巖蟲人工繁育的初步探究

王宏雷 王福平 韋明利 姚久祥

摘 要 主要研究利用廣西北部灣產(chǎn)野生巖蟲（Marphysa sanguinea）成蟲作為親本進(jìn)行人工育苗試驗(yàn)，通過(guò)親本繁育、作為基礎(chǔ)餌料的單細(xì)胞藻的大量生產(chǎn)技術(shù)研究、受精卵至幼蟲發(fā)育過(guò)程的研究與觀察，幼蟲的培育技術(shù)，包括培育底質(zhì)的設(shè)定、培育密度、餌料的選擇和投喂等技術(shù)的研究，首次對(duì)廣西巖蟲進(jìn)行人工繁育進(jìn)行研究和嘗試。

關(guān)鍵詞 巖蟲；親本；餌料；人工繁育；幼蟲

中圖分類號(hào)：S963.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1673-890X（2016）15-00-02

巖蟲（Marphysa sanguinea）是一種多毛綱磯沙蠶科海生環(huán)節(jié)動(dòng)物。海生多毛綱許多動(dòng)物都是主要的海釣餌料例如沙蠶，而巖蟲因其個(gè)體大，腥味較重，且富含血液和脂肪更是海釣中最好的珍貴餌料之一，因此價(jià)值很高，每年都大量被出口到歐美、日韓等地區(qū)[1-3]。此外，巖蟲還是蝦蟹類育種中親本催熟過(guò)程中主要的活餌種類之一。而目前，關(guān)于巖蟲提取物作為海洋藥物等的研究也是方興未艾[4]。巖蟲主要分布于潮間帶、潮下帶多泥沙、富含有機(jī)質(zhì)的地方，因其底棲生活及以有機(jī)碎屑為食的特點(diǎn)能夠有效的降低其棲息環(huán)境的有機(jī)質(zhì)污染以及底質(zhì)的通透性等[1]。目前，巖蟲的獲取主要靠人工捕采野生資源，因其需求量有增無(wú)減，加上海洋環(huán)境的污染，巖蟲野生資源面臨枯竭的境況。因此，研究巖蟲的人工繁育技術(shù)，為其人工養(yǎng)殖提供技術(shù)支持具有非常重要的意義。而因?yàn)榄h(huán)境的適應(yīng)性，選擇本地品種進(jìn)行養(yǎng)殖馴化，可以更好地適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境，從而為實(shí)現(xiàn)大規(guī)模人工養(yǎng)殖提供技術(shù)上的支持。

1 材料與方法

人工養(yǎng)殖及育苗試驗(yàn)是在廣西北海竹林鹽場(chǎng)中科蝦苗場(chǎng)進(jìn)行的。

1.1 親本選擇

巖蟲親本采自北海竹林鹽場(chǎng)潮間帶，選取肥碩飽滿、無(wú)斷節(jié)和無(wú)傷損肢體飽滿的個(gè)體作為親本，經(jīng)消毒后放入消毒曝氣過(guò)的親本養(yǎng)殖池進(jìn)行暫養(yǎng)。

1.2 親本養(yǎng)殖池基底設(shè)計(jì)

親本養(yǎng)殖池選擇1.5 m×2 m×1 m的蝦苗池，經(jīng)石灰消毒、清洗曝曬后表面鋪一層空心磚，并覆蓋200目紗網(wǎng)2層用于通氣及防止沙子泄漏。第一層基底加入較粗的沙礫[直徑1 mm×（2～3） mm為宜]，厚度約10 cm；第二層加入細(xì)沙及塘泥混合物，以10～15 cm為宜；第三層為采自巖蟲棲息地的泥沙，厚度約10 cm。先用0.15%高錳酸鉀水進(jìn)行消毒，然后用0.2%草酸溶液去除高錳酸鉀殘余，經(jīng)曝氣海水反復(fù)沖洗干凈后方可使用。并且保持每平方米水面放置一個(gè)充氣頭用于增加水中溶氧。

1.3 親本飼喂

親本的水溫保持在20 ℃上下，鹽度保持在31左右。每日投喂適量的魚粉，及培育的單胞藻（總量不超過(guò)其體質(zhì)量的5%為宜）。每日換水2次，每次換水為水體總量的1/2，換水時(shí)間模仿本地的潮汐變化。換水后立即投喂飼料，均勻地灑落在巖蟲洞口的周圍，投喂時(shí)，保持水體剛剛漫過(guò)基底。可以觀察到蟲體從洞中伸出體長(zhǎng)的1/2，進(jìn)行攝食，稍有驚擾，蟲體會(huì)立即縮回洞內(nèi)，蟲體糞便為黑色，顆粒狀，大小約為0.5 mm×1 mm。

