新生兒輸血獲得性巨細(xì)胞病毒感染的前瞻性研究

劉紅玲　勞富娟

摘要：目的 探討輸血獲得性巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染在新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房（neonatal intensive care unit，NICU）中的發(fā)生率，提出預(yù)防措施。方法 第一階段收集我院NICU 114例其母為CMV-抗體陰性的接受輸血的新生兒。第二階段，另外檢測(cè)了28例其母為CMV抗體陽(yáng)性或陰性的、出生體重<1250g的接受新生兒。所有的142例新生兒均在最后一次輸血后的第6～12w每周1次和每月1次做病毒培養(yǎng)。結(jié)果 142例研究對(duì)象中126例（126/142，88.7%）新生兒血清CMV抗體陰性，16例（16/142，11.3%）新生兒血清CMV抗體陽(yáng)性發(fā)生了CMV感染。結(jié)論 新生兒輸血獲得性CMV感染發(fā)生率和死亡率高。建議新生兒，尤其是低出生體重兒給予血清CMV-特異性抗體陰性、少白細(xì)胞的成分輸血（紅細(xì)胞、血小板及血漿），不能輸注白細(xì)胞。

關(guān)鍵詞：輸血獲得性巨細(xì)胞病毒感染；新生兒；低出生體重兒

輸血被認(rèn)為是新生兒CMV感染的一種來(lái)源。其母親為CMV血清抗體陰性低出生體重兒或接受多次輸血的新生兒是輸血獲得性CMV感染的最高危人群。新生兒輸血獲得性CMV感染高發(fā)生率及高死亡率使得各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的輸血科意識(shí)到預(yù)防其發(fā)生的重要性。盡管使用冰凍去甘油化血液及其制品，或CMV抗體陰性的血液及其制品可以有效防止輸血獲得性CMV感染的傳播，但其成本昂貴。

本研究的目的是證明輸血獲得性CMV感染在NICU中的發(fā)生率，從而介紹有效可行的方法來(lái)預(yù)防這一輸血并發(fā)癥。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究分2個(gè)階段。第一階段，選取從2013年10月～2014年6月入住我院NICU的新生兒（包括正常出生體重兒和低出生體重兒），我們使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)母體、臍帶或新生兒血清的CMV-特異性IgG抗體。選取了114例其母親血清CMV-IgG抗體陰性的輸過(guò)血的新生兒作為研究對(duì)象。所有受試新生兒的父母簽署輸血知情同意書及本研究知情同意書。由于CMV感染的陽(yáng)性率很低，第二階段，我們選取了28例出生體重<1250g早產(chǎn)兒（包括其母血清CMV抗體陽(yáng)性及陰性的早產(chǎn)兒）作為研究對(duì)象。所有的研究對(duì)象僅給予母乳喂養(yǎng)或經(jīng)過(guò)消毒的配方乳喂養(yǎng)。母親血清CMV-抗體陽(yáng)性，母乳需經(jīng)過(guò)病毒滅活（加熱）再喂給新生兒。

1.2病毒培養(yǎng) 每個(gè)研究對(duì)象從最后一次輸血開始6～12w，每周取尿標(biāo)本做病毒培養(yǎng)，每月取咽拭子標(biāo)本做病毒培養(yǎng)，每月取血清標(biāo)本做病毒培養(yǎng)。尿標(biāo)本和咽拭子標(biāo)本在單層人胚胎肺細(xì)胞及含有2%的牛血清培養(yǎng)基上接種并復(fù)制。每2w檢測(cè)一次培養(yǎng)基上的由CMV所產(chǎn)生的典型的細(xì)胞病變效應(yīng)。

1.3血清學(xué)檢查 備好CMV及其對(duì)照抗原將其置于試管中。然后用0.1ml碳酸鹽緩沖液稀釋0.05mlCMV及其對(duì)照抗原使其為pH 9.6，含有0.02% NaN3將其置于37℃環(huán)境中4h，然后用0.5%的鹽水沖洗3次。加入0.05ml牛血清，使其為pH7.2，含有0.5%牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA），0.02NaN3。置于37℃環(huán)境中30min，去除過(guò)量的抗體。

用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清CMV-特異性IgG。如果以前血清CMV-特異性IgG陰性，本次檢測(cè)陽(yáng)性的新生兒，再次取血清標(biāo)本檢測(cè)來(lái)排除假陽(yáng)性。如果CMV-IgG陽(yáng)性同時(shí)也檢測(cè)血清CMV-特異性IgM。

