乙酰半胱氨酸含量測(cè)定方法篩選

[摘 要]目的 對(duì)乙酰半胱氨酸含量測(cè)定方法進(jìn)行篩選比較，采用滴定法測(cè)定乙酰半胱氨酸原料含量。方法 精密稱(chēng)取乙酰半胱氨酸0.3g，加水30 mL溶解后，于20～25℃用碘滴定液（0.05 mol/L ）滴定至溶液顯微黃色，并在30S內(nèi)不褪色。每1mL碘滴定液（O.05 mol/L ）相當(dāng)于l6.32mg的乙酰半胱氨酸。結(jié)果 本方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)、線(xiàn)性范圍試驗(yàn)、重復(fù)性、中間精密度、進(jìn)樣精密度試驗(yàn)均符合方法學(xué)試驗(yàn)要求。供試品溶液在室溫條件下3小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。定量限為25ng。結(jié)論 該測(cè)定方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、精密度高，可作為乙酰半胱氨酸的含量測(cè)定方法，以控制其制劑質(zhì)量。

[關(guān)鍵詞]滴定法 乙酰半胱氨酸 含量測(cè)定

中圖分類(lèi)號(hào)：F426.91 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2016）07-0288-01

乙酰半胱氨酸顆粒是一種止咳化痰藥物，？主要用于術(shù)后咯痰困難，急、慢性支氣管炎，支氣管擴(kuò)張，肺炎，肺結(jié)核，肺氣腫等引起痰液粘稠和咯痰困難者[1]。因此，乙酰半胱氨酸含量的測(cè)定對(duì)于生命科學(xué)具有重要意義。本品分子中含巰基（-SH），可使痰液中糖蛋白多肽鏈的二硫鍵斷裂，同時(shí)對(duì)脫氧核糖核酸纖維也有裂解作用。所以，無(wú)論對(duì)白色黏痰或膿痰，均能起到溶解效應(yīng)，使黏度下降，易于咳出。質(zhì)量目前，乙酰半胱氨酸含量測(cè)定方法主要為高效液相色譜法等，根據(jù)乙酰半胱氨酸結(jié)構(gòu)特點(diǎn)并參照相關(guān)文獻(xiàn)，我們采用滴定法測(cè)定乙酰半胱氨酸含量[2-8]，對(duì)建立方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。

1.儀器與試藥

乙酰半胱氨酸對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：201501）；乙酰半胱氨酸原料（武漢遠(yuǎn)大弘元藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20140107、20140803、20141006）；碘滴定液（杭州市藥品檢驗(yàn)所，濃度：O.05 mol/L ）；其他試劑為分析純。

2.含量測(cè)定方法

根據(jù)乙酰半胱氨酸結(jié)構(gòu)，可知可選擇碘滴定液進(jìn)行滴定， 取乙酰半胱氨酸原料適量，加甲醇使溶解，用O.05 mol/L的碘滴定液滴定，根據(jù)滴定液用量計(jì)算原料含量，同時(shí)進(jìn)行空白校正。精密稱(chēng)取乙酰半胱氨酸0.3g，加水30 mL溶解后，于20～25℃用碘滴定液（0.05 mol/L ）滴定至溶液顯微黃色，并在30S內(nèi)不褪色。每1mL碘滴定液（O.05 mol/L ）相當(dāng)于l6.32 mg的乙酰半胱氨酸。

3.方法學(xué)試驗(yàn)

參照擬定的含量測(cè)定方法進(jìn)行含量測(cè)定，并對(duì)該方法進(jìn)行方法學(xué)研究。

3.1 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取已知含量的供試品、乙酰半胱氨酸對(duì)照品，配制80%、100%、120%測(cè)試濃度溶液各3份，按加樣回收率測(cè)定法測(cè)定。

結(jié)果表明：含量測(cè)定平均回收率為99.18%，RSD為0.1%（n=9），準(zhǔn)確度試驗(yàn)符合測(cè)定要求。

3.2 線(xiàn)性范圍試驗(yàn)

乙酰半胱氨酸濃度在在0.24mg/ml～2.4 mg/ml范圍內(nèi)，濃度與滴定液量之間具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。

3.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算其平均值。

結(jié)果表明：按該含量測(cè)定方法對(duì)乙酰半胱氨酸原料進(jìn)行含量測(cè)定，6次測(cè)定的平均含量為標(biāo)示量的99.5%，RSD為0. 6%（n=6），平行性好，重復(fù)性試驗(yàn)符合測(cè)定要求。