1.4 親本繁育的研究

巖蟲親本在水溫達(dá)到25 ℃，親本會(huì)進(jìn)入產(chǎn)卵期，未發(fā)育成熟的巖重親體難以辨別其性別，進(jìn)入成熟期后，由于蟲體內(nèi)飽含精子，雄蟲腹部會(huì)呈現(xiàn)白色略發(fā)黃；而雌體會(huì)呈現(xiàn)茶褐色，腹部輕輕擠壓會(huì)有紅褐色的卵子排出[5]。我們可以通過(guò)人工的調(diào)控水溫，來(lái)實(shí)現(xiàn)巖蟲親本成熟及交配產(chǎn)卵的調(diào)控。

1.5 單胞藻類的培養(yǎng)

單胞藻類如金藻、鹽藻、扁藻和小硅藻等都是海生多毛綱重要的食物來(lái)源，為其大量提供身體發(fā)育及性腺成熟中多種激素來(lái)源或前提的多種不飽和脂肪酸。我們選擇金藻作為巖蟲親本的餌料，而小球藻和硅藻作為巖蟲幼體的餌料。藻種取自廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院海水養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室。3種藻類的培養(yǎng)均采用三級(jí)培養(yǎng)法[6]，于無(wú)菌操作臺(tái)將藻種小心的培植于三角瓶中的液體培養(yǎng)集中，于適溫、合適的光照條件下經(jīng)指數(shù)培養(yǎng)期后；再移植于消過(guò)毒的培養(yǎng)箱中進(jìn)行二級(jí)培養(yǎng)，經(jīng)光鏡觀察到液體內(nèi)充滿藻類單胞體即可均勻地移植到加滿水肥并且經(jīng)過(guò)消毒的藻類培養(yǎng)池中進(jìn)行規(guī)?；囵B(yǎng)。雖然最終藻類培養(yǎng)池中可能混有其他藻種，但應(yīng)以培養(yǎng)的目標(biāo)藻種數(shù)量級(jí)最大。小球藻和硅藻可以混和培養(yǎng)，取藻時(shí)用400目紗網(wǎng)濾出藻體用來(lái)飼喂親蟲和幼蟲。

1.6 受精卵的發(fā)育狀況

巖蟲受精卵的發(fā)育過(guò)程可以通過(guò)光鏡觀察到。受精卵呈茶褐色卵球，直徑約300 mm，卵內(nèi)散亂的分布著大小不均的油球。巖蟲前期的細(xì)胞分裂與其他多毛剛動(dòng)物例如雙齒圍沙蠶很類似，都經(jīng)過(guò)8細(xì)胞期，囊胚期及原腸胚期，只不過(guò)時(shí)間上有所不同。巖蟲由于其生長(zhǎng)期較其他種類的多毛剛生物例如沙蠶科的雙齒圍沙蠶更長(zhǎng)，因而有更長(zhǎng)的幼蟲期。從受精卵到性成熟大約需要2 a的時(shí)間。

1.7 幼體的培育

幼體發(fā)育到擔(dān)輪幼體階段時(shí)（通過(guò)光鏡觀察蟲體前額出現(xiàn)眼點(diǎn)，身體表面有鞭毛分布用以運(yùn)動(dòng)，此時(shí)約在受精卵開始分裂后的24 h）。此時(shí)將幼蟲用目紗網(wǎng)虹吸至幼體培育池中，投喂小球藻和硅藻混合物。幼體培育池大小與成體培育池相似，只是池底基質(zhì)層與成體池相比無(wú)粗沙層，細(xì)沙層厚度及原棲息地泥沙厚度皆為8～10 cm。巖蟲幼體經(jīng)過(guò)20～30 d的發(fā)育過(guò)程后外形特征將初步與成體接近，此時(shí)幼體長(zhǎng)度為1～1.5 cm，此時(shí)由于蟲體的密度過(guò)大以及飼喂的需要，幼體培養(yǎng)池顯然無(wú)法滿足巖蟲幼體健康的生長(zhǎng)。此時(shí)，需要將巖蟲幼體從幼體培養(yǎng)池中按一定密度轉(zhuǎn)移至和成體培養(yǎng)池相同的池中進(jìn)行培養(yǎng)。為研究幼體合適的培養(yǎng)密度，我們將幼體數(shù)量按照1 000、2 000、4 000/m23個(gè)密度梯次進(jìn)行幼蟲的最適宜培育密度的試驗(yàn)。此時(shí)巖蟲的飼料的投喂與換水也與親蟲相同，只不過(guò)投喂量為幼蟲體質(zhì)量的10%。

