對(duì)腐植酸提高蘋果超氧化物歧化酶活性的研究

王竹良，劉 新，李寶忠，閆振華

對(duì)腐植酸提高蘋果超氧化物歧化酶活性的研究

王竹良1，劉 新2，李寶忠3，閆振華3

（1.煙臺(tái)易施藍(lán)特生物技術(shù)有限公司，山東棲霞265300；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東青島266000；3.山東省棲霞市果業(yè)發(fā)展局，山東棲霞265300）

目前市場(chǎng)流行營(yíng)養(yǎng)保健的SOD蘋果，為了研究在不使用外源性超氧化物歧化酶制劑的情況下，通過(guò)使用腐植酸液體肥，增強(qiáng)蘋果樹自身調(diào)節(jié)機(jī)制，提高自身生產(chǎn)超氧化物歧化酶活性（SOD）能力，從而提高蘋果超氧化物歧化酶的含量，打造出真正意義上的純天然的SOD保健蘋果，設(shè)置了腐植酸液體肥地下灌注＋葉面噴施、常規(guī)施肥（對(duì)照）2個(gè)處理。結(jié)果表明，腐植酸液體肥地下灌注＋葉面噴施處理顯著地提高了蘋果的SOD含量，其SOD值在43.52～51.43U／g，增幅為229.954%～289.92%，平均增幅為260.20%，超過(guò)了國(guó)際SOD蘋果含量標(biāo)準(zhǔn)（20.00U／g）。

腐植酸；超氧化物歧化酶；蘋果

超氧化物歧化酶（SOD）是一種廣泛存在于人體、動(dòng)物、植物、微生物中的一種金屬酶，是一種源于生命體的活性物質(zhì)，是多余自由基的清除劑，能消除生物體在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。人體不斷地補(bǔ)充SOD具有抗衰老的特殊效果。近年來(lái)，SOD廣泛地應(yīng)用于人類疾病的治療、化妝品和保健飲料的生產(chǎn)以及農(nóng)作物抗逆能力增強(qiáng)上。

國(guó)內(nèi)首個(gè)報(bào)道生產(chǎn)SOD蘋果的是在中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)指導(dǎo)下，河南三門峽科技局農(nóng)業(yè)科技咨詢服務(wù)中心利用“益微”SOD（2002年5月29日正式授權(quán)，專利號(hào)為ZL93108849.6），采用葉面噴施的方法［1］，促使蘋果體內(nèi)SOD酶量增加，生產(chǎn)出了高SOD含量并具有保健功能的SOD蘋果。

本文通過(guò)使用純天然、無(wú)污染、綠色環(huán)保的腐植酸液體肥料，補(bǔ)充植物必需的營(yíng)養(yǎng)元素，降低化肥使用量，修復(fù)土壤，在不增加果農(nóng)成本，不加SOD酶制劑的情況下，提高蘋果樹自身營(yíng)養(yǎng)調(diào)節(jié)功能，提高綜合營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)換能力，靠蘋果樹自身生產(chǎn)出純天然的功能性SOD保健蘋果，為揭示提高蘋果SOD含量效果的機(jī)制提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)于2015年3－11月在山東省威海市文登區(qū)葛家鎮(zhèn)龍澤果蔬專業(yè)合作社蘋果園進(jìn)行。供試品種為7年生的紅富士?；A(chǔ)用肥為煙臺(tái)盛地生物科技有限公司生產(chǎn)的“盛地王子”牌有機(jī)肥（有機(jī)質(zhì)含量45%，N、P2O5、KO2≤5%）7 500kg／hm2、史丹利化肥股份有限公司生產(chǎn)的“三安”牌復(fù)合肥（N、P2O5、KO2≥54%）1 500kg／hm2和韓國(guó)生產(chǎn)、煙臺(tái)易施藍(lán)特生物技術(shù)有限公司提供的“易施藍(lán)特”牌中微量元素液體肥30kg／hm2（有效成分可溶性鈣含量≥48.9%，可溶性硅含量≥10.6%，可溶性鐵含量≥1.31%，可溶性鎂含量≥0.66%，可溶性鉀含量≥0.94%，可溶性磷含量≥0.15%）。

