參歸多維口服液對小鼠抗疲勞功能的影響

單曉會，苑廣信，趙南晰，杜培革，安麗萍

(1.北華大學(xué)藥學(xué)院，吉林 吉林　132013；2.北華大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 吉林　132011)

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參歸多維口服液對小鼠抗疲勞功能的影響

單曉會1，2，苑廣信1，趙南晰1，杜培革1，安麗萍1

(1.北華大學(xué)藥學(xué)院，吉林 吉林132013；2.北華大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 吉林132011)

摘要：目的 研究參歸多維口服液對正常小鼠抗疲勞功能的影響.方法以參歸多維口服液濃縮液0.1，1.0，3.0 mL/kg作為低、中、高劑量組，小鼠連續(xù)灌胃給藥30 d，末次給藥30 min后，小鼠負(fù)荷5%體質(zhì)量，進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，觀察小鼠負(fù)重游泳時間及對小鼠增重的影響；末次給予參歸多維口服液30 min、游泳90 min、休息60 min后采血，進(jìn)行血清尿素含量測定；末次給予參歸多維口服液30 min后處死小鼠取肝臟，測定肝糖原；末次給予參歸多維口服液30 min后采血，不負(fù)重游泳10 min，在游泳后立即(游泳后0 min)和游泳后休息20 min采血，測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值.結(jié)果參歸多維口服液各劑量組小鼠增重與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組游泳時間明顯長于陰性對照組(P<0.01)；參歸多維口服液高劑量組小鼠游泳后血清尿素低于陰性對照組(P<0.05)；與陰性對照組比較，參歸多維口服液各劑量組肝糖原儲備比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與陰性對照組比較，參歸多維口服液高劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積有所降低.結(jié)論參歸多維口服液具有緩解體力疲勞的功能.

關(guān)鍵詞：參歸多維口服液；抗疲勞；乳酸；肝糖原

【引用格式】單曉會，苑廣信，趙南晰，等.參歸多維口服液對小鼠抗疲勞功能的影響[J].北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2016，17(2)：196-199.

疲勞是一個涉及許多生理、生化因素的綜合性生理過程，是機(jī)體腦力或體力到達(dá)一定階段時必然出現(xiàn)的一種正常的生理現(xiàn)象，它既標(biāo)志著機(jī)體原有工作能力的暫時下降，又可能是機(jī)體發(fā)展到疾病狀態(tài)的一個先兆[1].如果人體長期處于一種疲勞狀態(tài)，會產(chǎn)生反應(yīng)遲鈍、注意力減退和記憶力下降等癥狀，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量，甚至產(chǎn)生病理性損害.因此，開發(fā)安全、有效、可長期服用的功能食品來延緩疲勞并加速疲勞消除一直是研究的熱點(diǎn)[2-3].

我國有著傳統(tǒng)中醫(yī)藥的豐富資源，“藥食同源”理論是我國發(fā)展功能食品的獨(dú)特優(yōu)勢.本研究的參歸多維口服液是根據(jù)中醫(yī)藥理論，采用現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)、藥理學(xué)的理論和方法，將多種藥食同源的中藥材進(jìn)行組合，以人參、生姜、大棗、甘草、桂皮、白芍、陳皮、當(dāng)歸和?；撬釣橹饕希⑤o以3種維生素的中藥營養(yǎng)素組方.本組方及其制備工藝已經(jīng)獲得國家授權(quán)發(fā)明專利[4].本文利用小鼠負(fù)重游泳為模型實(shí)驗(yàn)，觀察實(shí)驗(yàn)動物的行為學(xué)特點(diǎn)，并檢測生化指標(biāo)，評價參歸多維口服液抗疲勞功能，為該功能食品的應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1材料

1.1樣品

參歸多維口服液濃縮液，由本實(shí)驗(yàn)室自制.

1.2實(shí)驗(yàn)動物與分組

選用SPF級ICR雄性小鼠(長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司)，體質(zhì)量18～22 g，進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d，隨機(jī)分組，每組10只.以口服液濃縮液0.1，1.0，3.0 mL /kg，分別取1.0，10.0，30.0 mL濃縮液加蒸餾水至200 mL作為低、中、高劑量組，各組小鼠灌胃量均為0.2 mL/10 g，連續(xù)灌胃30 d.本樣品試驗(yàn)不需設(shè)置糖對照組.

