乳豬腹瀉的原因及其防制措施

中圖分類號：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C 文章編號：1001-0769（2016）02-0036-04

2010年秋以來，在我國一些規(guī)模化豬場較多的養(yǎng)豬大省或地區(qū)，發(fā)生了初生乳豬腹瀉、且發(fā)病率高死亡率高的疫情，很多地方呈爆發(fā)性或地方流行性。給這些地區(qū)的養(yǎng)豬業(yè)造成了較大的損失。2012年以來各地的疫情有愈演愈烈的趨勢，至今仍未有得到有效的控制。

臨床獸醫(yī)工作者們收集了大量發(fā)病豬場的臨床資料，獸醫(yī)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)和研究部門也都作了很多病料檢測。大量數(shù)據(jù)表明豬流行性腹瀉病毒PEDV是主要元兇，有時(shí)伴有其他腸病毒的混合感染。這種秋冬季節(jié)性多發(fā)性疫病造成的廣泛危害，也提示了我國養(yǎng)豬行業(yè)在環(huán)境設(shè)備建設(shè)、生物安全管理、動(dòng)物營養(yǎng)配給、季節(jié)性流行疫病的控制預(yù)案等方面上存在嚴(yán)重缺位。

1 病因

豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhea virus，PEDv）屬冠狀病毒科冠狀病毒屬。本病1978年第一次在英國報(bào)道，以后比利時(shí)、荷蘭、法國及丹麥都有發(fā)生，在排除了豬傳染性胃腸炎后確定為豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea，PED），并分離到了代表毒株CV777株。在歐洲發(fā)生并流行的豬流行性腹瀉病能引起公豬、母豬、保育豬、生長育、肥豬嚴(yán)重的水樣腹瀉，并能造成較大損失，但哺乳仔豬不發(fā)病。20世紀(jì)90年代中后期，這種病在歐洲的流行和危害趨于緩和。1992后PED在亞洲掀起波瀾，日本、韓國、泰國、中國等地疫情嚴(yán)重，和歐洲流行PED的疫情完全相反，PED主要危害產(chǎn)房的初生乳豬，特別是2～4日齡的初生乳豬高發(fā)病和死亡，而母豬、保育豬、生長育肥豬只有少數(shù)出現(xiàn)輕微的腹瀉，一過性的呈良性經(jīng)過。

PEDv只有一個(gè)血清型，但有不同地區(qū)的分離株。歐洲有以CV777為代表的五種以上毒株，韓國分離到9個(gè)S基因毒株，中國也分離出LJB-03為代表的多個(gè)毒株。

PEDv有四種結(jié)構(gòu)蛋白：一是S蛋白，也叫纖突蛋白，是病毒的主要免疫原性蛋白。它由1 383個(gè)氨基酸組成。不同地區(qū)分離株的S基因差異性稍大，堿基序列的同源性在96 %～97 %之間。PEDv根據(jù)其S蛋白結(jié)構(gòu)功能團(tuán)又分為Sa和Sb二個(gè)亞型。S蛋白是一種糖蛋白，位于病毒粒子的表面。它的作用是識別靶細(xì)胞受體并與之融合進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi)，引起靶細(xì)胞凋亡，使成熟病毒粒子出芽和分泌。影響屬主細(xì)胞的信號傳導(dǎo)，抑制屬主細(xì)胞核酸信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯。二是N蛋白，也叫核衣殼蛋白，也是病毒的免疫原性蛋白。由441個(gè)氨基酸組成。N蛋白的核苷酸排列保守穩(wěn)定，它誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗體免疫和細(xì)胞免疫。N蛋白在病毒復(fù)制和裝配中發(fā)揮重要作用。三是M蛋白，它是病毒囊膜結(jié)構(gòu)蛋白，它介導(dǎo)與屬主細(xì)胞融合，刺激產(chǎn)生干擾素，參與病毒的復(fù)制與裝配。四是E蛋白，也叫小包膜蛋白，能引起屬主T細(xì)胞凋亡，參與病毒包膜和粒子的形成。和其他病毒相比PEDv結(jié)構(gòu)蛋白的免疫原性（主要是S蛋白）并不強(qiáng)，介導(dǎo)產(chǎn)生T、B效應(yīng)細(xì)胞的能力低。這給研制高效疫苗帶來困難。