3.4 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，每隔1小時(shí)測(cè)定一次，共測(cè)定5次，計(jì)算其平均值。

結(jié)果表明：鹽酸表柔比星含量分別為99.9%、99.6%、99.2%、98.1%、97.3%，供試品溶液在3小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，測(cè)定含量時(shí)應(yīng)在3小時(shí)內(nèi)進(jìn)行測(cè)定，否則含量測(cè)定結(jié)果會(huì)偏低。

3.5 滴定精密度試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，連續(xù)滴定6次，計(jì)算6次測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

結(jié)果表明：乙酰半胱氨酸測(cè)得含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.06%（n=6），該滴定方法精密度良好。

3.6 中間精密度試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，變動(dòng)因素為不同日期，不同人員，不同廠(chǎng)家滴定液。計(jì)算其平均值以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，考察該測(cè)定含量方法的精密度。

結(jié)果表明：乙酰半胱氨酸平均含量為標(biāo)示量的99.60%，RSD為0.34%（n=6），該測(cè)定方法中間精密度良好。

3.7 定量限

取3.2線(xiàn)性范圍試驗(yàn)中對(duì)照品儲(chǔ)備液，分別進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)苽涑商荻葷舛鹊膶?duì)照品溶液，分別進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得結(jié)果表明該含量測(cè)定方法下乙酰半胱氨酸的定量限為25ng。

4.樣品含量測(cè)定

取三批乙酰半胱氨酸供試品，分別按含量測(cè)定方法溶解并稀釋制成0.5mg/ml的溶液，作為供試品溶液，按照測(cè)定法測(cè)定，結(jié)果三批供試品含量測(cè)定結(jié)果分別為99.9%，100.4%，100.1%。同時(shí)采用高效液相色譜法測(cè)定含量，結(jié)果高效液相色譜法測(cè)定結(jié)果分別為100.1%、99.2%、100.4%，含量測(cè)定結(jié)果一致，擬定本品含量限度為99.0%～101.0%之間，三批供試品含量測(cè)定結(jié)果均符合規(guī)定。

5.討論

空白溶劑不干擾本品含量測(cè)定，采用滴定法測(cè)定乙酰半胱氨酸含量，滴定終點(diǎn)容易判定，通過(guò)準(zhǔn)確度試驗(yàn)、線(xiàn)性范圍試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)、進(jìn)樣精密度試驗(yàn)、中間精密度試驗(yàn)及定量限等方法學(xué)試驗(yàn)，表明我們擬定的滴定法測(cè)定方法具有準(zhǔn)確、可靠、靈敏度高等特點(diǎn)，可有效檢測(cè)乙酰半胱氨酸的含量。

參考文獻(xiàn)

[1] 王佩，吳錫銘.Ⅳ_乙酰半胱氨酸對(duì)暴發(fā)性肝功能衰竭動(dòng)物血漿氨基酸的影響.沖國(guó)藥房，2001，12（10）：591.

[2] 韓曉捷，黃哲蘇，李海生.反相離子對(duì)色譜法測(cè)定乙酰半胱氨酸注射液含量及有關(guān)物質(zhì)的方法研究.天津藥學(xué)，2005年12月第17卷第6期：7-9.

[3] 涂常青，溫欣榮.普魯士藍(lán)光度法測(cè)定藥物中乙酰半胱氨酸含量. 化學(xué)研究與應(yīng)用，2015年6月第27卷第6期：940-946.

[4]方紅英；席建軍；王福根；莊讓笑. 2種測(cè)定N-乙酰半胱氨酸含量的方法比較.中國(guó)藥房，2012年第23卷第8期：732-736.

[5]黃永平，周世文，徐穎，等.乙酰半胱氨酸對(duì)小鼠酒精中毒的影響.中國(guó)藥房，2004，15（7）：403.

[6] 國(guó)家藥典委員會(huì)沖華人民共和國(guó)藥典（二部）.2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：4.

[7] 余自成，朱磊.乙酰半胱氨酸注射液的分光光度測(cè)定.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1998，29（6）：273.

[8]韓曉捷，黃哲蘇，李海生.反相離子對(duì)色譜法測(cè)定乙酰半胱氨酸注射液含量及有關(guān)物質(zhì)的方法研究.天津藥學(xué)，2005，17（6）：7.

作者簡(jiǎn)介：

倫燕妮，女，哈藥集團(tuán)生物工程有限公司，質(zhì)量檢測(cè)中心化驗(yàn)員。