卵黃抗體在乳仔豬抗腹瀉方面的應(yīng)用

卵黃抗體（IgY）作用廣泛，今天主要介紹IgY在仔豬抗腹瀉方面的應(yīng)用。卵黃抗體的發(fā)現(xiàn)在二十世紀(jì)早期，而系統(tǒng)性研究發(fā)生在二十世紀(jì)七八十年代，這與困擾當(dāng)時(shí)養(yǎng)豬業(yè)的仔豬腹瀉有關(guān)。

抗生素濫用問題和食品藥物殘留問題逐步受到關(guān)注，因此非抗生素保健治療介質(zhì)的開發(fā)越發(fā)受到重視。

1 卵黃抗體粉開發(fā)的背景

雞蛋能夠孕育生命，因此它含有生命所需的所有營養(yǎng)物質(zhì)，雞蛋中蛋黃占 28 %～32 %，蛋清占52 %～56 %，營養(yǎng)豐富，生物利用率高。雞蛋中富含的功能性成分，如蛋清中的溶菌酶，蛋黃中的免疫球蛋白和30 %油脂（其中67 %甘油三酯、19 %卵磷脂、5 %腦磷脂）。卵磷脂是優(yōu)良的天然乳化劑，可乳化油脂，增強(qiáng)機(jī)體對脂肪的消化吸收，能預(yù)防動脈硬化，對公豬的性功能有明顯的增強(qiáng)作用。

2 蛋黃抗體（EYA）來源和特性

禽類的免疫系統(tǒng)包括細(xì)胞免疫和體液免疫，分別受胸腺和法氏囊的控制。當(dāng)機(jī)體受到外來抗原刺激后，法氏囊內(nèi)的B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，分泌特異性抗體進(jìn)入血液循環(huán)，當(dāng)血液流經(jīng)卵巢時(shí)，特異性抗體在卵細(xì)胞中逐漸蓄積，形成蛋黃抗體；特異性抗體移行進(jìn)入卵細(xì)胞是受體作用的結(jié)果，因而特異性抗體可在卵細(xì)胞中大量蓄積，濃度遠(yuǎn)高于血液中的IgY。來源于雞蛋黃中的蛋黃抗體，作為替代抗生素的新型產(chǎn)品正在引起人們的關(guān)注。因無耐藥、無殘留、無公害、安全高效，被美國FDA列為一般公認(rèn)安全物質(zhì)。

IgY的理化特性與哺乳動物的IgG相似。IgY的分子量約為180 KDa，由兩條輕鏈（2L）和兩條重鏈（2H）組成，分子量分別為60 KDa～70 KDa和22 KDa～30 KDa，其等電點(diǎn)約為5.2。與一般哺乳動物IgG相比，IgY具有較強(qiáng)的耐壓、耐熱、耐酸和抗酶降解能力。

耐壓試驗(yàn)表明，蛋黃抗體粉在壓力16.0 MPa的條件下都很穩(wěn)定，抗體活性無變化。蛋黃抗體粉在水溶水浴條件下，70 ℃處理5 min，抗體活性無明顯下降。蛋黃抗體粉在干燥箱內(nèi)，85 ℃處理 3 min，抗體活性無明顯下降。蛋黃抗體粉在pH 2.8的胃蛋白酶中37 ℃溫育1 h，仍可保存80 %的活性。在4 ℃～8 ℃冷藏條件下，有效期2年以上；室溫保存，有效期為12個月以上。

3 IgY作用及機(jī)理

特定的IgY能黏附于特定病毒的衣殼上，直接抑制病毒的生長繁殖；IgY黏附于細(xì)菌的菌毛上，使細(xì)菌不能黏附于黏膜上皮細(xì)胞，失去感染能力。IgY能夠促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的吞噬作用，起到調(diào)理細(xì)胞免疫的作用。此外，IgY還能中和細(xì)菌和霉菌毒素，并與病毒抗原結(jié)合使病毒失去感染宿主細(xì)胞的能力。一部分IgY在腸道消化酶作用下，降解為含抗體的可結(jié)合片段小肽，這些片段含有抗體的可變小肽（Fab）部分，這些小肽很容易被腸道吸收，進(jìn)入血液后能與特定的病原菌黏附因子結(jié)合，使病原菌不能黏附易感細(xì)胞而失去致病性，而IgY的穩(wěn)定區(qū)（Fe部分）留在腸內(nèi)。

