內(nèi)源性大麻素抗肺纖維化的作用研究進(jìn)展

喻娟娟綜述 歐維琳審校

內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)主要由大麻素受體(CBR)、大麻素及合成與降解內(nèi)源性大麻素的酶組成[1]。生物體內(nèi)主要的大麻素受體是大麻素Ⅰ型受體(CB1R)、大麻素Ⅱ型受體(CB2R)，它們都是G蛋白偶聯(lián)受體，大麻素發(fā)揮生物活性效應(yīng)的主要化學(xué)物質(zhì)是△9-四氫大麻酚(△-THC)?，F(xiàn)有研究證實(shí)，內(nèi)源性大麻素可通過(guò)與受體結(jié)合觸發(fā)不同的信號(hào)傳導(dǎo)通路，發(fā)揮多種病理生理作用，主要通過(guò)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)，抑制炎性細(xì)胞釋放炎性因子，如對(duì)肝炎、肺部炎性反應(yīng)、結(jié)腸炎等炎性調(diào)節(jié)作用[2-4]。纖維化是組織被炎性反應(yīng)等刺激后發(fā)生的一種修復(fù)或反應(yīng)的病理過(guò)程，主要表現(xiàn)為纖維結(jié)締組織的過(guò)量形成和沉積，最終導(dǎo)致組織器官結(jié)構(gòu)和功能的不可逆性損傷，文獻(xiàn)報(bào)道，內(nèi)源性大麻素對(duì)心肌梗死后心肌纖維化、肝硬化、腎纖維化等有抗纖維化作用[5-7]。大多數(shù)呼吸系統(tǒng)疾病因呼吸道炎性反應(yīng)反復(fù)發(fā)生最終發(fā)展成肺纖維化，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，尚不完全清楚，其中一個(gè)重要病變過(guò)程是長(zhǎng)期反復(fù)炎性反應(yīng)刺激導(dǎo)致氣道重構(gòu)，肺功能發(fā)生不可逆損害，國(guó)際上暫時(shí)還沒(méi)有有效逆轉(zhuǎn)肺纖維化的藥物。內(nèi)源性大麻素經(jīng)其代謝途徑抑制炎性反應(yīng)，逆轉(zhuǎn)氣道重構(gòu)延緩肺纖維化的研究值得人們關(guān)注，大麻素受體或許是治療肺纖維化的一個(gè)新靶點(diǎn)。文章就內(nèi)源性大麻素及其抗肺纖維化作用機(jī)制與調(diào)節(jié)通路進(jìn)行綜述。

1 內(nèi)源性大麻素概述

1.1 內(nèi)源性大麻素及大麻素受體 Di Marzo和Fontana等最先提出內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)由內(nèi)源性大麻素、大麻素受體，以及涉及內(nèi)源性大麻素合成、運(yùn)輸和降解的酶所構(gòu)成。內(nèi)源性大麻素主要通過(guò)2種特異性大麻素受體發(fā)揮作用即CB1R和CB2R，CB1R和CB2R均為G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)(Gi/o)，這2種受體主要通過(guò)7次跨膜發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。CB1受體主要分布在神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)末梢和脂肪組織等多種組織中，CB2主要在具有免疫功能的外周器官中表達(dá)，如扁桃體、脾臟、胸腺、骨髓、肺、肝臟[8-11]。CB2R主要依賴(lài)K+通道和Ca2+通道，對(duì)內(nèi)源性大麻素在體內(nèi)的代謝進(jìn)行調(diào)節(jié)。

1.2 內(nèi)源性大麻素活性成分 1964年Gaoni和Mechoulum首次提取出大麻素發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的主要分子Δ9-四氫大麻酚(THC)，1992年在哺乳動(dòng)物豬腦中分離出的第一種內(nèi)源性大麻素相關(guān)物質(zhì)N-花生四烯酸乙醇胺(N-AEA)。在隨后幾年中，人們發(fā)現(xiàn)了多種活性?xún)?nèi)源性大麻素物質(zhì)，主要是花生四烯酸與乙醇胺或甘油結(jié)合的衍生物，2-花生四烯酸甘油乙醚、O-花生四烯酰乙醇胺及N-花生四烯酰多巴胺等[12-13]。