1.3儀器與試劑

游泳箱(50 cm×50 cm×40 cm)；尿素測定試劑盒(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)；肝糖原試劑盒(南京市建成生物工程研究所)；SBA-40C型生物傳感分析儀 、TBA-120FR型全自動生化分析儀等(日本東芝).

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1負(fù)重游泳試驗(yàn)

末次給予參歸多維口服液30 min后，將小鼠尾根部負(fù)荷5%體質(zhì)量的鉛皮，于水深約30 cm，水溫(25±1)℃游泳箱中游泳.記錄小鼠游泳時間(min)、小鼠自游泳開始至死亡時間.

2.2血清尿素測定

末次給予參歸多維口服液30 min，于(30±0.5)℃溫度水中游泳90 min后，再休息60 min采血，2 000 r/min離心10 min，取血清，采用全自動生化分析儀測定尿素含量.

2.3肝糖原測定

末次給予參歸多維口服液30 min后處死小鼠，取肝臟，精確稱取肝臟75 mg，按試劑盒說明書步驟進(jìn)行操作，在620 nm處波長進(jìn)行比色測定，并按試劑盒說明書提供的公式換算肝糖原含量.

2.4血乳酸測定

末次給予參歸多維口服液30 min后采血20 μL后，于(30±0.5)℃溫度水中不負(fù)重游泳10 min，立即(游泳后0 min)采血20 μL，游泳后休息20 min再采血20 μL，測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值.計(jì)算3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積來判斷結(jié)果.

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5中單因素方差分析進(jìn)行均值比較，方差齊時，各組間兩兩比較用LSD法；方差不齊時，各組間兩兩比較采用Tamhane法.

3結(jié)果

3.1參歸多維口服液對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量的參歸多維口服液30 d，與陰性對照組比較，各劑量組小鼠增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組游泳時間明顯長于陰性對照組(P<0.01).見表1.

3.2參歸多維口服液對小鼠血清尿素及小鼠增重的影響

與陰性對照組比較，參歸多維口服液各劑量組小鼠增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組小鼠游泳后血清尿素低于陰性對照組(P<0.05).見表2.

3.3參歸多維口服液對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響

與陰性對照組比較，參歸多維口服液各劑量組小鼠增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，各劑量組肝糖原儲備差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).見表3.其中,肝糖原質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)算公式如下：

肝糖原質(zhì)量分?jǐn)?shù)(標(biāo)準(zhǔn)液葡萄糖濃度)×測定前稀釋倍數(shù)(100×10)×1.11.

注：與陰性對照組比較，**：P<0.01

表2　參歸多維口服液對血清尿素及小鼠增重的影響

注：與陰性對照組比較，*：P<0.05

表3　參歸多維口服液對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響

注：與陰性對照組比較，*：P<0.05

3.4參歸多維口服液對小鼠血乳酸值及小鼠體質(zhì)量的影響

與陰性對照組比較，參歸多維口服液對各劑量組小鼠增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積降低(P<0.05).見表4和表5.其中：3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0 min血乳酸值+2×游泳后休息20 min血乳酸值).