PEDv在一般的病毒培養(yǎng)細(xì)胞上不能繁殖。很多年后人們才找到非洲的綠猴Vero細(xì)胞適合它的增殖，而且還要在培養(yǎng)細(xì)胞上添加豬氨基肽酶N。即使這樣，它在Vero細(xì)胞上增殖也不能豐收，所以要開發(fā)高效弱毒疫苗在細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)上必須要突破。

2 傳播方式

PEDv的主要傳染源是帶毒母豬。母豬感染但并不表現(xiàn)癥狀，病毒從母豬的糞便排出，污染產(chǎn)房、產(chǎn)床、污染飲水飼料。出生乳豬與母豬的糞便，受污染的產(chǎn)房器物接觸，通過消化道感染。帶毒母豬還可以通過呼吸道黏液排毒，在連續(xù)發(fā)病的豬場母豬乳汁的排毒能使疫情更猛烈，死亡率更高。乳豬的胃部環(huán)境可能對PEDv沒有明顯的負(fù)面影響。同一產(chǎn)房出生日齡不超過5 d的乳豬都極易感染發(fā)病，但出生日齡超過7 d的乳豬發(fā)病率低或不發(fā)病，死亡率不高。廣西、湖北、湖南、浙江等地豬場對發(fā)病情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn)：初產(chǎn)母豬的乳豬發(fā)病率明顯高于經(jīng)產(chǎn)母豬，疫情更加猛烈，死亡率極高。這可能與初產(chǎn)母豬的免疫力低有關(guān)。很多豬場的育肥豬群，公母豬群并沒有臨床表現(xiàn)。這可能是病毒的毒力減弱所致。在發(fā)病豬場由于母豬配種產(chǎn)子的批次不一，疫情可以稍有停息后再次出現(xiàn)，常常20 d～30 d再次發(fā)病，以致有些豬場疫情延續(xù)3個(gè)月以上。

疫情是哪里來的？人們疑惑不解。

疫區(qū)的調(diào)查統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，疫情可能來自四個(gè)方面：

（1）引進(jìn)種豬是疫病導(dǎo)入的主要原因，許多豬場發(fā)病前均有引進(jìn)公母豬或使用它場精液的記錄。

（2）人員車輛的交流帶進(jìn)疫情。運(yùn)輸種豬、商品肥豬，特別是收購病豬、殘次豬的車輛最危險(xiǎn)，這些沒有任何處理的車輛就像疫情的播種機(jī)，走到哪里疫情就散布到哪里。豬場間人員的流動(dòng)也是不可忽視的因素。另外，嚙齒動(dòng)物（如老鼠）、貓和狗在疫情的傳播中有著重要作用。

（3）在生豬養(yǎng)殖密集區(qū)，河水的流動(dòng)是疫情擴(kuò)散的重要方式，許多地方的疫情呈線性串狀發(fā)生。

（4）根據(jù)疫病流行的特點(diǎn)人們推測可能是沒有完全致弱的弱毒苗所致。換句話說：引起乳豬發(fā)病的病毒就是疫苗毒。

3 致病性

PEDv專一性嗜腸黏膜上皮細(xì)胞，主要侵害空腸、回腸、盲腸黏膜柱狀上皮細(xì)胞，使之變性凋亡脫落。這樣雖然腸上皮細(xì)胞腺窩分泌水分、消化液、電解質(zhì)能力依然存在，但腸黏膜上皮細(xì)胞吸收水分、消化狀的營養(yǎng)物質(zhì)、電解質(zhì)的能力喪失。發(fā)病乳豬會(huì)表現(xiàn)劇烈的水樣腹瀉，迅速脫水而呈現(xiàn)酸中毒。這種惡病質(zhì)極易引起乳豬在短時(shí)間衰竭死亡。

PEDv感染的潛伏期很短，一般只有3 h～5 h。乳豬出生2 d感染病毒10 h后就能出現(xiàn)癥狀：一部分乳豬開始表現(xiàn)嘔吐，吐出凝固的乳塊；可能是腹部疼痛，乳豬不安，走動(dòng)，尾巴不停搖動(dòng)；水樣腹瀉，每次腹瀉末期都從肛門排出黏性的乳白色長黏液。隨著病情加重，腹瀉的次數(shù)增多，水樣腹瀉物也增多，腹瀉10 h乳豬就有脫水的表現(xiàn)，眼窩下陷，眼眉骨，后前肢關(guān)節(jié)突出。腹瀉36 h的乳豬就可能死亡，同窩發(fā)病的乳豬死亡率達(dá)90 %以上。瀕死前的許多乳豬倒地四肢劃動(dòng)，表現(xiàn)神經(jīng)癥狀（低血糖與腦部缺氧）。在發(fā)病豬場沒有有效的救治措施。疫情造成的損失常給養(yǎng)豬生產(chǎn)者很大的心里傷害。