2 內(nèi)源性大麻素抗肺纖維化的機(jī)制

2.1 參與免疫調(diào)節(jié) 內(nèi)源性大麻素及其受體在免疫系統(tǒng)表達(dá)并參與免疫調(diào)節(jié)作用[14]，如CB2受體參與B細(xì)胞分化、巨噬細(xì)胞遷移和抗原處理，大麻素受體通過(guò)產(chǎn)生一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)參與肥大細(xì)胞活化。過(guò)去大多數(shù)研究都集中在內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響上，但其在免疫、心血管、胃腸道和呼吸系統(tǒng)中具有多種生物學(xué)效應(yīng)[15]。近年來(lái)研究表明具有免疫調(diào)節(jié)功能的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)是治療炎性疾病及纖維化疾病的靶點(diǎn)之一[16]。文獻(xiàn)報(bào)道，CB2R通過(guò)參與B細(xì)胞分化、巨噬細(xì)胞遷移和磷酸化、抗原處理在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮抗炎作用。內(nèi)源性大麻素和大麻素受體的激活可通過(guò)減少炎性細(xì)胞的募集和增加抗炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生來(lái)抑制肝炎、肺炎、結(jié)腸炎中的炎性反應(yīng)[2-4]。有研究表明，用CB2R激動(dòng)劑HU308對(duì)小鼠盲結(jié)腸穿孔引起的膿毒癥進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果表明CB2R激動(dòng)劑HU308可減輕脂多糖對(duì)巨噬細(xì)胞的刺激，使促炎因子TNF-α、IL-18、IL-1β和NLRP3的表達(dá)降低[14]，說(shuō)明CB2R通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞釋放促炎因子減輕肺部炎性反應(yīng)損傷。

2.2 降解膠原纖維 纖維化的一個(gè)主要病理改變是基底膜增厚，基底膜由大多數(shù)上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成[17]，細(xì)胞外基質(zhì)和膠原沉積是基底膜增厚的一個(gè)重要表現(xiàn)，在各種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，特別是在實(shí)質(zhì)損傷后的組織重構(gòu)中。肺組織細(xì)胞外基質(zhì)的大分子由肺成纖維細(xì)胞(FB)分泌的纖維蛋白(膠原蛋白、彈性蛋白)、結(jié)構(gòu)蛋白或黏附蛋白(纖維連接蛋白和層粘連蛋白)組成[18]，這些組成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子物質(zhì)嵌合在透明質(zhì)酸(HA)等糖胺聚糖的水合多糖凝膠中。成纖維細(xì)胞在炎性介質(zhì)刺激下轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細(xì)胞，肌成纖維細(xì)胞是Ⅰ型膠原蛋白(ColⅠ) 和纖維連接蛋白(FNⅠ)的主要來(lái)源，Col Ⅰ被認(rèn)為是氣道重構(gòu)的早期標(biāo)志，是體內(nèi)含量最豐富也是分布最廣泛的膠原，Col Ⅰ的沉積可引起氣道壁增厚和僵硬[19-20]。FN 是一種黏附性糖蛋白，在 Col Ⅰ合成之前就已經(jīng)產(chǎn)生，能夠刺激上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等細(xì)胞產(chǎn)生膠原纖維，不僅使大、小氣道內(nèi)膠原纖維增多，而且高度紊亂、碎片化參與氣道重構(gòu)[21]。大麻素受體的激活可以降解膠原纖維，心肌纖維化(myocardial fibrosis，MF)是心肌細(xì)胞受損后發(fā)生間質(zhì)化且伴隨大量膠原纖維的沉積導(dǎo)致心臟結(jié)構(gòu)重構(gòu)，可引起慢性心功能不全、惡性心律失常等事件的發(fā)生，并出現(xiàn)心功能進(jìn)行性衰竭[22]。研究表明，內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)中CB2 受體激活可促進(jìn)干細(xì)胞(如造血干/祖細(xì)胞和神經(jīng)祖細(xì)胞)的增殖，心臟祖細(xì)胞激活和增殖在心肌梗死后心肌內(nèi)源性再生和修復(fù)中發(fā)揮重要作用。用CB2 受體激動(dòng)劑AM1241干預(yù)通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K/Akt/Nrf-2信號(hào)通路促進(jìn)心肌梗死后心肌內(nèi)源性再生,改善心臟功能和心臟結(jié)構(gòu)重構(gòu),近年來(lái)用大麻素受體激動(dòng)劑AM1241干預(yù)心肌梗死后心肌纖維化的研究發(fā)現(xiàn)，CB2受體激活可降低心臟組織Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、纖維粘連蛋白、金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)、纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)大麻素受體激動(dòng)劑AM1241可抑制缺氧狀態(tài)下心肌成纖維細(xì)胞的分泌和轉(zhuǎn)型，從而改善心肌重構(gòu)改善心肌纖維化[6]。

