SIRT1蛋白在乳腺癌變過程組織中的差異性表達及臨床意義

曹玉文 李玉聰 陳曉文 艷

[摘要] 目的 研究沉默信息調(diào)節(jié)因子（SIRT1）在女性乳腺增生癌變組織中的表達及其與乳腺癌患者臨床病理特征的相關(guān)性。 方法 采用免疫組化的方法對40例癌旁正常乳腺組織、40例乳腺普通型導(dǎo)管增生、32例導(dǎo)管原位癌、80例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中SIRT1蛋白的表達進行檢測，分析SIRT1在乳腺良、惡性病變組織中的分布特點。結(jié)果 SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導(dǎo)管癌、原位癌、普通型導(dǎo)管增生兩組之間蛋白表達有顯著差異（χ21=25.13，χ22=8.54，χ23=25.13， P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率無明顯差異（χ21=1.14，χ22=2.78，χ23=1.19，P>0.05）， SIRT1蛋白的表達率在淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移及PR性質(zhì)上比較有明顯差異性（χ21=4.56，χ22=4.94，P<0.05），而與患者年齡、組織學(xué)分級、TNM分期、ER無顯著相關(guān)性（χ21=1.68，χ22=0.43，χ23=0.26，χ24=0.60，P>0.05）。結(jié)論 該研究提示SIRT1蛋白高表達可能起促癌作用，低表達起到抑癌作用，IRT1蛋白的表達可能會成為乳腺癌細胞發(fā)生發(fā)展中的重要標(biāo)志物。

[關(guān)鍵詞] SIRT1，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌，臨床病理特征

[中圖分類號] R737.9 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）03（b）-0050-02

[Abstract] Objective To research the expression of silent information regulator （SIRT1） in the female breast cancer tissue and its correlation with the clinical pathologic features in patients with breast cancer. Methods The expression of SIRT1 protein in the 40 cases with cancer surrounding normal breast tissue， 40 cases with breast usual ductal hyperplasia， 32 cases with ？ductal carcinoma in situ and 80 cases with breast invasive ductal carcinoma were detected by the immunohistochemical method， the distribution features of SIRT1 in the benign and malignant breast lesions were analyzed. Results There was an obvious difference in the SIRT protein expression between the cancer surrounding normal breast tissue and infiltrating ductal carcinoma， carcinoma in situ and usual ductal hyperplasia （χ21=25.13， χ22=8.54， χ23=25.13， P<0.05） ， there was no obvious difference in the expression rate of UDH， DCIS and IDC by pairwise comparison（χ21=1.14， χ22=2.78， χ23=1.19， P>0.05） ， there was an obvious difference in the expression rate of SIRT1 protein in the lymph node metastasis or not and PR property， （χ21=4.56， χ22=4.94， P<0.05） ， but it has no obvious correlation with the age， histological grade， TNM staging and ER of the patients，（χ21=1.68， χ22=0.43， χ23=0.26， χ24=0.60， P>0.05）. Conclusion The study reminds that the high expression of SIRT1 protein may promote cancer， the low expression may depress cancer， and the IRT1 protein expression may be an important marker of the occurrence and development of breast cancer cells.

[Key words] SIRT1； Breast invasive ductal carcinoma； Clinical pathologic features

乳腺癌是中國女性最常見的癌癥，死亡率較高[1]。該研究選自石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院一附院病理科2000年1月—2010年9月間乳腺石蠟包埋組織192例，對40例癌旁正常乳腺組織（ANBT）、40例乳腺普通型導(dǎo)管增生（UDH）、32例導(dǎo)管原位癌（DCIS）、80例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌（IDC）組織中SIRT1蛋白的表達進行檢測，分析其在乳腺癌變發(fā)生、發(fā)展過程中的表達趨勢及與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，旨在為乳腺癌的早期診斷提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究標(biāo)本該選自石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院一附院病理科乳腺石蠟包埋組織192例：其中包括乳腺癌旁正常組織40例（取自距離乳腺癌癌組織邊緣4 cm以上， 經(jīng)病理證實為正常乳腺組織的標(biāo)本）、普通型導(dǎo)管增生40例、導(dǎo)管原位癌32例、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌80例。所有病例均經(jīng)病理確診，且術(shù)前均未行放療、化療和內(nèi)分泌治療。同時收集及整理乳腺癌患者年齡， 腫瘤組織學(xué)分級， 病理分期， 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及ER、PR、HER-2的表達情況等主要臨床病理資料。

