干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法對結(jié)核病的診斷價值

曹英迪

(平頂山市結(jié)核病防治所/平頂山市第三人民醫(yī)院檢驗科，河南平頂山467000)

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干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法對結(jié)核病的診斷價值

曹英迪

(平頂山市結(jié)核病防治所/平頂山市第三人民醫(yī)院檢驗科，河南平頂山467000)

摘要:目的評價干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法(TB－IGRA)對結(jié)核病的診斷價值。方法研究對象分為兩組，結(jié)核病組302例，疾病對照組290例，結(jié)核病組分為肺結(jié)核（236例）和肺外結(jié)核（66例），肺結(jié)核患者分為涂陽肺結(jié)核（62例）和涂陰肺結(jié)核（174例）。對所有研究對象均用干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法(TB－IGRA)來進行T細胞檢測，并同時做TST和結(jié)核抗體檢測。結(jié)果TB－IGRA診斷結(jié)核病的敏感性（86.1%）高于TST的敏感性（64.6%），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=37.64，P＜0.01），也高于結(jié)核抗體的敏感性（59.6%），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=53.57，P＜0.01）。TB－IGRA診斷結(jié)核病的特異性（88.3%）高于TST的特異性（51.7%），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=92.25，P＜0.01），也高于結(jié)核抗體的特異性（60.3%），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=59.26，P＜0. 01）。TB－IGRA對肺外結(jié)核和涂陰肺結(jié)核的檢出率為84.8%和81.6%。結(jié)論TB－IGRA對于結(jié)核病的診斷有較高的敏感性和特異性，對于難以診斷的肺外結(jié)核和涂陰肺結(jié)核也有較高的陽性檢出率?？梢宰鳛樵\斷結(jié)核病的重要輔助手段。

關鍵詞：結(jié)核??；診斷；干擾素釋放試驗

結(jié)核病是一種古老的疾病，近年來，結(jié)核病疫情引起世界衛(wèi)生組織高度重視。據(jù)統(tǒng)計，全世界現(xiàn)有18.6億結(jié)核病患者，第4次全國結(jié)核病流行病學調(diào)查顯示，我國已有三分之一以上的人感染了結(jié)核菌，其中活動性肺結(jié)核病患者450萬，每年死于結(jié)核病的約有25萬人，是其他各類傳染病死亡人數(shù)總和的2倍[1]。結(jié)核病疫情不容樂觀，傳統(tǒng)的方法不能滿足臨床快速、準確診斷結(jié)核病的需要。目前，干擾素釋放實驗(TB－IGRA)已經(jīng)列入美國、歐洲等地結(jié)核病診療指南，以協(xié)助診斷結(jié)核感染的存在[2，3]。本研究通過對研究對象進行TB－IGRA試驗、TST試驗、結(jié)核抗體試驗，來探討TB－IGRA對結(jié)核病的診斷價值。

1　材料與方法

1.1研究對象選取平頂山市結(jié)核病防治所接診的結(jié)核病患者302例為結(jié)核病組，男190例，女112例，平均年齡21～72歲，為本院2015年2月到2015年7月確診為結(jié)核病的住院患者。該組中肺結(jié)核236例，肺外結(jié)核66例。在236例肺結(jié)核中，涂陽肺結(jié)核62例，涂陰肺結(jié)核174例。本院同期排除結(jié)核病的其他肺部疾病患者290例，作為疾病對照組，其中男181例，女109例，平均年齡27～69歲。所有研究對象均排除免疫缺陷型疾病，未使用免疫抑制劑或增強劑，無嚴重肝腎功能衰竭史。

1.2試劑干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法試劑由北京萬泰生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，結(jié)核菌素PPD由北京祥瑞生物制品有限公司生產(chǎn)，結(jié)核抗體試劑由濰坊康華生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

1.3 TB－IGRA檢測采集研究對象靜脈血5ml，肝素鋰抗凝，按照試劑說明書逐步進行。

1.4 TST檢測在研究對象上肢前臂皮內(nèi)注射PPD 0.1ml，72h后，觀察并記錄，以硬結(jié)平均直徑大于15mm或無論硬結(jié)直徑多少只要合并水泡判定為陽性。

1.5結(jié)核抗體檢測采集靜脈血3ml，離心取血清，按照試劑說明書逐步進行。

1.6統(tǒng)計學分析率的比較采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1 TB－IGRA、TST、結(jié)核抗體在結(jié)核病組、對照組中的檢測結(jié)果TB－IGRA、TST、結(jié)核抗體診斷結(jié)核病的敏感性分別是86.1%、64.6%、59.6%。將TBIGRA的敏感性數(shù)據(jù)分別和TST、結(jié)核抗體敏感性數(shù)據(jù)比較，差異均有統(tǒng)計學意義（χ2=37.64，P＜0.01；χ2=53.57，P＜0.01）。TB－IGRA、TST、結(jié)核抗體診斷結(jié)核病的特異性分別是88.3%、51.7%、60.3%。將TB－IGRA的特異性數(shù)據(jù)分別和TST、結(jié)核抗體特異性數(shù)據(jù)比較，差異均有統(tǒng)計學意義（χ2=92.25，P＜0.01；χ2=59.26，P＜0.01）。見表1。

2.2 TB－IGRA、TST對肺結(jié)核和肺外結(jié)核的檢測結(jié)果TB－IGRA對肺結(jié)核的檢出率為86.4%，TST對肺結(jié)核的檢出率為67%，兩數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=24.16，P＜0.01）。