2.3 抑制成纖維細(xì)胞分泌 肺成纖維細(xì)胞在肺纖維化的發(fā)生過(guò)程中起著重要的促進(jìn)作用，主要通過(guò)自身的異常增殖與轉(zhuǎn)型，大量分泌細(xì)胞外基質(zhì)直接觸發(fā)肺纖維化和作用于上皮細(xì)胞及一些炎性細(xì)胞間接參與肺纖維化進(jìn)程。隨著成纖維細(xì)胞數(shù)目的不斷增加，肺部成纖維灶逐漸形成，并且逐漸取代正常的肺細(xì)胞組織，這是肺成纖維細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)型引起肺部結(jié)構(gòu)的異常重構(gòu)，進(jìn)而觸發(fā)肺纖維化。但是在肺纖維化過(guò)程中部分成纖維細(xì)胞灶的細(xì)胞可能由其他肺部細(xì)胞如上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化而來(lái)，肺泡上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化。腎小管上皮細(xì)胞向腎纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化導(dǎo)致腎纖維化的發(fā)生。腎臟中存在一個(gè)完整的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)，內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)激活后抑制成纖維細(xì)胞分泌，降低腎組織成纖維的含量，腎臟纖維化是炎性反應(yīng)刺激或免疫等因素所致腎間質(zhì)膠原大量沉積、瘢痕化的一種病理表現(xiàn)，其纖維化的病因與肺纖維化的主要病因類(lèi)似，都存在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化途徑。內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)有抗腎纖維化的作用，文獻(xiàn)報(bào)道[7]，腎臟內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)通過(guò)CB2R在炎性細(xì)胞或?qū)嵸|(zhì)細(xì)胞上的信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生抗炎作用并降低炎性反應(yīng)引起的纖維化，而通過(guò)CB1R的信號(hào)傳導(dǎo)促進(jìn)氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和纖維化，CB1R和CB3R之間可能存在相互制約的作用。在Ⅰ型糖尿病腎病、慢性腎纖維化、藥物性腎小管損傷的動(dòng)物模型中，當(dāng)CB1R信號(hào)高于CB2R時(shí)導(dǎo)致氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)，隨后出現(xiàn)細(xì)胞功能障礙、調(diào)亡和纖維化，而抑制CB1R激活CB2R可減少炎性反應(yīng)和纖維化的發(fā)生。大麻素Ⅱ型受體通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞釋放促炎因子減輕組織炎性反應(yīng)，通過(guò)降低膠原蛋白、纖維粘連蛋白、抑制成纖維細(xì)胞的分泌改善組織重構(gòu)延緩纖維化的發(fā)生。

