不同溫度多酶清洗劑對(duì)內(nèi)鏡生物膜清除效果的影響

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不同溫度多酶清洗劑對(duì)內(nèi)鏡生物膜清除效果的影響

程秀英1, 伍燕芳2, 陳秀霞3, 蘇瑞瓊1

(廣東省佛山市順德區(qū)中醫(yī)院, 1. 醫(yī)院感染管理科; 2. 消毒供應(yīng)中心; 3. ICU, 廣東 佛山, 528333)

關(guān)鍵詞:不同溫度; 多酶清洗劑; 內(nèi)鏡; 生物膜; 清除效果

近年來(lái)，內(nèi)鏡技術(shù)逐漸普及，在治療多種疾病中發(fā)揮著重要的作用。內(nèi)鏡的消毒工作對(duì)于減少院內(nèi)感染的發(fā)生具有積極意義。清洗是整個(gè)內(nèi)鏡消毒工作中最為關(guān)鍵的步驟，但內(nèi)鏡具有材料特殊、精密度高和結(jié)構(gòu)復(fù)雜的特點(diǎn)，清洗起來(lái)具有一定的難度，極容易形成內(nèi)鏡生物膜[1]。內(nèi)鏡生物膜能保護(hù)細(xì)菌并增加細(xì)菌對(duì)殺菌劑的抵抗性，削弱消毒劑的效果[2]。細(xì)菌生物膜已經(jīng)成為醫(yī)院感染潛在的重要影響因素。多酶清洗劑是清洗內(nèi)鏡時(shí)必須采用的消毒劑，其酶活性在理論上有一個(gè)適宜的溫度。本研究探討不同溫度多酶清洗劑對(duì)內(nèi)鏡生物膜清除效果的影響，報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般材料

選擇本院 2014年8月—2015年9月實(shí)施腹腔鏡手術(shù)后所用內(nèi)鏡器械(內(nèi)窺鏡、穿刺針、氣腹針、抓鉗、剪刀、鈦夾鉗等)共300件。大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC29522，直徑為4 mm，長(zhǎng)100 cm的聚四氟乙烯(Teflon) 管，M-H瓊脂，一次性培養(yǎng)皿。

采用內(nèi)鏡專(zhuān)用清洗毛刷，專(zhuān)用內(nèi)鏡清洗劑(1︰270)，酸化水機(jī)產(chǎn)生的堿性水(pH 12～13); APT生物熒光監(jiān)測(cè)儀，APT檢測(cè)拭子。

1.2方法

按中國(guó)衛(wèi)生部《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范(2004年版)》中規(guī)定的方法進(jìn)行清洗[3]，所有器械均采用標(biāo)準(zhǔn)化機(jī)械清洗。根據(jù)清洗液的溫度不同，300件器械被隨機(jī)分成3組: 25 ℃組，35 ℃組和 45 ℃組，每組 100 件。清洗程序設(shè)定：預(yù)洗 1 min→排水→主洗(加酶)25 ℃、35 ℃或 45 ℃ 5 min→排水→沖洗→排水→沖洗→排水→最后沖洗消毒 90 ℃ 5 min→排水→干燥20 min→清洗步驟結(jié)束。清洗步驟結(jié)束后，取出器械，進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的觀察。所有器械的清洗工作均由同一名清洗專(zhuān)職護(hù)士負(fù)責(zé)。每個(gè)周期清洗的數(shù)量均相同。

1.3觀察指標(biāo)

① 肉眼觀察清洗效果，評(píng)定潔凈度。將清洗后的器械采用帶光源放大鏡檢查清潔度，表面沒(méi)有可見(jiàn)殘留物；用長(zhǎng)棉簽從器械的管腔內(nèi)穿出，關(guān)節(jié)、齒槽處用棉簽擦拭，連續(xù)3次，肉眼觀察棉簽上未沾染任何污跡、雜質(zhì)，達(dá)到完全潔凈為合格。棉簽上沾染有污跡雜質(zhì)呈黃褐色或有血跡等未達(dá)到完全潔凈為不合格。② 采用ATP生物熒光法測(cè)試蛋白殘留，參考ATP Bioluminescence手持熒光檢測(cè)儀的操作指導(dǎo)，客觀評(píng)價(jià)潔凈度。使用拭子涂擦清洗后的器械表面及管腔內(nèi)部，將拭子末端熒光素酶處折斷，使熒光素酶與拭子充分接觸，放入儀器中檢測(cè)殘留在器械表面的蛋白質(zhì)和ATP含量，放入機(jī)器的時(shí)間為15 s, 采樣后立即讀數(shù)，其中合格為0～45，>45為不合格[4]。③ 采用菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定清洗質(zhì)量效果。選取所有器械，用無(wú)菌注射器抽取無(wú)菌蒸餾水沖洗關(guān)節(jié)縫隙、齒槽，連續(xù)3次，然后將沖洗后的蒸餾水注入留檢試管中，送入細(xì)菌室進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)測(cè)定。于37 ℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后計(jì)菌落數(shù)。分別統(tǒng)計(jì)內(nèi)鏡相關(guān)器械放置1、2、5 h時(shí)的菌落計(jì)數(shù)。