1.4備血及血液制品 所有的血液制品來(lái)源于濰坊市中心血站自愿獻(xiàn)血者。紅細(xì)胞來(lái)源于Rh血型供血者與受血者相同的O型新鮮血液（6d之內(nèi)的血液）。新鮮冰凍血漿來(lái)源于Rh血型供血者與受血者相同的AB型新鮮血液。血小板不需特殊準(zhǔn)備。所有研究對(duì)象均沒(méi)有輸注白細(xì)胞制劑。

2 結(jié)果

第一階段，54例為其母親為血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒（54/114，47.1%）。64例新生兒（64/114，56.1%）父母完成了隨訪。30例新生兒（37/114，32.5%）在出院后失訪，沒(méi)有完成其后的標(biāo)本采集及CMV-特異性抗體的檢測(cè)，無(wú)法獲知是否因?yàn)檩斞鴮?dǎo)致輸血獲得性CMV感染。13例（13/114，11.4%）在新生兒期死亡。我們排除了失訪和死亡研究對(duì)象。12例低出生體重兒（<1250g）且輸注CMV-特異性抗體陰性血液的新生兒沒(méi)有參與本研究。紅細(xì)胞制劑供血者：均數(shù)（9.7±8.6），范圍1～24人。血漿供血者：均數(shù)（6.5±9.3），范圍0～32人。第二階段，另外28例新生兒全部完成隨訪，其中12例（12/28，42.9%）其母親血清CMV-特異性抗體陰性，16例（16/28，57.1%）其母親血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性。在所有供血者中42.5%（296/696）其血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性。

僅2例新生兒發(fā)生了CMV感染，2例新生兒血標(biāo)本中的IgM均對(duì)CMV發(fā)生反應(yīng)，其中1例其母親為血清CMV-特異性抗體陰性，1例其母親為血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性。接受1單位CMV感染的成分輸血，新生兒（其母為血清CMV-特異性抗體陰性）發(fā)生獲得性CMV感染的幾率約為0.16%；接受CMV-特異性抗體陽(yáng)性的成分輸血，發(fā)生獲得性CMV感染的幾率約為0.37%。本研究中新生兒一般情況及輸血性獲得性CMV感染的發(fā)生率見表1。

本研究的第一階段有1例輸血獲得性CMV感染的新生兒，出生體重1110g，孕齡30w，其母為血清CMV-特異性抗體陰性。此新生兒病情復(fù)雜患有壞死性小腸結(jié)腸炎，手術(shù)切除了狹窄的乙狀結(jié)腸。在生后的11w出現(xiàn)CMV感染癥狀，表現(xiàn)為肝臟腫大、黃疸、肝功能明顯受損。此新生兒先后接受了紅細(xì)胞成分輸血（來(lái)源于15位供血者）和血漿輸注（來(lái)源于12位供血者），其中，7位紅細(xì)胞供血者及6位血漿供血者血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性。

本研究的第二階段13例其母為血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性的新生兒中有1例發(fā)生了輸血獲得性CMV感染。此例新生兒出生體重890g，孕齡27w，剖腹產(chǎn)兒，生后沒(méi)有母乳喂養(yǎng)?？梢耘懦笅雮鞑バ訡MV感染。在其住院期間，由于壞死性小腸結(jié)腸炎而手術(shù)切除了一段小腸，還患有支氣管肺發(fā)育不良及持續(xù)胎兒循環(huán)。在生后8w時(shí)出現(xiàn)CMV感染表現(xiàn)，以呼吸道和消化道癥狀為主，氣促、發(fā)紺、間質(zhì)性肺炎表現(xiàn)，黃疸、肝脾腫大等。本患兒在生后10w死亡。此患兒在接受過(guò)紅細(xì)胞成分輸血（來(lái)源于20位供血者）、血小板成分輸血（來(lái)源于30位供血者）和血漿輸注（來(lái)源于30位供血者）。其中，9位紅細(xì)胞供血者、13位血小板供血者和18位血漿供血者血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性。

本研究顯示新生兒（其母血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性）輸血獲得性CMV感染發(fā)生率明顯低于Yeager[1] and Adler[2]的研究。Alder等的研究發(fā)現(xiàn)約24%（7/29）其母血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1250g）發(fā)生輸血獲得性CMV感染。而本研究中一般情況均衡科比的新生兒輸血獲得性CMV感染發(fā)生率僅為2.4%（1/41），兩組比較（P<0.01，χ2檢驗(yàn)）。Yeager等研究顯示約24%（10/41）血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒接受>1次紅細(xì)胞成分輸血或>50ml的全血就有可能發(fā)生輸血獲得性CMV感染，而本研究顯示僅1.4%（1/62）的發(fā)生率，兩組比較，差異有明顯統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001，χ2檢驗(yàn)）。

