有機磷農(nóng)藥在食物中的殘留量,發(fā)展到20世紀80年代,開始使用酶抑制和免疫檢測技術(shù)來對農(nóng)藥殘留量進行檢測。近年來,我國也開始充分應(yīng)用氣相色譜法對食物中農(nóng)藥殘留量進行檢測,具有誤差小、操作簡單、處理速度快等諸多優(yōu)勢。以砂糖橘為例,使用氣相色譜檢測法檢測蔬菜水果中腈菌唑的農(nóng)藥殘留。

    關(guān)鍵詞 氣相色譜檢測法;腈菌唑;蔬菜水果;農(nóng)藥殘留

    中圖分類號:TS255.7 文獻標志碼:A 文章編號:1673-890X(2016)15--03

    近年來,我國蔬菜出口發(fā)展情況雖然比較平穩(wěn),但是由于一些發(fā)達國家為了抵制外來產(chǎn)品,保護本國市場,越來越頻繁的應(yīng)用技術(shù)性貿(mào)易壁壘。尤其是在蔬菜水果中的腈菌唑殘留檢測,已經(jīng)成為北美、歐盟等發(fā)達國家進出口蔬菜和水果的必須檢測項目。所以,使用氣相色譜檢測法檢測蔬菜水果中腈菌唑的農(nóng)藥殘留,一方面,有利于保護食用者的身體健康,另一方面,也有利于促進產(chǎn)品的出口。

    1 材料與方法

    1.1 實驗材料

    研究所需試劑主要包括以下幾種。腈菌唑標樣:純度超過96.0%。無水硫酸鈉:550 ℃灼燒4 h。氯化鈉:140 ℃烘烤4 h。農(nóng)殘級二氯甲烷、正乙烷、丙酮等。

    研究所需儀器主要包括以下幾種。氣相色譜儀:帶氮磷檢測器。分液漏斗、電動震蕩儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等[1]。

    1.2 實驗操作

    1.2.1 提取腈菌唑

    取10 g腈菌唑,和砂糖橘的全果、果肉、果皮攪勻,放入100 mL的具塞量筒中,加入20 mL的乙腈,勻漿2 min。然后加入3 g氯化鈉,勻漿1 min。以3 500轉(zhuǎn)/min的速度進行5 min的離心,使水相和乙腈分層。

    1.2.2 石墨化炭黑柱-氨基柱組合凈化

    在具塞量筒中吸取10 mL的乙腈相溶液,置入150 mL的燒杯中,將燒杯放在65 ℃的水浴鍋上加熱,對乙腈進行蒸發(fā)。用1 mL、體積比例為1∶3的乙腈-甲苯溶液,對燒杯中的試樣殘渣進行溶解,轉(zhuǎn)入石墨化炭黑柱-氨基柱。再使用1 mL、體積比例為3∶1的乙腈-甲苯溶液,對燒杯進行清洗。使用10 mL、體積比例為3∶2的乙腈-甲苯溶液,對石墨化炭黑柱-氨基柱進行清洗,取出洗脫液。在水浴鍋中蒸發(fā),加入體積比例為2∶8的丙酮-正乙烷,定容至5 mL,進行氣相色譜分析[2]。

    1.2.3 氣象色譜分析

    升溫程序:在100 ℃下保持1 min,然后以每分鐘20 ℃的速度,升溫至180 ℃。然后以每分鐘10 ℃的速度,升溫至300 ℃,保持6 min。

    進口溫度:260 ℃。進樣量:1μL。載氣:氮氣(≥99.999),流速1 mL/min。氫氣: 1.5 mL/min。空氣:145 mL/min。NPD溫度:300 ℃。進樣方式:不分流進樣,0.75 min后,打開分流閥和隔墊吹掃閥。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 提取方法和凈化方法的選擇

    在提取方法上,乙腈是農(nóng)藥殘留分析中最常用的提取溶劑,可以和水互溶。加入氯化鈉之后,可以和水分層,并且不會受到蛋白質(zhì)、脂肪和糖類等雜質(zhì)的干擾,提取腈菌唑的效果較好。本次研究對乙腈和甲醇的提取腈菌唑效果進行了比較,用甲醇萃取樣品加入氯化鈉水溶液。然后使用二氯甲烷萃取,凈化之后,用丙酮定容上機。通過對不同提取方法的比較,結(jié)果表明,使用乙腈提取的回收率更高,雜質(zhì)干擾更小。所以本次研究采用乙腈提取法。