表4　參歸多維口服液對小鼠血乳酸值的影響

表5　參歸多維口服液對小鼠血乳酸曲線下面積及小鼠增重的影響

注：與陰性對照組比較，*：P<0.05

4討論

參歸多維口服液由八種中藥、?；撬岷?種維生素組成，其中人參、生姜和大棗都有明確的抗疲勞作用，并且牛磺酸可以改善機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的狀態(tài)、調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、增強(qiáng)免疫力和抗疲勞的作用[5-9].本實(shí)驗(yàn)選擇小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)為疲勞實(shí)驗(yàn)動物模型，觀察小鼠游泳至力竭的時間，發(fā)現(xiàn)參歸多維口服液高劑量組可以明顯增加小鼠游泳時間，提示參歸多維口服液可以提高小鼠體能，這與參歸多維口服液多種組分有抗疲勞作用有關(guān).小鼠增重在給藥后無明顯變化，說明參歸多維口服液對小鼠增重沒有影響.檢測小鼠血清尿素結(jié)果提示：參歸多維口服液高劑量組顯著低于陰性對照組，說明在小鼠力竭運(yùn)動后，參歸多維口服液可以促進(jìn)血清尿素的清除，有利于機(jī)體從疲勞狀態(tài)得到恢復(fù).并且參歸多維口服液高劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積降低，說明其可以減少乳酸堆積，加速乳酸的清除，能夠緩解疲勞，這與參歸多維口服液高劑量組可以延長小鼠游泳時間相一致.并且參歸多維口服液各劑量組肝糖原儲備并沒有明顯改變，說明其抗疲勞作用并不是通過動用肝糖原的儲備實(shí)現(xiàn)的.

綜上所述，參歸多維口服液可以延長小鼠負(fù)重游泳時間，促進(jìn)疲勞小鼠的體力恢復(fù)，具有抗疲勞作用.參歸多維口服液組方中的多種中藥為長白山道地藥材，開發(fā)其為抗疲勞功能食品，即可以解決疲勞人群的亞健康狀態(tài)，又可以拉動地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展，具有一定的社會和經(jīng)濟(jì)價值.

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【責(zé)任編輯：陳麗華】

Influence of ShenGuiDuoWei Oral Liquid on the Anti-fatigue Function of Normal Mice

Shan Xiaohui1,2，Yuan Guangxin1，Zhao Nanxi1，Du Peige1，An Liping1

(1.CollegeofPharmacy，BeihuaUniversity，Jilin132013，China；2.AffiliatedHospitalofBeihuaUniversity，Jilin132011，China)

Abstract：Objective To study the influence of ShenGuiDuoWei oral liquid on the anti-fatigue function of normal mice.Methods ShenGuiDuoWei oral liquid with 0.1，1.0，3.0 mL/kg BWD was administrated by intragastric administration as low，middle and high dose group on mice for 30 days.At 30 min after the last administration，mice with 5% body weigh were forced to load swim.The swimming time of the mice and mice weight heavy were observed.After the last administration of ShenGuiDuoWei oral liquid for 30 min，then to swim for 90 min，rest for 60 min，the mice serum urea was detected.The mice were killed after 30 minutes ShenGuiDuoWei oral liquid was given for the last time，and then the liver was taken，the glycogen was determined.After the last administration of drug for 30 min and blood collection，then to swimming for 10 min but no loading，and blood lactic acid of three time points were detected respectively for swimming immediately and swimming rest for 20 min.Results Compared with the negative control group，mice weight gain was no significant difference between the each experiment group of ShenGuiDuoWei oral liquid and the negative control group(P>0.05).The swimming time of the high dose group was longer than that of the negative control group，and the difference was significant(P<0.01).ShenGuiDuoWei oral liquid for the high dose group of mice after swimming serum urea is lower than that in negative control group，and the difference was significant(P<0.05)；Hepatic glycogen reserve is no significant difference between the ShenGuiDuoWei oral liquid in each dose group and the control group (P>0.05)；ShenGuiDuoWei oral liquid for the high dose group of mice after swimming three time points of area below blood lactic acid curve decreased，there was significant difference(P<0.05)compared with the negative control group.Conclusion ShenGuiDuoWei oral liquid had anti-physical fatigue effect.

Key words：shenGuiDuoWei oral liquid；anti-fatigue；lactic acid；liver glycogen

中圖分類號：R285

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

作者簡介：單曉會(1987-)，女，碩士研究生，主要從事藥物分析學(xué)研究,E-mail：1175307068@qq.com；通信作者：安麗萍(1973-)，女，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事中藥活性物質(zhì)分析學(xué)研究，E-mail：alp960@126.com.

基金項(xiàng)目：吉林省醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金計(jì)劃項(xiàng)目(20150311029YY；20140311043YY).

收稿日期：2015-12-09

文章編號：1009-4822(2016)02-0196-04

DOI：10.11713/j.issn.1009-4822.2016.02.011