PED的病變在消化道的小腸，特別是空腸回腸。在感染的早期，病毒能使腺胃部出血，還能出現(xiàn)損傷性淺表層潰瘍；肝臟腫大黃染，這表明肝細(xì)胞變性損傷，肝功能嚴(yán)重障礙。空腸回腸的柱狀上皮細(xì)胞是病毒感染復(fù)制的靶細(xì)胞（也許這里有許多氨基肽酶N），病毒在這里植入-快速復(fù)制-分泌。這一過程只需要幾個(gè)小時(shí)。腸絨毛膜柱狀上皮細(xì)胞迅速凋亡壞死脫落。由于小腸分泌消化酶、水分、電解質(zhì)的能力依然存在，不能被吸收的腸內(nèi)容物愈積愈多，導(dǎo)致腹瀉快速劇烈發(fā)生。腸絨毛膜的脫落使小腸壁菲薄，腸內(nèi)充滿氣體。由于病毒只損失腸黏膜，不傷及腸基底膜血管，臨床上看不到腸出血的病變。

PED的防制必須有綜合措施，建立健康的母豬群是其核心內(nèi)容。

4 預(yù)防措施

嚴(yán)格有效的能合理實(shí)施的生物安全措施。

4.1 安全引種，有效的隔離與馴化

把住這個(gè)疫情流入的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。避開疫病高發(fā)季節(jié)引種，不到疫區(qū)引種，不從問題豬場引種，不同時(shí)向二個(gè)以上的豬場引進(jìn)種豬。了解引種目標(biāo)豬場一年來本病疫情狀況。PED從感染病毒到完全排完病毒需要55 d以上，因此引種隔離的時(shí)間也需要60 d以上。在此期間做好后備母豬的免疫注射十分重要。

4.2 對運(yùn)輸活豬（包括殘次、淘汰豬）的車輛及人員嚴(yán)格管制

運(yùn)輸車輛的輪子和車廂、來訪人員的鞋、外衣、用具、皮包都要進(jìn)行滅源處理，可以參照對口蹄疫的處理措施。

4.3 滅鼠及杜絕家養(yǎng)動(dòng)物

豬場的呲齒動(dòng)物（老鼠），馴養(yǎng)的狗貓，是本傳播病的重要媒介。豬場必須做好滅鼠，圈養(yǎng)狗，不養(yǎng)貓。

4.4 建立良好的消毒制度和有效的實(shí)施措施能有效地控制疫病流入和病毒在豬群中的傳播

每周二次對豬舍和豬場環(huán)境噴霧消毒必不可少，消毒液要濕潤所有的噴灑物。對PEDv來說，碘和復(fù)合碘消毒液最有效。

4.5 糞便處理

PEDv主要通過感染發(fā)病豬排出的糞便，污染豬舍、用具、水源使疫病擴(kuò)散。做好豬場的糞便處理能控制疫病傳播或減輕對發(fā)病豬的危害。豬糞便的堆積發(fā)酵，沼氣池的過濾發(fā)酵都能使病毒快速失活。

4.6 免疫接種

對于豬的病毒性疫病一般使用疫苗都有很好免疫效果。使用相應(yīng)的疫苗建立非易感豬群就能預(yù)防感染發(fā)病。但迄今為止PED還是一個(gè)例外：現(xiàn)有的滅活苗、試制的弱毒苗不能取得十分有效的免疫保護(hù)，這與PEDv特性有關(guān)。