2.4 調(diào)控平滑肌細(xì)胞增生 氣道平滑肌細(xì)胞發(fā)生增生、肥大、遷移和凋亡抑制，同時(shí)表達(dá)和釋放細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子及蛋白酶類(lèi)，可導(dǎo)致上皮下基膜增厚和細(xì)胞外基質(zhì)沉積，引起氣道重構(gòu)，是最終引起肺功能下降的主要原因。在肝纖維化中，內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)同樣發(fā)揮抗纖維化的作用，肝纖維化是由多種原因?qū)е碌穆愿螕p害，肝星形細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞在損傷區(qū)域增生、聚集，合成并分泌平滑肌肌動(dòng)蛋白及促纖維發(fā)生的細(xì)胞因子,如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-p1)和生長(zhǎng)因子。在中國(guó)慢性乙型肝炎是最主要致病原因，在歐美國(guó)家慢性酒精性肝炎是肝纖維化的主要原因，若損傷因素長(zhǎng)期不能去除，肝纖維化會(huì)持續(xù)發(fā)展，長(zhǎng)期慢性刺激導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度沉積和纖維化瘢痕形成[23]，纖維組織逐漸增多取代原有肝細(xì)胞、破壞其正常結(jié)構(gòu)，最終致肝纖維化。Munoz-Luque等[24]用CB2R激動(dòng)劑JWH133干預(yù)CCL4誘導(dǎo)的大鼠肝硬化，可以降低大鼠肝組織單核細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞凋亡、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)、膠原含量和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2的含量，最終減少肝纖維化的發(fā)生。結(jié)果表明，CB2R激活后抑制炎性反應(yīng)因子釋放，抑制平滑肌細(xì)胞增生最終減少肝纖維化的發(fā)生。這可能是內(nèi)源性大麻素通過(guò)調(diào)控平滑肌細(xì)胞增生抑制肺纖維化的發(fā)生。

2.5 調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá) 氣道基底膜增厚是氣道重構(gòu)的特征性改變，上皮下基質(zhì)金屬蛋白大量沉積—纖維化，是哮喘氣道重構(gòu)的重要組成部分[25-26]?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一個(gè)鋅依賴(lài)性分泌家族，它們能夠降解基質(zhì)的主要成分，如膠原蛋白、明膠和蛋白多糖。基質(zhì)金屬蛋白酶以潛伏形式分泌后，基質(zhì)金屬蛋白酶原酶被基質(zhì)金屬蛋白水解酶激活，其活性形式與特異性抑制劑基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP)相互作用，調(diào)節(jié)肺癌和急慢性炎性疾病(包括COPD、間質(zhì)性肺纖維化)的病理生理。在基質(zhì)金屬蛋白酶家族中，基質(zhì)金屬蛋白酶-2、明膠酶A、基質(zhì)金屬蛋白酶-9、明膠酶B對(duì)基底膜的重要組成部分Ⅳ型膠原具有切割作用。細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)通過(guò)調(diào)節(jié)HTFs中MMPs和TIMP的表達(dá)，顯著提高纖維粘連蛋白和膠原蛋白的生成。CB2R激動(dòng)劑HU308和JWH133改善了TGF-β1誘導(dǎo)的纖維連接蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型膠原的生成，以及MMP-1和MMP-3的表達(dá)，降低細(xì)胞外基質(zhì)的重構(gòu)、纖維粘連蛋白和Ⅰ型膠原在瘢痕形成中起重要作用[27]。因此，大麻素受體激活后可以調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)進(jìn)而干擾纖維化疾病的發(fā)展。

3 內(nèi)源性大麻素抗肺纖維化的作用

氣道炎性反應(yīng)和氣道重構(gòu)是支氣管哮喘2個(gè)主要病理學(xué)特征[28]。氣道平滑肌增厚等病理學(xué)表現(xiàn)是哮喘氣道重構(gòu)的一個(gè)重要特征，氣道重構(gòu)是肺纖維化的一個(gè)重要病變過(guò)程，常由于反復(fù)慢性炎性反應(yīng)損傷和修復(fù)而引起氣道壁結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致肺功能不可逆轉(zhuǎn)損害，肺纖維化的病理改變主要包括間質(zhì)纖維化、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、上皮細(xì)胞增生、膠原纖維增生、平滑肌增生、纖維結(jié)締組織增生[29]。內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)抗心肌纖維化、抗肝纖維化的研究已經(jīng)得到證實(shí)，近年來(lái)關(guān)于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)抗肺纖維化的研究逐漸被人們關(guān)注，有研究證實(shí)[30]，用內(nèi)源性大麻素干預(yù)OVA誘導(dǎo)的過(guò)敏性哮喘小鼠可降低小鼠氣道阻力，減少氣道和肺間隔的膠原含量，減少嗜酸性粒細(xì)胞及炎性介質(zhì)IL-4、IL-5、IL-13、eotaxin的釋放，該研究表明，內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)可抑制氣道炎性反應(yīng)，降低氣道和肺間隔膠原含量，逆轉(zhuǎn)氣道重構(gòu)延緩肺纖維化的發(fā)生。