    在凈化方法上,體積比例為3∶1的乙腈-甲苯直接洗脫的效果不理想,體積比例為3∶2的乙腈-甲苯直接洗脫也會受到干擾。所以本次研究確定使用體積比例為3∶1的乙腈-甲苯上洋,淋洗,放棄淋洗液。然后使用體積比例為3∶2的乙腈-甲苯洗脫溶液,回收效果更好。

    2.2 色譜分析條件的選擇

    使用Ttx-1毛細管色譜柱進行分離,效果較好。使用這種方法可以完全分離樣品和腈菌唑中的雜質(zhì)。根據(jù)上述實驗,腈菌唑保留時間為12.4 min,定量指標為峰面積,標準色譜見圖1,砂糖橘全果的空白及添加0.1 mg標樣色譜見圖2。

    2.3 線性范圍

    一般情況下,腈菌唑在蔬菜水果中的限量標準是0.2~1.0 mg/kg,所以本次研究以0.1~1.0 mg/kg作為標準曲線的范圍,配制每升0.01、0.05、0.10、0.50、1.00 mg的標準工作液,取1 μL進行測量,外標法定量。繪制工作曲線,橫坐標是腈菌唑的質(zhì)量濃度,縱坐標是相應(yīng)的峰面積,見圖3。

    2.4 回收率及方法的精密度

    在不同量的標準溶液中加入10 g砂糖橘果皮、果肉、全果,進行添加回收實驗,每個添加濃度重復5次,結(jié)果見表1。

    從表1中可以看出,在全果、果肉、果皮中添加0.10、0.50、1.00 mg/kg時,回收率分別為89.5%~98.1%、90.0%~108.3%、94.1%~101.1%,相對標準偏差分別為9.66%~14.97%、1.11%~13.79%、6.28%~16.16%。

    2.5 方法檢出限和樣品測定

    當稱樣量是10 g,定容體積為5 mL,進樣量為1 μL時,以3倍信噪比計算檢出限,為0.008 mg/kg。對砂糖橘試驗樣品的全果使用氣象色譜檢測法,進行腈菌唑殘留檢測,典型色譜見圖4。

    使用外標法檢測目標化合物的含量,結(jié)果見表2。

    3 結(jié)論

    使用氣相色譜法檢測蔬菜水果中腈菌唑殘留量的目的在于保證食品安全,所以針對腈菌唑殘留量過高可能造成的危害,我國政府也要有明確的規(guī)定,相關(guān)部門應(yīng)該加強宣傳,讓所有人都能清醒地認識到腈菌唑殘留量過高對人體、地下水造成的危害,在使用時也要遵照科學的方法,不能濫用。一般情況下,一茬植物從苗期、花期,最后到果實膨大期,只能使用3~4次。對于連續(xù)結(jié)果的農(nóng)作物,如黃瓜等,第三次用藥和第四次用藥之間應(yīng)該間隔1個月。并且番茄類作物盡量在上午用藥,確保葉片當天就可以吸收藥物,以免藥劑集中在葉邊緣,發(fā)生不良反應(yīng)。腈菌唑的用藥時間應(yīng)該是在當?shù)剞r(nóng)業(yè)科技人員建議時間、病害發(fā)生之前、農(nóng)作物生長旺盛時期給藥,為了避免病菌產(chǎn)生抗藥性,一個生長季節(jié)使用腈菌唑的次數(shù)不能超過4次。為了得到最佳抗菌效果,建議在病害發(fā)生之前或者發(fā)生初期進行施藥,可以有效抑制菌絲和病菌孢子的生成和萌發(fā)。但是在施藥腈菌唑的同時,盡量避免和乳油類農(nóng)藥混合使用。本次研究使用的氣相色譜檢測法,以砂糖橘為例,檢測蔬菜水果中腈菌唑的農(nóng)藥殘留,實驗不需要對樣品進行凈化,操作簡單,準確性、精密度和靈敏度都比較好,結(jié)果可靠,符合農(nóng)藥殘留分析實驗的要求,成本也比較低,檢測限低于國外殘留限量標準,所以適用于蔬菜水果中腈菌唑農(nóng)藥殘留量的檢測。

    參考文獻

    [1]謝建軍,陳捷,李菊,等.改良QuEChERS法結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定果蔬中20種殺菌劑[J].食品安全質(zhì)量檢測學報,2013(1):82-88.

    [2]黃金萍,郭順云,魏萍芳,等.氣相色譜法在疏菜農(nóng)藥殘留檢測中的研究應(yīng)用進展[J].中國農(nóng)業(yè)信息,2013(9):130-133.

    (責任編輯:劉昀)

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