試驗(yàn)所用腐植酸液體肥料是由“青島首林有機(jī)肥科技有限公司棲霞分公司”提供的“谷瑪特”牌腐植酸液體肥（腐植酸含量≥30g／L，有機(jī)質(zhì)含量≥60g／L，N、P2O5、K2O含量≥200g／L）。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組排列，重復(fù)3次。每小區(qū)面積為600m2，總面積3 600m2。試驗(yàn)設(shè)2個(gè)處理，分別為：處理1，2015年3月15日地下灌注“谷瑪特”牌腐植酸液體肥60kg／hm2，兌水30 000kg／hm2，葉面噴施1︰500倍腐植酸液體肥8次，具體噴施時(shí)間分別是，5月5日、6月10日、6月30日、7月15日、8月3日、8月26日、9月20日、10月10日；處理2，地下只施用基礎(chǔ)肥料，葉面噴施清水8次，噴施時(shí)間與處理1相同。

取樣方法：隨機(jī)從每個(gè)小區(qū)取樣15個(gè)蘋果，標(biāo)記后分別裝入保溫箱，共計(jì)取樣90個(gè)，采樣時(shí)間為2015年10月26日，樣品采后立即裝入泡沫保溫箱，28日送青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院進(jìn)行檢測(cè)化驗(yàn)，11月7日收到檢測(cè)結(jié)果。

測(cè)定方法：利用氮藍(lán)四唑法檢測(cè)SOD活性［2］。45個(gè)樣品取中部果肉（離果皮2cm），每個(gè)處理混合樣品，經(jīng)液氮速凍后放入－80℃冰箱保存，每個(gè)處理重復(fù)3次。

2 結(jié)果與分析

使用腐植酸液體肥和常規(guī)施肥相比，使用腐植酸液體肥對(duì)蘋果SOD含量有顯著提高的效果，其SOD值在43.52～51.43U／g，增幅為229.954%～289.92%，平均增幅為260.20%，超過(guò)了國(guó)際SOD蘋果含量標(biāo)準(zhǔn)（20.00U／g）。

3 結(jié)論

表1 使用腐植酸液體肥后蘋果SOD含量

本次實(shí)試驗(yàn)由于使用了腐植酸液體肥，蘋果SOD含量有大幅度的提高。進(jìn)一步說(shuō)明腐植酸能夠調(diào)節(jié)植物體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)平衡。眾所周知SOD是一種含有金屬元素（Cu、Zn、Mn、Ni和Fe）的活性蛋白酶，根據(jù)結(jié)合到活性位點(diǎn)的金屬的不同，分為Cu／ZnSOD、FeSOD、MnSOD和NiSOD，土壤中的腐植酸能與Zn、Cu、Fe等多價(jià)離子形成易溶的配位化合物［3］，更有利于SOD產(chǎn)生。

葉面噴施腐植酸能夠提高多種酶的活性，增強(qiáng)植物光合能力刺激植物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累［4］，2015年膠東地區(qū)出現(xiàn)100年來(lái)前所未有的旱情，從1－7月有效降雨不足30mm，有的地區(qū)滴雨未下，蘋果園旱死面積在幾十萬(wàn)畝，有的果園為了保命，在7月下旬將蘋果全部摘掉。在這種情況下使用腐植酸液體肥的果園，在同樣旱情的情況下，7月底以前蘋果長(zhǎng)勢(shì)很慢，均較常年偏小，到7月底8月初下雨以后蘋果長(zhǎng)勢(shì)很快，除對(duì)照外，蘋果等級(jí)80mm以上均占80%以上。噴施腐植酸水溶肥能顯著提高其抗旱性，調(diào)節(jié)氣孔開啟度，減少水分蒸騰［5］，增加葉綠素含量［6－9］，于此同時(shí)顯著改善植物抗氧化系統(tǒng)和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，有利于植物SOD的積累，增加產(chǎn)量，改善品質(zhì)。葉面噴施腐植酸液體肥次數(shù)越多，葉片就越大、厚，葉綠素含量高，抗病能力越強(qiáng)，積累的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)就越多，有利于新陳代謝，SOD含量也就越高。

［1］仇宏昌，張煥珍，高艷華.SOD蘋果發(fā)展前景和生產(chǎn)技術(shù)［J］.果農(nóng)之友，2004（3）：15.

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1005－345X（2016）05－0009－03

：S661.1

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2016－05－05

王竹良（1957－），男，高級(jí)肥料配方師，高級(jí)農(nóng)藝師，主要從事腐植酸肥料、中微量元素研究與推廣。E－mail：wzl639＠163.com