3 結(jié)論

盡管本研究中輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率與Yeager和Adler的研究比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外3項(xiàng)研究顯示輸血獲得性CMV感染發(fā)生率有明顯的地區(qū)差異。Lamberson等[3]研究報(bào)道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率為1.8%（7/386）。Smith等[4]報(bào)道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1250g）輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率為8.7%（2/23）。Bayer等[5]報(bào)道：其母為血清CMV-特異性抗體陰性的低出生體重兒（<1500g）輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率為6.9%（2/29）。

輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率各報(bào)道有較大差異的原因不是很明確。本研究中供血者血清CMV-抗體陽(yáng)性率為42.5%，Yeager等的研究中為45.3%，Alder等的研究中為34%。在所有研究中供血者的年齡差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

有關(guān)研究證明血清CMV-特異性IgM陽(yáng)性的供血者（提示近期有CMV感染）傳染性較強(qiáng)。是否所有血清CMV抗體陽(yáng)性的血細(xì)胞成分輸血供血者均能傳播CMV感染不明確。接受血清CMV-特異性抗體陽(yáng)性血液次數(shù)和數(shù)量的多少可能是導(dǎo)致輸血獲得性CMV感染的關(guān)鍵因素。如果一個(gè)新生兒在短時(shí)間需要接受多次紅細(xì)胞成分輸血或較多單位的成分輸血，輸血獲得性CMV感染發(fā)生的危險(xiǎn)性較高。在本研究中很少有新生兒接受同一個(gè)供血者的血液或血液制品。僅30例血清CMV-特異性抗體陰性的新生兒在整個(gè)治療過(guò)程中接受>50ml 血清CMV特異性抗體陽(yáng)性血液，而且治療過(guò)程持續(xù)數(shù)月之久。2例發(fā)生輸血獲得性獲得性CMV感染的新生兒均在生后的一個(gè)月內(nèi)接受>50ml的血清CMV抗體陽(yáng)性的輸血。

輸血獲得性CMV感染與所輸注的成分輸血的血液成分相關(guān)聯(lián)性強(qiáng)。血清CMV抗體陰性的血液或去白細(xì)胞的血液成分輸注大大減少輸血獲得性CMV感染的發(fā)生率。

D.G.NJERU等[6]研究報(bào)道，供血者中血清CMV-IgG和IgM陽(yáng)性率分別為97.0%和3.6%。女性陽(yáng)性率要高于男性。因此，許多學(xué)者建議女性在受孕前要檢測(cè)血清CMV特異性抗體，在受孕前清除體內(nèi)的CMV，以防母嬰傳播。由于供血者CMV-特異性抗體的高陽(yáng)性率，實(shí)際上幾乎所有的供血者均有可能暴露于CMV。即使血清CMV-抗體陽(yáng)性的感染者，CMV也會(huì)在白細(xì)胞內(nèi)處于休眠狀態(tài)。因此，減少或去除白細(xì)胞的成分輸血會(huì)減少輸血獲得性CMV感染的發(fā)生。對(duì)于高危人群，包括低出生體重兒、艾滋病患者、放化療所致骨髓移植的腫瘤患者及腎移植患者要輸注血清CMV-特異性抗體陰性、少白細(xì)胞的成分輸血（紅細(xì)胞、血小板及血漿），不能輸注白細(xì)胞。

參考文獻(xiàn)：

[1]Yeager AS， Grumet FC， Hafleigh EB， et al. Prevention of transfusion-acquired cytomegalovirus infections in newborn infants[J].J Pediatrics，2008，108：287-287.

[2]Adler SP， Chandrika T， Lawrence L， et al. Cytomegalovirus infections in neonates acquired by blood transfusions[J].Pediatric Infectious Disease Journal，2003，22：114-118.

[3]Lamberson H， McMillan J， Weiner L， et al. Nursery acquired cytomegalovirus （CMV） infection[J].Tranfusion，2003，29：418.

[4]Simth D， Wright P， Estes W， et al. Posttransfusion cytomegalovirus （PTCMV） infection in neonates weighting less than 1250 grams[J].Transfusion，2004，29：430.

[5]Bayer WL， Buckley SE，Jenkins DC， et al.Acquired cytomegalovirus infections in transfused， premature neonates[J].Blood，2003，74：（suppl 1）：232.

[6]D.G.NJERU， W.O.MWANDA， G.W.KITONYI. Prevalence of Cytomegalovirus Antibodies in Blood Donors at the National Blood Transfusion Center[J].East African Medical Journal，2009，9：（Suppl）：S58.

編輯/趙恒德