貧血程度對多發(fā)性骨髓瘤患者免疫功能和生活質(zhì)量的影響

傅愛林，沈剛，沈文香，汪小葛

(江蘇大學(xué)附屬昆山醫(yī)院，江蘇昆山215300)

貧血程度對多發(fā)性骨髓瘤患者免疫功能和生活質(zhì)量的影響

傅愛林，沈剛，沈文香，汪小葛

(江蘇大學(xué)附屬昆山醫(yī)院，江蘇昆山215300)

目的 探討貧血程度對多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者免疫功能及生活質(zhì)量的影響。方法 選擇合并貧血的MM患者95例，將其按照貧血程度分為輕癥組42例(Hb為90～110 g/L)、中癥組28例(Hb 61～89 g/L)、重癥組25例(Hb≤60 g/L)，以同期體檢健康者40例作為對照組。比較各組Th1/Th2、T淋巴細(xì)胞亞群比例(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)、B淋巴細(xì)胞比例(CD19+)、B淋巴細(xì)胞亞群比例(CD19+CD20+CD27-、CD19+CD20+CD27+和CD19+CD38+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM和IgE)和補(bǔ)體(C3、C4)水平。采用KPS功能狀態(tài)評分評價(jià)各組生活質(zhì)量。結(jié)果 與對照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組Th1/Th2、CD4+/CD8+、CD19+CD38+比例及血清IgG、IgA水平均降低，CD8+比例及血清C3、C4水平均升高(P均<0.05)。與輕癥組比較，中癥組和重癥組CD19+比例均降低，但重癥組降低更明顯(P均<0.05)。與輕癥組和中癥組比較，重癥組Th1/Th2、CD4+/CD8+均降低，CD8+比例均升高(P均<0.05)。與對照組和輕癥組比較，中癥組和重癥組血清IgM水平均降低(P均<0.05)。各組CD3+、CD4+、CD19+CD20+CD27-、CD19+CD20+CD27+比例及血清IgE水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。對照組、輕癥組、中癥組、重癥組KPS功能狀態(tài)評分分別為100、(62±12)、(45±11)、(31±9)分，兩兩比較P均<0.05。結(jié)論 貧血越嚴(yán)重，MM患者的免疫功能紊亂越嚴(yán)重，生活質(zhì)量越差。

多發(fā)性骨髓瘤；貧血；體液免疫；細(xì)胞免疫；生活質(zhì)量

多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種源于B細(xì)胞，以產(chǎn)生免疫球蛋白的漿細(xì)胞克隆性增生為特征的惡性腫瘤，其發(fā)病率占惡性血液疾病的10%左右，目前仍無根治方法[1，2]。MM患者存在不同程度的細(xì)胞免疫和體液免疫紊亂。貧血是MM的常見并發(fā)癥，占初診患者的60%～80%，可影響治療效果及患者預(yù)后[3]。臨床上關(guān)于貧血程度對MM患者免疫功能及生活質(zhì)量影響的研究較少，為此我們進(jìn)行了如下研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2005年3月～2015年6月我院收治合并貧血的MM患者95例，男51例、女44例，年齡37～84(62.2±7.5)歲?；颊呔稀吨袊喟l(fā)性骨髓瘤診治指南》[4]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除合并其他腫瘤者、合并嚴(yán)重心肝腎功能不全者。將MM患者按照貧血程度分為輕癥組42例(Hb 90～110 g/L)、中癥組28例(Hb 61～89 g/L)、重癥組25例((Hb≤60 g/L)。輕癥組男22例、女20例，年齡(60.5±9.3)歲；中癥組男15例、女13例，年齡(61.4±8.1)歲；重癥組男14例、女11例，年齡(63.8±9.8)歲。選擇同期本院體檢健康者40例作為對照組，男20例、女20例，年齡36～85(61.8±10.4)歲。各組性別、年齡均具有可比性。