1.2 組織芯片的制備

所有病例復(fù)診后根據(jù)HE切片標(biāo)記出的典型病變范圍， 應(yīng)用法國ALPHELYS公司生產(chǎn)的型號為MiniCore的Tissue Array全自動組織芯片儀在每張HE切片標(biāo)記出典型病變對應(yīng)的蠟塊處取樣， 移至組織芯片蠟塊上。取樣針直徑1 mm， 制成乳腺病變組織（ANBT、UDH、DCIS、DIC）之組織芯片蠟塊。連續(xù)4 μm切片， 制備成組織芯片切片備用。按同樣方法制備另一個取自同一份標(biāo)本且陣列設(shè)計相同的組織芯片蠟塊作為副本， 以便進行重復(fù)實驗。采用組織芯片免疫組化 Envision法檢測SIRT1蛋白表達的情況。

1.3 結(jié)果的判定

綜合考慮陽性細胞百分比及著色強度半定量判定結(jié)果：①每例患者均隨機觀察10個高倍視野，在無背景著色條件下，無著色為0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②計數(shù)10個高倍視野，陽性細胞在同類細胞中所占百分率<1%為0分，1%～24%為1分，25%～49%為2分，50%～74%為3分，75%～100%為4分；最終結(jié)果根據(jù)陽性細胞百分比積分與著色強度積分相乘所得總積分判定，總積分0～3分認(rèn)為是低表達，4～12認(rèn)為是高表達。

1.4 統(tǒng)計方法

所有實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗，α=0.05為有差異性標(biāo)準(zhǔn)。SIRT1蛋白表達在乳腺良惡性病變中的陽性率的差異用χ2檢驗，SIRT1的表達與臨床病理學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性采用分類變量關(guān)聯(lián)性分析。

2 結(jié)果

2.1 乳腺病變組織中SIRT1蛋白的表達情況

SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導(dǎo)管癌、原位癌、普通型導(dǎo)管增生兩組之間蛋白表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 SIRT1蛋白的表達與臨床病理特征的關(guān)系

在80例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中，SIRT1蛋白的表達率在淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移及PR性質(zhì)上比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而與患者年齡、組織學(xué)分級、TNM分期、ER無顯著相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。

3 討論

SIRT1幾乎在所有細胞中都表達，但表現(xiàn)類型會有所區(qū)別，其在大腦、心、肺等組織中顯著存在，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)SIRT1表達所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)與人體其他類型的蛋白質(zhì)一樣，都有兩面性作用，在一些癌細胞中起到抑制細胞發(fā)展的作用。但有研究表明SIRT1在如乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、等多類型的癌癥組織中低表達較少、高表達較多，低表達這些組織中起抑制癌細胞發(fā)展的作用而高表達有促進癌細胞發(fā)展的作用[2-3]。對各種乳腺病變中SIRT1蛋白的表達方式進行研究，結(jié)果顯示，SIRT蛋白在乳腺癌旁正常組織與浸潤性導(dǎo)管癌、原位癌、普通型導(dǎo)管增生兩組之間蛋白表達有顯著差異（P<0.05），UDH、 DCIS、IDC兩兩比較中表達率無明顯差異（P>0.05）。表明SIRT1高表達在乳腺的發(fā)生、發(fā)展的過程中起促進癌細胞發(fā)展的作用，低表達為抑癌作用，與相關(guān)研究一致，表明SIRT1高表達在乳腺組織癌變過程中表達為促進癌細胞發(fā)展的作用[4-5]。

進一步對SIRT1蛋白表達與臨床病理特征的關(guān)系進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌患者SIRT1表達水平明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者。表明低表達的SIRT1促進了乳腺癌的發(fā)展，進一步證明了SIRT1在乳腺癌中起抑癌基因的作用[6-7]。同時我們發(fā)現(xiàn)PR陽性乳腺癌組織中SIRT1表達水平明顯高于PR陰性乳腺癌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），該研究推測SIRT1可能通過PR信號通路參與了乳腺癌的發(fā)展，但由于研究樣本量較少，尚需更大樣本量研究進一步予以證實。且我們發(fā)現(xiàn)SIRT1表達水平與患者年齡、組織學(xué)分級、TNM分期、ER無顯著相關(guān)性（P>0.05）。表明SIRT1表達與患者外因無關(guān)，因此SIRT1可能是衡量乳腺癌進展和預(yù)后的有效生物學(xué)指標(biāo)[8]。

綜上所述，該研究提示SIRT1蛋白高表達水平可能起促癌作用，低表達起到抑癌作用，IRT1蛋白的表達可能會成為乳腺癌細胞發(fā)生發(fā)展中的重要標(biāo)志物。由于該研究樣本較小，研究結(jié)論還待用更多更大樣本結(jié)果驗證。SIRT1如何影響乳腺癌的發(fā)生發(fā)展的分子機制有待進一步研究。

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（收稿日期：2015-12-09）