PEDv屬正粘RNA病毒，它有四種結(jié)構(gòu)蛋白，抗原決定簇以纖突蛋白S為主，它介導(dǎo)產(chǎn)生IgA和中和抗體IgG。膜蛋白M的免疫原性很差，不能刺激機(jī)體產(chǎn)生足夠的免疫應(yīng)答。對于腸病毒來說，抗病毒感染的黏膜抗體IgA對病毒進(jìn)入靶細(xì)胞致關(guān)重要，它與靶細(xì)胞的受體結(jié)合就能封住病毒進(jìn)入靶細(xì)胞的門戶，這是抗感染的第一道防線。但I(xiàn)gA也只有阻止感染功能，并不能阻止本病的發(fā)生?，F(xiàn)有的滅活苗疫苗沒有產(chǎn)生黏膜抗體的能力，效果不佳。作為抗病毒感染的中和抗體IgG不僅姍姍來遲，而且產(chǎn)生的抗體滴度也很低，不能完成中和作用，這會(huì)導(dǎo)致感染迅速擴(kuò)大，動(dòng)物發(fā)病并快速排毒。冠狀病毒（PEDv）的免疫方式是以T細(xì)胞免疫為主，由于病毒的S蛋白的免疫原性很差，即使是活疫苗也不能刺激產(chǎn)生足夠的效應(yīng)T細(xì)胞（T細(xì)胞抗原受體細(xì)胞TCR，細(xì)胞毒性細(xì)胞）和淋巴因子，被PEDv感染的腸柱狀上皮細(xì)胞不能及時(shí)清除，病毒會(huì)安然地完成在病豬細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制，完成它的增殖與破壞性使命。

PED病毒培養(yǎng)困難，收獲率低，制約著高效安全疫苗的開發(fā)。經(jīng)過15年的努力人們才找到PEDv在非洲的綠猴Vero細(xì)胞上（一種病毒培養(yǎng)細(xì)胞株）培養(yǎng)的方法。而且需要添加豬氨基肽酶N。即使這樣它的增殖量也很低，條件稍有改變（如pH等）就不能有好收成。所以在小范圍的實(shí)驗(yàn)室中病毒培養(yǎng)成功并不一定保證工廠化生產(chǎn)的弱毒苗質(zhì)量穩(wěn)定。韓國已經(jīng)有弱毒PED疫苗供應(yīng)市場，這種疫苗在中國使用并沒有收到滿意的效果，不能阻止PED的發(fā)生。中國也有研究機(jī)構(gòu)研制了弱毒苗投入市場試用，試用的效果也不理想。筆者注意到在廣西、浙江、湖南的一些豬場使用這些弱毒苗后，疫情反而加重，產(chǎn)房乳豬死亡更多。分析原因可能有二種：一是這些疫苗毒致弱不充分，即這些弱毒苗不是安全疫苗。韓國和中國的弱毒苗都是利用各自分離野毒株在豬傳代細(xì)胞上連續(xù)接種，讓PEDv在自然屬主細(xì)胞上來致弱，這種傳統(tǒng)的盲目的減毒培養(yǎng)方式會(huì)有一些作用，PED弱毒苗就是繼代80代后被認(rèn)為安全的弱毒疫苗，它們可能對母豬、公豬、保育、豬生長育肥豬是安全的，但對于沒有任何抗病能力的新生乳豬仍然是強(qiáng)毒。二是弱毒苗使用的方法不正確。PED的弱毒苗接種母豬后，其疫苗的排毒期也會(huì)有55 d以上。如果人們在母豬產(chǎn)前30 d接種弱毒苗，這些母豬生產(chǎn)后正好在排疫苗毒，乳豬吸食了乳汁，接觸了母豬的糞便，便會(huì)馬上發(fā)病。

豬場的經(jīng)營者們在對付生豬疫病時(shí)，第一想到的是用有效的疫苗，一勞永逸地解決問題，第二想到的是疫病發(fā)生后找一種特效藥物來治療。這種思路正確，想法善良，對于豬瘟偽狂犬、圓環(huán)病毒病能達(dá)到他們的要求，但PED疫苗免疫的結(jié)果達(dá)不到他們的愿望。

現(xiàn)有的病毒性腹瀉三聯(lián)滅活苗免疫效果不好，滅活苗不能產(chǎn)生黏膜抗體，即使添加了好的免疫佐劑也只能產(chǎn)生微弱的細(xì)胞免疫，且中和抗體姍姍來遲。而免疫效應(yīng)細(xì)胞和黏膜抗體才是抗PEDV真正需要的物質(zhì)。PED弱毒疫苗能產(chǎn)生粘膜抗體，中和抗體，也能產(chǎn)生細(xì)胞免疫，但現(xiàn)在要解決活疫苗的安全性和有效性這二個(gè)問題。

如果使用疫苗必須多次接種，反復(fù)刺激才有一定的作用。先要使用弱毒苗對后備母豬、公豬做好基礎(chǔ)免疫，6～7月齡時(shí)連續(xù)免疫注射3次。經(jīng)產(chǎn)母豬推薦的免疫方法有以下二種：