在百草枯中毒致大鼠急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)中，用JWH133處理后可以減輕肺組織損傷程度，降低支氣管肺泡灌洗液中IL-1β和TNF-α水平，減少肺組織中NF-κB 和AP-1蛋白的表達(dá)，從而減輕百草枯所致的肺纖維化。文獻(xiàn)報(bào)道[17]，用CB2R拮抗劑AM630干預(yù)尼古丁誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠模型后，小鼠肺泡腔厚度增高，而且肺間質(zhì)充血，肺結(jié)構(gòu)破壞，Ⅱ型肺泡細(xì)胞增生和間質(zhì)纖維化，該組結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)和α-SMA表達(dá)最高，而用JWH133 干預(yù)尼古丁誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠模型后肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡間隔最薄。即當(dāng)CB2R被抑制時(shí)肺纖維化程度加重，當(dāng)CB2R被激活時(shí)肺纖維化程度減輕。這一研究表明，內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)中大麻素Ⅱ型受體被激活能降低氣道阻力，減少炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，降低炎性因子釋放，抑制氣道炎性反應(yīng)，能減輕肺組織損傷程度，降低氣道和肺間隔的膠原含量，抑制結(jié)締組織和新生血管的形成延緩肺纖維化的發(fā)生。

一項(xiàng)關(guān)于CB2受體激動(dòng)劑JWH133和抑制劑SR144528對(duì)卵蛋白誘導(dǎo)大鼠氣道重構(gòu)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CB2受體激動(dòng)劑JWH133可以降低卵蛋白誘導(dǎo)的大鼠氣道重構(gòu)肺組織病理?yè)p傷，減少肺組織膠原纖維沉積，降低肺泡灌洗液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，降低肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶蛋白表達(dá)，對(duì)卵蛋白誘導(dǎo)的大鼠氣道重構(gòu)有保護(hù)作用，CB2受體抑制劑SR144528對(duì)卵蛋白誘導(dǎo)的大鼠氣道重構(gòu)沒(méi)有保護(hù)作用。因此，在外周可能主要是大麻素Ⅱ型受體發(fā)揮抗纖維化的作用。

4 內(nèi)源性大麻素抗肺纖維化的調(diào)節(jié)通路

4.1 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信號(hào)通路 既往研究發(fā)現(xiàn)，磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信號(hào)通路在肺部炎性反應(yīng)方面起重要作用，該通路是對(duì)細(xì)胞增殖、分化、調(diào)亡及衰老進(jìn)行調(diào)節(jié)的關(guān)鍵信號(hào)通路之一，Akt在各種纖維化組織中被上調(diào)，在炎性分子刺激下，PI3K和Akt磷酸化并被激活，進(jìn)而通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)細(xì)胞的生存、遷移和應(yīng)激反應(yīng)。近幾年有研究表明，抑制成纖維細(xì)胞的PI3K酶可減少TGF-β1誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞分化和膠原蛋白的產(chǎn)生。有文獻(xiàn)報(bào)道用CB2R激動(dòng)劑JWH133干預(yù)肺缺血再灌注損傷的動(dòng)物模型，可以減輕小鼠肺水腫和肺組織病理學(xué)改變，還可以提高肺組織氧合指數(shù)(PaO2/FiO2)，降低肺組織炎性因子TNF-α、IL-6的表達(dá)，提高過(guò)氧化物酶(SOD)的活性，而用CB2R拮抗劑AM630干預(yù)后CB2受體被激活保護(hù)肺缺血再灌注損傷的作用被阻斷，用PI3K抑制劑LY294002干預(yù)后CB2R對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用也被阻斷，這一研究表明，在不改變CB2R表達(dá)的情況下下調(diào)p-AKT表達(dá)可以阻斷CB2R對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，PI3K/Akt通路可能參與了內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)在減輕肺部炎性反應(yīng)方面的作用[27]。該通路通過(guò)減輕肺部炎性反應(yīng)，延緩氣道重構(gòu)的發(fā)生并達(dá)到抗肺纖維化的作用。