表1　TB- IGRA、TST、結(jié)核抗體在結(jié)核病組、對照組中的檢測結(jié)果

TB－IGRA對肺外結(jié)核的檢出率為84.8%，TST對肺外結(jié)核的檢出率為54.5%，兩數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=14.35，P＜0.01）。

TB－IGRA對肺結(jié)核和肺外結(jié)核的檢出率為86.4%和84.8%，兩數(shù)據(jù)比較，差異無統(tǒng)計學意義（χ2=0.11，P>0.05）。見表2。

表2　TB- IGRA、TST對肺結(jié)核和肺外結(jié)核的檢測結(jié)果

2.3 TB－IGRA、TST對涂陽肺結(jié)核和涂陰肺結(jié)核的檢測結(jié)果TB－IGRA對涂陽肺結(jié)核的檢出率為87.1%，TST對涂陽肺結(jié)核的檢出率為64.5%，兩數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=8.62，P＜0.01）。

TB－IGRA對涂陰肺結(jié)核的檢出率為81.6%，TST對涂陰肺結(jié)核的檢出率為59.2%，兩數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計學意義.（χ2=20.98，P＜0.01）。

TB－IGRA對涂陽肺結(jié)核和涂陰肺結(jié)核的檢出率為87.1和81.6%，兩數(shù)據(jù)比較，差異無統(tǒng)計學意義（χ2=0.98，P>0.05）。見表3。

表3　TB- IGRA、TST對涂陽肺結(jié)核和涂陰肺結(jié)核的檢測結(jié)果

3　討論

結(jié)核病是全世界最主要的傳染病之一，我國有5億多人感染結(jié)核分枝桿菌，屬結(jié)核菌高感染國家，而我國的卡介苗接種率也較高，因此，這兩點導致TST對結(jié)核病的診斷特異性較低，所以盡管TST檢測一直沿用至今，但它的低特異性一直為臨床所詬病。本次研究也證實了這一點，TST的特異性為51.7%。另外，TST檢測也無法區(qū)分結(jié)核和非結(jié)核分枝桿菌感染。目前研究表明，TST不適合HIV感染者，年幼的兒童等結(jié)核病高危人群[4]。因此，一直以來，臨床希望有一種新的方法能夠代替TST試驗來診斷結(jié)核病。

近年來，TB－IGRA作為一種新的免疫學方法進入臨床應用。人體感染結(jié)核菌后，可產(chǎn)生特異性T淋巴細胞，這些淋巴細胞再次接觸抗原后可被激活，分泌γ干擾素。TB－IGRA檢測就是用結(jié)核桿菌特異性抗原在體外刺激待檢者的全血，檢測γ干擾素的含量變化來判斷結(jié)核桿菌的感染。

TB－IGRA是應用ESAT－6和CFP－10作為抗原，這些抗原的蛋白編碼來源于結(jié)核分枝桿菌基因中的一個特異性基因片段RD－1，這個基因片段不存在于大部分的非結(jié)核分枝桿菌及所有的牛分枝桿菌（包括卡介苗）中，因此，TB－IGRA可以較好的區(qū)分卡介苗接種和結(jié)核分枝桿菌感染。Lalvani 等[5]首先將此原理用于結(jié)核病的診斷。

本次研究將TB－IGRA和TST、結(jié)核抗體檢測進行了比較。結(jié)果顯示TB－IGRA、TST、結(jié)核抗體診斷結(jié)核病的敏感性分別為86.1%、64.6%、59.6%，特異性分別是88.3%、51.7%、60.3%。研究數(shù)據(jù)表明TB－IGRA的敏感性、特異性均高于TST和結(jié)核抗體的敏感性、特異性。差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。TB－IGRA診斷結(jié)核病的敏感性和特異性與其他報道的敏感性（81.1%～88.64%）、特異性（86.54%～96.67%）相符[6－8]。本次研究表明，TB－IGRA檢測和TST、結(jié)核抗體比較，在診斷結(jié)核病方面有一定的優(yōu)勢。

肺外結(jié)核和涂陰肺結(jié)核一直是臨床診斷難題，在66例肺外結(jié)核中，有56例TB－IGRA陽性，陽性檢出率84.8%，與葛燕萍等的研究數(shù)據(jù)接近（80%）[9]。在174例涂陰肺結(jié)核中，有142例TBIGRA陽性，陽性檢出率81.6%，與李紅等的研究數(shù)據(jù)接近（85.8%）[10]。結(jié)果表明，對于肺外結(jié)核和涂陰肺結(jié)核TB－IGRA也可作為一種有效的輔助診斷方法。

TB－IGRA除了敏感性和特異性較高以外，還有以下優(yōu)點，TB－IGRA試驗設置陰陽性對照，以利于評價受試者的基礎免疫狀態(tài)（陽性對照無反應）和污染（陰性對照孔產(chǎn)生大量干擾素）所致的不準確結(jié)果，從而提高了方法的可靠性。TB－IGRA較TST時間短，可在體外完成，結(jié)果判斷無需回訪，且不受人為因素影響。本研究表明，TB－IGRA是一種

優(yōu)于TST的檢測方法，對于難以診斷的涂陰肺結(jié)核和肺外結(jié)核是一種很好的輔助診斷方法。

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·檢驗與臨床·

·檢驗與臨床·

(收稿日期2015-10-27；修回日期2016-01-20)

DOI：10.3969/j.issn.1674－1129.2016.02.030

中圖分類號：R446.61，R52

文獻標識碼：A

文章編號：1674－1129(2016)02－0215－02