1.2 免疫指標(biāo)檢測 采集各組清晨空腹靜脈血10 mL，分成兩份加入到真空采血管中。一份加入乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)抗凝，置于4 ℃條件下，用于T、B淋巴細(xì)胞檢測。另一份置于37 ℃溫箱中1 h，然后置于4 ℃冰箱過夜，3 000 r/min離心10 min，收集血清置于4 ℃條件下，用于免疫球蛋白及補(bǔ)體檢測。①Th1/Th2：采用Elabscience公司提供的ELISA試劑盒檢測各組血清IFN-γ和IL-10，以IFN-γ代表Th1、IL-10代表Th2，計(jì)算Th1/Th2。②T淋巴細(xì)胞亞群比例：取50 μL抗凝血與20 μL CD3+、CD4+和CD8+抗體混勻后在室溫避光孵育15 min，在收樣前加入1.5 mL紅細(xì)胞裂解液，室溫下避光孵育15 min，1 500 r/min離心5 min，棄上清液后加入PBS清洗一次，用PBS重懸。采用流式細(xì)胞儀分析總T細(xì)胞CD3+、TH細(xì)胞CD4+和Tc細(xì)胞CD8+比例，計(jì)算CD4+/CD8+。③B淋巴細(xì)胞及其亞群比例：取100 μL抗凝血，加入20 μL FITC標(biāo)記的鼠抗人CD19單克隆抗體，同型陰性對照IgG-FITC及PE標(biāo)記的鼠抗人CD25單克隆抗體、同型陰性對照IgG-PE，4 ℃條件下孵育30 min，加入紅細(xì)胞裂解液，1 000 r/min離心10 min，棄上清，用PBS重懸，上流式細(xì)胞儀檢測CD19+比例，以此表示B淋巴細(xì)胞比例。取100 μL抗凝血，分別加入ECD-CD19、PECD20、FITC-CD27、PE-CD38以及同型陰性對照，反應(yīng)后采用流式細(xì)胞儀檢測B淋巴細(xì)胞亞群比例，即CD19+CD20+CD27-為初始B細(xì)胞、CD19+CD20+CD27+為記憶性B細(xì)胞和CD19+CD38+為抗體分泌細(xì)胞。④血清免疫球蛋白及補(bǔ)體水平：采用速率散射比濁法檢測血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和IgE，采用ELISA法檢測血清補(bǔ)體C3、C4，試劑盒均由美國Beckman公司提供。

1.3 生活質(zhì)量評價(jià) 采用KPS功能狀態(tài)評分標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)各組生活質(zhì)量?？偡?00分，得分越低，說明生活質(zhì)量越差[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量

2 結(jié)果

2.1 各組免疫功能指標(biāo)比較 與對照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組Th1/Th2、CD4+/CD8+、CD19+CD38+比例及血清IgG、IgA水平均降低，CD8+比例及血清C3、C4水平均升高(P均<0.05)。與輕癥組比較，中癥組和重癥組CD19+比例均降低，但重癥組降低更明顯(P均<0.05)。與輕癥組和中癥組比較，重癥組Th1/Th2、CD4+/CD8+均降低，CD8+比例均升高(P均<0.05)。與對照組和輕癥組比較，中癥組和重癥組血清IgM水平均降低(P均<0.05)。各組CD3+、CD4+、CD19+CD20+CD27-、CD19+CD20+CD27+比例及血清IgE水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1、2、3。

表1 各組Th1/Th2及T淋巴細(xì)胞亞群比例比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕癥組比較，#P<0.05。

表2 各組B淋巴細(xì)胞比例及B淋巴細(xì)胞亞群比例比較±s)

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕癥組比較，#P<0.05。

表3 各組免疫球蛋白及補(bǔ)體水平比較±s)

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕癥組比較，#P<0.05。

2.2 各組生活質(zhì)量比較 對照組、輕癥組、中癥組、重癥組KPS功能狀態(tài)評分分別為100、(62±12)、(45±11)、(31±9)分，兩兩比較P均<0.05。

3 討論

MM是漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤，如不及時(shí)治療，進(jìn)展期MM患者的中位生存時(shí)間僅為6個(gè)月，接受傳統(tǒng)化療后僅有25%的患者可以生存5年以上，一般中位生存時(shí)間不超過3年[6]。研究發(fā)現(xiàn)，MM患者本身存在免疫系統(tǒng)的復(fù)雜缺陷，過繼免疫細(xì)胞治療很可能成為未來治療MM的方向之一[7]。MM的特征為骨髓漿細(xì)胞瘤和一株完整性的單克隆免疫球蛋白或Bence Jones蛋白質(zhì)過度生成，并在骨髓內(nèi)惡性增殖，引起骨折、骨髓功能衰竭及多發(fā)性溶骨性損害、腎臟損害等。MM患者最常見的臨床表現(xiàn)是貧血[8]，主要表現(xiàn)為正細(xì)胞正色素性貧血，多為首發(fā)癥狀。貧血的發(fā)生機(jī)制主要有以下幾方面：①骨髓瘤細(xì)胞浸潤紅骨髓，造成正常造血組織減少。②并發(fā)腎功能衰竭，促紅細(xì)胞生成素產(chǎn)生相對減少，導(dǎo)致紅細(xì)胞生成減少。③某些細(xì)胞因子如IL-2β、TNF-β和IL-6等干擾紅系祖細(xì)胞對促紅細(xì)胞生成素的反應(yīng)。MM的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，患者免疫功能低下不僅與B細(xì)胞、漿細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫缺陷有關(guān)，而且與T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫缺陷有關(guān)[9，10]。