2 結(jié)果與分析

2.1 巖蟲親本繁育的研究

巖蟲親本進(jìn)入成熟期后，能夠產(chǎn)生成熟的生殖細(xì)胞是在海水平均水溫達(dá)到20 ℃以上時(shí)，其中平均水溫達(dá)到25 ℃時(shí)，其產(chǎn)卵量達(dá)到峰值。此時(shí)，巖蟲親本通常在正午前后溫度較高時(shí)同步從靠近尾部的后腹節(jié)片出通過(guò)棲管（有巖蟲體表分泌的黏液包裹形成的管狀結(jié)構(gòu)）同步的噴出發(fā)育成熟的卵子及精子。每對(duì)巖蟲親本每次排放的受精卵數(shù)量為3萬(wàn)～5萬(wàn)枚，受精卵呈茶褐色，平均直徑在300 μm。

2.2 幼體最適培養(yǎng)密度的研究

幼體合適的培養(yǎng)密度直接關(guān)系到能否將巖蟲的人工養(yǎng)殖進(jìn)行規(guī)?；茝V。我們統(tǒng)一選擇30齡巖蟲幼蟲作為試驗(yàn)的對(duì)象是因?yàn)榇藭r(shí)的巖蟲幼體已經(jīng)初步具備了和成體類似的體形結(jié)構(gòu)，能夠獨(dú)立的攝食粉狀餌料而不是像剛毛幼體階段那樣只能進(jìn)行簡(jiǎn)單的吞噬單胞藻類及一些小的有機(jī)碎屑。經(jīng)過(guò)3個(gè)月的養(yǎng)殖試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，密度梯度為2 000尾/m2時(shí)最后得到的巖蟲總生物量值最大，因此我們可以推斷一月齡巖蟲幼體合適的養(yǎng)殖密度為2 000尾/m2。

3 討論

3.1 巖蟲親本繁育的研究

巖蟲屬于磯沙蠶科，相較于其他種類的多毛綱生物，尤其是沙蠶科的各種生物如雙齒圍沙蠶，其具有固有的生殖腺，不像沙蠶科生物那樣有明顯的生殖期變態(tài)現(xiàn)象，即繁殖季節(jié)沙蠶科生物會(huì)變態(tài)成異沙蠶體，身體發(fā)生明顯的變態(tài)現(xiàn)象：蟲體短縮，疣足退化，身體的結(jié)構(gòu)一切都向著有益于保障生殖過(guò)程而變化。而巖蟲等磯沙蠶科生殖過(guò)程中身體不會(huì)發(fā)生明顯的變態(tài)現(xiàn)象，而是直接通過(guò)體壁棲管將配子排入水中進(jìn)行交配過(guò)程，而不像沙蠶科動(dòng)物那樣出現(xiàn)群舞現(xiàn)象[7]。沙蠶科生物生殖后親本會(huì)逐漸力竭死亡，而磯沙蠶科生物可以多年生育。因而巖蟲親本的選擇可以培育一次多年使用，這也是其大規(guī)模繁育的優(yōu)勢(shì)之處。不過(guò)目前還沒(méi)有關(guān)于巖蟲親本生產(chǎn)的幼體在幾年后會(huì)出現(xiàn)種質(zhì)退化的報(bào)道，這也是將來(lái)待解決的問(wèn)題之一。

3.2 幼體最適培養(yǎng)密度的研究

目前，關(guān)于巖蟲幼體最適培養(yǎng)密度的研究相對(duì)較少，而且主要集中于幼體前期培養(yǎng)密度的研究[3，8]，而罕有對(duì)未來(lái)大規(guī)模養(yǎng)殖具有建設(shè)性的大齡幼體（受精后1個(gè)月，可以獨(dú)立攝食小顆粒飼料的幼蟲）的報(bào)道。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，1月齡幼體的最適養(yǎng)殖密度為2 000尾/m2，雖然1 000尾/m2的個(gè)體均質(zhì)量及成活率均達(dá)到最大水平，但是單位面積收獲的蟲體總質(zhì)量要顯著的小于2 000尾/m2，而當(dāng)養(yǎng)殖密度為4 000尾/m2時(shí)，不僅得到的蟲體大小之間差距明顯，而且死亡率要比前兩個(gè)試驗(yàn)組高的多，平均單位面積蟲體質(zhì)量介于兩組之間。因而我們可以推斷出目前適宜的巖蟲大齡幼體的培育量為2 000尾/m2。

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（責(zé)任編輯：趙中正）