內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)能抑制肺巨噬細(xì)胞釋放血管生長(zhǎng)因子(VEGF-A)、淋巴管生長(zhǎng)因子(EVGF-C)，研究發(fā)現(xiàn)肺巨噬細(xì)胞可以產(chǎn)生2-花生四烯醇甘油、N-花生四烯醇乙醇等內(nèi)源性大麻素，同時(shí)巨噬細(xì)胞還表達(dá)CB1R、CB2R。當(dāng)予CB1R激動(dòng)劑ACEA、CB2R激動(dòng)劑JWH133干預(yù)后，脂多糖(LPS)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞釋放的VEGF-A、VEGF-C減少，該研究表明在肺巨噬細(xì)胞內(nèi)存在一個(gè)完整的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)，當(dāng)加用鈣螯合劑EGTA后巨噬細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性大麻素的效應(yīng)被抑制，說(shuō)明內(nèi)源性大麻素的產(chǎn)生呈鈣依賴(lài)性。用大麻素受體激動(dòng)劑干預(yù)后巨噬細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化上調(diào)和活性氧(ROS)生成增加[31]。巨噬細(xì)胞是免疫反應(yīng)和組織重構(gòu)的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞，通過(guò)產(chǎn)生廣泛的介質(zhì)，包括血管生成和淋巴管生成因子調(diào)節(jié)血管和組織重構(gòu)，在氣道重構(gòu)中，激活肺巨噬細(xì)胞的大麻素受體可能是一種新的調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞逆轉(zhuǎn)重構(gòu)的靶點(diǎn)。

4.2 TGF-β1/Smad3信號(hào)通路 TGF-β1是目前發(fā)現(xiàn)的促纖維化作用最強(qiáng)的生長(zhǎng)因子，其可刺激 PASMCs 發(fā)生表型轉(zhuǎn)換并過(guò)度分泌細(xì)胞外基質(zhì)，主要成分為Col Ⅰ、Col Ⅲ，引起肺動(dòng)脈中膜層增厚，從而導(dǎo)致了肺血管重構(gòu)[32]。Smad3 蛋白是 TGF-β1下游重要的信號(hào)分子之一，當(dāng) TGF-β1與其配體結(jié)合后可介導(dǎo)Smad3 蛋白磷酸化，調(diào)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，促進(jìn)膠原蛋白合成。吡非尼酮是FDA目前推薦的治療特發(fā)性肺纖維化的兩大藥物之一，有顯著抗肺纖維化的作用，吡非尼酮能降低血清炎性因子水平，抑制成纖維細(xì)胞增殖，顯著改善博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化，當(dāng)予CB2R拮抗劑SR144528進(jìn)行干預(yù)后，吡非尼酮的這種抗纖維化作用減弱，CB2R可能是吡非尼酮抗纖維化作用的靶點(diǎn)[33]。有研究發(fā)現(xiàn)，吡非尼酮通過(guò)促進(jìn)Sirt1從而調(diào)控TGF-β1/Smad3信號(hào)通路來(lái)抑制肺纖維化。CB2R在抗肺纖維化中的作用通路可能也包括TGF-β1/Smad3信號(hào)通路。經(jīng)上述2種信號(hào)通路的初步研究表明，激活CB2R能抑制巨噬細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶ERK1/2的磷酸化，能抑制Smad3相關(guān)蛋白的表達(dá)，提示CB2R在抗肺纖維化中的作用可能與上述2種信號(hào)分子介導(dǎo)的調(diào)節(jié)通路有關(guān)。

綜上所述，近年來(lái)關(guān)于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)在心臟、肝臟、腎臟等組織抗纖維化的研究已經(jīng)逐漸被人們認(rèn)識(shí)，但是目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)抗肺纖維化的作用研究還處于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，由于肺纖維化的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，參與因素眾多，目前治療仍然沒(méi)有突破性的進(jìn)展,關(guān)于內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)抗肺纖維化的研究值得關(guān)注，大麻素受體可能是治療肺纖維化的新靶點(diǎn)，能為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)肺纖維化的發(fā)病機(jī)制及治療提供新的方向和證據(jù)。