淋巴細(xì)胞是人體主要的免疫細(xì)胞，其數(shù)量變化在一定程度上反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平。研究表明，腫瘤患者體內(nèi)存在著抗腫瘤免疫應(yīng)答，并以細(xì)胞免疫為主。T淋巴細(xì)胞(CD3)可分為CD4和CD8兩大亞群，其中CD4細(xì)胞是輔助性T細(xì)胞，是主要的免疫應(yīng)答細(xì)胞；CD8細(xì)胞是細(xì)胞毒性T細(xì)胞，并對CD4細(xì)胞具有調(diào)節(jié)抑制作用；CD4/CD8可反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)[11]。研究表明，MM初診患者外周血CD3+CD8+T細(xì)胞較健康人群明顯增高，并導(dǎo)致CD4+/CD8+比例失衡，進(jìn)展期CD4+/CD8+比穩(wěn)定期有所降低，提示T細(xì)胞亞群比例紊亂與MM的發(fā)生、發(fā)展緊密相關(guān)[12]。本研究結(jié)果表明，與對照組相比，不同程度貧血者CD8+比例明顯升高，而CD3+和CD4+比例變化不明顯，使得CD4+/CD8+明顯下降，貧血程度較重者變化更明顯。說明MM患者體內(nèi)存在T細(xì)胞亞群數(shù)量異常及比例失衡，與貧血嚴(yán)重程度有關(guān)。

正常情況下，機(jī)體Th1和Th2細(xì)胞功能處于動態(tài)平衡狀態(tài)，維持機(jī)體正常的細(xì)胞免疫和體液免疫功能；當(dāng)機(jī)體受到異己抗原攻擊時(shí)Th1或Th2細(xì)胞中某一亞群功能升高，另一亞群功能降低，出現(xiàn)Th1/Th2平衡失調(diào)并向Th1或Th2轉(zhuǎn)化的趨勢，這種現(xiàn)象稱為Th1/Th2漂移。研究表明，急慢性淋巴細(xì)胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、MM等血液系統(tǒng)腫瘤免疫格局偏向Th2，削弱了在腫瘤免疫中起重要作用的Th1型反應(yīng)，有助于腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸[13]。研究發(fā)現(xiàn)，MM患者中存在Th1與Th2比例失衡[14]。本研究結(jié)果顯示， 伴有貧血的MM患者Th1/Th2均顯著低于對照組，貧血程度較重者降低更明顯。

B淋巴細(xì)胞的功能是產(chǎn)生抗體、提呈抗原，并分泌細(xì)胞因子參與免疫調(diào)節(jié)。CD19是B淋巴細(xì)胞表面的特異抗原，可反映總B淋巴細(xì)胞數(shù)量。本研究結(jié)果顯示，伴有貧血的MM患者CD19+、CD19+CD38+比例均低于對照組，貧血程度較重者降低更明顯。說明MM患者外周血中多克隆性B細(xì)胞減少，存在體液免疫功能缺陷，與貧血嚴(yán)重程度有關(guān)[15]。健康人血清中的Ig含量是恒定的，在機(jī)體防御中發(fā)揮重要作用，過高或過低均可能是一種病態(tài)。MM患者體內(nèi)單克隆漿細(xì)胞惡性增殖并分泌大量單克隆Ig，惡性漿細(xì)胞病無節(jié)制地增生，廣泛浸潤和大量單克隆Ig的出現(xiàn)及沉積，造成正常Ig的生成受抑制。由于骨髓瘤細(xì)胞的增生程度和浸潤范圍不一，合成分泌單株異常Ig多少也不同[16]。本研究結(jié)果顯示，不同貧血程度的MM患者血清IgG、IgA和IgM水平均低于對照組，而補(bǔ)體C3和C4水平均高于對照組，且貧血程度較重者變化更明顯。本研究對照組、輕癥組、中癥組、重癥組KPS功能狀態(tài)評分逐漸降低，說明貧血程度對MM患者的生活質(zhì)量有明顯影響。

綜上所述，貧血對MM患者的體液免疫、細(xì)胞免疫功能及生活質(zhì)量均有明顯影響；貧血越嚴(yán)重，患者免疫功能紊亂越嚴(yán)重，生活質(zhì)量越差。

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