2結(jié)果

2.1不同溫度多酶清洗劑對(duì)目測(cè)合格率及蛋白殘留的影響

C組的目測(cè)合格率高于A、B組，蛋白殘留值低于A、B組，ATP生物熒光檢測(cè)合格率高于A、B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組的目測(cè)合格率高于A組，蛋白殘留值低于A組，ATP生物熒光檢測(cè)合格率高于A組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1　不同溫度多酶清洗劑對(duì)目測(cè)合格率及蛋白殘留的影響

與C組相比, *P<0.05。

2.2不同溫度多酶清洗劑對(duì)生物膜細(xì)菌的影響

3種溫度清洗后的生物膜細(xì)菌計(jì)數(shù)均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，但C組在1、2、5 h時(shí)的菌落計(jì)數(shù)少于A、B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組各時(shí)間段的菌落數(shù)低于A組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　不同溫度多酶清洗劑對(duì)生物膜細(xì)菌的影響

與A、B組相比, *P<0.05。

3討論

生物膜是一種細(xì)菌的保護(hù)膜，是指封閉于自分泌的高分子機(jī)制中，黏附在活性或無(wú)活性表面的、有結(jié)構(gòu)的細(xì)菌菌落。研究[4]表明，細(xì)菌生物膜在內(nèi)鏡的管腔中是普遍存在的，其有較強(qiáng)的抵抗機(jī)體免疫和抗生素的能力，人類(lèi)細(xì)菌感染中有65%是由生物膜感染引起的。多酶清洗劑是一種含有蛋白水解酶等多種生物酶的清洗劑，可迅速、高效地分解各種黏附在器械表面的污物，如人體的脂肪、血液、黏液和胃液等，分離污物顆粒以提高清洗的效率[5]。多酶清洗劑還可以進(jìn)入內(nèi)鏡管腔的深部，滲透至管腔的所有表面，將殘留的有機(jī)物分解，使物體表面的生物負(fù)荷降低3～5個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)水平[6]。

多酶清洗劑已經(jīng)成為內(nèi)鏡清洗過(guò)程中必須采用的清洗劑，且多酶清洗劑為生物制劑，理論上其活動(dòng)應(yīng)該受溫度的影響。有文獻(xiàn)[7]報(bào)道，酶的活性一般在30～40 ℃的水溫中最佳，不宜采用40 ℃以上的水進(jìn)行清洗，以免造成蛋白質(zhì)等物質(zhì)凝固，使得清洗的難度增加。近來(lái)有研究[8]顯示，多酶清洗劑在50 ℃的條件下清洗器械的效果最佳，且認(rèn)為與《洗滌酶應(yīng)用手冊(cè)》中的結(jié)論相符。本研究結(jié)果顯示，多酶清洗劑在45 ℃的條件下清洗的質(zhì)量最好，表現(xiàn)為45 ℃的目測(cè)清洗和隔離高，而且蛋白殘留物少，而且細(xì)菌菌落隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，計(jì)數(shù)最少，均優(yōu)于35 ℃組和25 ℃組。這提示適當(dāng)?shù)臈l件下調(diào)高多酶清洗劑的溫度能夠達(dá)到更好的清洗效果。清洗是消毒前重要的步驟，內(nèi)鏡器械的潔凈度影響其滅菌效果。內(nèi)鏡的種類(lèi)繁多，形狀、材質(zhì)多樣，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，清洗的難度大，長(zhǎng)期清洗不徹底可致器械的內(nèi)腔阻塞，關(guān)節(jié)失去靈活性。任群慧等[9]研究結(jié)果顯示，50 ℃的多酶清洗劑對(duì)醫(yī)療器械的清洗效果好，適當(dāng)提高溫度能夠增強(qiáng)酶洗劑的活性，提高清洗的效果。一般情況下，多酶清洗劑在30℃的相對(duì)酶活性只有35%，當(dāng)溫度升高到50 ℃左右時(shí)，酶的活性才能夠得到完全釋放。50 ℃的條件下，并不會(huì)使蛋白質(zhì)和新鮮血液變性，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)變性的起始溫度為60 ℃左右。因此，在50 ℃的條件下使用多酶清洗劑可優(yōu)化清洗體系中的化學(xué)清洗力核心組合，提高清洗體系的整體清洗效能。但有研究[10]認(rèn)為, 50 ℃的水溫是不易人工操作的，人體體溫在36～37 ℃，人手長(zhǎng)期接觸的水的溫度不易超過(guò)35 ℃, 以免造成其他部位相對(duì)缺血，長(zhǎng)此以往將影響工作人員的身體健康。因此，其建議使用35～40 ℃的清洗劑，其溫度接近人體溫度，既能夠達(dá)到良好的清洗效果，又不會(huì)影響人體的健康。本研究顯示，多酶清洗劑在45 ℃的條件下清洗的質(zhì)量最好。

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中圖分類(lèi)號(hào):R 197.39

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2016)06-155-02

DOI:10.7619/jcmp.201606053

收稿日期:2015-10-16