4 蛋黃抗體在動物生產(chǎn)中應(yīng)用的優(yōu)越性

與其他免疫制劑的生產(chǎn)相比，蛋黃含有大量的IgY（每枚蛋100 mg～200 mg），產(chǎn)量高；蛋黃含有大量特異性抗體（每枚蛋 10 mg～20 mg），能大規(guī)模生產(chǎn)，且產(chǎn)品安全和環(huán)境友好。就使用來說，長期使用不會產(chǎn)生抗藥性，產(chǎn)品能直接飼喂動物。就效果而言，抗體治療具有高效性、特效快速和經(jīng)濟(jì)性。

與疫苗免疫相比，被動與主動免疫在控制腸道病原體方面的作用不同。在主動免疫動物時(shí)，抗體在免疫動物的身體（全身）中非常有效，但是血清（血液）中的抗體，一般不運(yùn)送到腸道，因此無法有效對抗腸道致病菌。且在體內(nèi)抗體的生產(chǎn)需要數(shù)天/數(shù)周，因此如果發(fā)生急性感染，疫苗來不及保護(hù)機(jī)體，從而常導(dǎo)致動物死亡。如采用被動免疫，用一種動物（蛋雞）生產(chǎn)抗體，通過口服能非常有效地控制腸道病原體，能夠提供即時(shí)和全面的保護(hù)，在幾小時(shí)內(nèi)即可發(fā)揮作用。只需少量的高品質(zhì)抗體就能夠起效，成本較低。其缺點(diǎn)是每種抗體均針對特定的病原體，必須使用正確的抗體。一旦腸道內(nèi)抗體消失，便失去保護(hù)，可能需要長時(shí)間使用以避免再感染。被動免疫的實(shí)例見圖1。

5 IgY在控制乳仔豬抗腹瀉方面的應(yīng)用

以大腸桿菌為例，致病性大腸桿菌能夠通過菌毛與宿主腸道的受體結(jié)合，黏附在腸道上皮細(xì)胞上，產(chǎn)生外毒素、溶血素等毒素。其致病機(jī)理如圖2所示。被仔豬攝入的大腸桿菌在空腸和回腸增殖，附著在腸道上皮上產(chǎn)生毒素導(dǎo)致腹瀉的發(fā)生，從而造成水和電解質(zhì)失衡，這會影響仔豬的增重，甚至導(dǎo)致仔豬死亡。

飼喂蛋黃抗體可以控制不同物種的腹瀉。如大腸桿菌引起的豬腹瀉，沙門氏菌引起的小鼠腹瀉，以及輪狀病毒引起的貓和牛腹瀉等。

以實(shí)驗(yàn)為例，介紹IgY的使用效果（表1、表2）。

曼尼托巴大學(xué)的研究報(bào)告中指出，與飼喂豬血漿粉的豬相比，使用IgY對豬的飼料采食量和增重?zé)o顯著影響，且十二指腸、空場和回腸的絨毛高度也無顯著差異。該研究還發(fā)現(xiàn)，使用卵黃抗體能夠顯著降低豬血漿中的尿素氮，而對豬進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)表明，尿素氮越低，蛋白沉積越高。

6 蛋黃抗體與抗生素控制腸道疾病對比

由于抗生素的濫用，許多抗生素對某些腸道致病菌的控制不再有效，病原體已出現(xiàn)對多種抗生素的耐藥性，且抗生素?zé)o法控制病毒性傳染病（如TGE）。目前，許多國家即將禁止使用抗生素作為飼料添加劑?？股卦谧罱K產(chǎn)品中的殘留問題也使人們必須尋求抗生素的替代品，并制定合理的解決方案。而在動物保健發(fā)面，IgY具有其優(yōu)勢，能夠高效地預(yù)防和治療腸道傳染病，可持續(xù)使用并且環(huán)保，可以放心使用；不會在家禽、牛奶或肉類制品中殘留。與抗生素相比，蛋黃抗體不會產(chǎn)生耐藥性，能夠高效地防治病毒性疾病，可能是未來控制腸道傳染病的唯一有效手段。賽法特公司所生產(chǎn)的卵黃抗體產(chǎn)品采用的是基因工程抗原，抗原純度高，免疫原性好；采用高效專用佐劑，蛋黃抗體水平是常規(guī)技術(shù)的100倍。