其一：病毒性腹瀉弱毒三聯(lián)苗，妊娠母豬40日齡、45日齡、50日齡注射3次。不允許注射妊娠65日齡以后的母豬。

其二：四次免疫法。45日齡、50日齡注射二次病毒性腹瀉三聯(lián)活苗。85日齡、95日齡注射二次腹瀉三聯(lián)滅活苗。

4.7 返飼

許多豬場受到PED的危害，沒有理想的處置措施，于是有人想起了過去對付冬痢的一種方法即使用發(fā)病豬的糞便來喂未發(fā)病豬，讓它們刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，保護(hù)未發(fā)病豬群。10年前，這種辦法好像有些作用?，F(xiàn)在很多豬場使用后非但沒有作用，多數(shù)豬場使用病料返飼后，豬場發(fā)病更加嚴(yán)重（返飼可能對于傳染性胃腸炎、輪狀病毒病有效，PED有一個(gè)顯著的特點(diǎn)是排毒期長得多）。所以，返飼是一個(gè)無奈之舉，存在負(fù)面作用，返飼會(huì)通過哺乳母豬給乳豬散毒；返飼會(huì)使病源通過易感豬循環(huán)下去。

為了發(fā)揮返飼的最佳作用，縮小返飼的副作用，這里介紹對PED返飼的正確方法；

A.選用發(fā)生腹瀉了12 h乳豬的小腸（不能使用發(fā)生了腹瀉48 h后乳豬的小腸）和脾臟（胃大腸及內(nèi)容物肝腎都不要），采集時(shí)避免污染，集中放入容器。

B.采集的病料馬上使用豆?jié){機(jī)絞碎，按病料的重量1∶4加入生理鹽水，每20份病料加入100萬青霉素和40萬鏈霉素，攪勻。不要加牛奶（那樣會(huì)增加更多的異種抗原影響免疫應(yīng)答）。

C.每份病料的制取液可以返飼4頭母豬.

D.返飼方法：病料只能返飼給懷孕50日齡前的母豬，70日齡的母豬不能與病料接觸。45日齡飼喂一次，50日齡再飼喂一次。

E.制備的病料剩下的一半要迅速冷凍保存，下次使用時(shí)自然解凍。

F.返飼前后7 d不能使用抗病毒藥物或免疫抑制性藥品。

返飼后母豬如果出現(xiàn)輕度腹瀉證明返飼效果良好，不必治療。

4.8 產(chǎn)房管理

乳豬腹瀉發(fā)生在產(chǎn)房，必定與產(chǎn)房和母豬有關(guān)。要保證產(chǎn)房清潔衛(wèi)生干燥，合適的溫度；做好產(chǎn)仔母豬產(chǎn)前洗澡消毒，乳豬吃奶前擠掉母豬各個(gè)奶頭中的奶水；做好產(chǎn)仔母豬的糞便管理，及時(shí)清除產(chǎn)仔母豬排出的糞便，用拖把擦掉糞便的痕跡，再用復(fù)合碘消毒液噴灑糞便處，做到乳豬出生后24 h不與母豬的糞便接觸；乳豬在出生后6 h內(nèi)要吃到40 mL初乳（至關(guān)重要）；同產(chǎn)房1周齡內(nèi)的乳豬發(fā)生PED后迅速隔離，并做好消毒處理。

5 PED的治療

PED沒有有效的治療方法，對癥治療效果并不顯著。

發(fā)病乳豬及時(shí)補(bǔ)液，自由飲用葡萄糖甘氨酸溶液。不能飲水的病豬，腹腔內(nèi)注射補(bǔ)液。腹腔注射0.9 %生理鹽水40 mL，加0.2 mL阿托品和3 mL慶大霉素。腹腔補(bǔ)液要加溫。病豬群飲用補(bǔ)液鹽溶液（氯化鈉3.5 g、氯化鉀1.5 g、碳酸氫鈉2.5 g、葡萄糖20 g、兌水1 000 mL）。注射干擾素有一定作用，干擾素2 000 IU～3 000 IU，每天1～2次皮下注射。連續(xù)3 d。使用抗生素為了防止繼發(fā)感染而加重病情。環(huán)丙沙星按2.5 mg/kg+黃連素5 mL肌注，2次/ d，連用3 d～5 d。慶大霉素每1 000 IU/kg～1 500 IU/kg，12 h注射1次。連用2 d。2.5 %恩諾沙星肌肉注射液 1 mL/10 kg，每天2次?！酢?/p>

參考文獻(xiàn)：（4篇，略）